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mtodo en el que se utiliza una corriente elctrica controlada con la finalidad de separar biomolculas segn su tamao y carga elctrica a travs de una matriz gelatinosa.
Molculas ionizadas
Campo elctrico
Molculas positivas
Molculas negativas
Ctodonodo+
FUERZAS ADICIONALES
Movimiento Browniano
Difusin
Se forma un frente
Para reducir la anchura del frente Se reduce el movimiento de las molculas empleando un medio que oponga mas resistencia a dicho movimiento
GEL
la migracin electrofortica de las molculas ser mas lenta, pero el ensanchamiento del frente se vera reducido tambin
Polmero soluble de muy alto peso molecular que atrapa molculas de agua y forma un tamiz que dificulta el movimiento de los solutos
Se aplican pequeas cantidades de la disolucin de protenas a un soporte slido, que se impregna con una solucin tampn Como soporte han sido utilizados papel (celulosa), almidn, poliacrilamida, agarosa y acetato de celulosa
Equipamiento Fuente de poder Cubeta vertical u horizontal Soporte & dos electrodos
Electroforesis bidimensional
Polimerizacin de acrilamida Qumicamente inerte Forma geles transparentes Control del tamao del poro Estabilidad mecnica No inicos Permiten buena visualizacin
neurotoxicidad
la protena migra hasta alcanzar una zona donde el tamao de poro impida cualquier avance
al alcanzarse el limite del poro no se produce una migracin apreciable aunque no se detiene completamente
concentra las bandas en regiones mas estrechas Incrementa el rango de pesos moleculares que se pueden resolver en un mismo gel
polisacrido
Obtenido de algas Permanece liquido por encima de los 50C Forma un gel semislido al enfriarse Constituido por matriz de fibras polimricas Separa molculas grandes (20 000nucleotidos)
Electroforesis Capilar
Realizada sobre un capilar de silica Fundida a 20 a 30 kv en un campo de 400 a 500 v/cm El capilar de silica fundida permite el pasaje de la luz UV
Es posible separar cationes, aniones, protenas, macromolculas y sustancias no cargadas en forma simultanea.
isoelectroenfoque
ctodo nodo
Electroforesis bidimensional
temperatura
Niveles de catalizador