Asignatura: ANLISIS QUMICO

Curso acadmico: 2012/13

Grado: Ciencia y Tecnologa de los Alimentos

Asignatura: ANLISIS QUMICO

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CONTENIDOS

1. 2. 3. 4. 5.

Fundamentos Clasificacin El proceso cromatogrfico Parmetros fundamentales Aplicaciones de la cromatografa

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1. Fundamentos

1903: us columnas de adsorcin para separar pigmentos vegetales

Fase Pigmentos vegetales mvil

Fig.1

Tswett (1872-1919)

Fase estacionaria

Chroma: color
CROMATOGRAFA

Graphein: escribir

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2. Clasificacin

2A. Segn la disposicin de la fase estacionaria:

Cromatografa plana:
Cromatografa en capa fina Cromatografa en papel

Cromatografa en columna Cromatografa de lquidos Cromatografa de gases Cromatografa de fluidos supercrticos

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2. Clasificacin

CROMATOGRAFA PLANA
Papel Cromatografa en papel Cromatografa en capa fina

Fase estacionaria
Adsorbente sobre soporte
Gel de slice, poliamida.

Lmina de vidrio, de plstico o

Tapadera

metlica

METODOLOGA DE TRABAJO
Papel

Frente de fase mvil

Fase mvil

Fig.1

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2. Clasificacin

CROMATOGRAFA EN COLUMNA
Muestra (A+B)

Fase mvil

Fase estacionaria

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2. Clasificacin

2B. Segn el tipo de fase mvil:

Cromatografa de lquidos (LC) Cromatografa de gases (GC)
En columna En columna o en superficie plana

Cromatografa de fluidos supercrticos (SFC)

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2. Clasificacin

CLASIFICACIN DE LOS MTODOS CROMATOGRFICOS EN COLUMNA

Mtodo
LC

Tcnica
Reparto Adsorcin Intercambio inico Exclusin por tamaos

Fase estacionaria
Lquido adsorbido sobre un slido Slido Resina de Intercambio Inico Lquido en intersticios de un slido polimrico Lquido adsorbido sobre un slido Slido Especies orgnicas enlazadas a superficie slida

Tipo de equilibrio
Distribucin entre lquidos inmiscibles Adsorcin Intercambio inico Distribucin/Exclusin Distribucin entre gas y lquido Adsorcin Distribucin entre fluido supercrtico y superficie enlazada

GC

Gas-lquido Gas-slido

SFC

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3. El proceso cromatogrfico
Muestra (A+B)

Fase mvil

Fase estacionaria

B A B

B B

Detector
Seal analtica

t0

t1

t2

t3
A

t4

t5
B

t6

Tiempo, min

t0

t1

t2

t3

t4

t5

t6

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3. El proceso cromatogrfico

ENSANCHAMIENTO DE BANDAS
Columna Comienzo

Fig.1

Perfil de concentracin

Fig.2

Tiempo 10

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4. Parmetros fundamentales

Respuesta del detector

CH4
Tiempo
Inyeccin

Octano

No identificado

Nonano

Fig.1

tr = tr - tm
11

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4. Parmetros fundamentales

Factor de retencin (k)

t t t k= r m = r tm tm

k << 1: elucin demasiado rpida k~ 20-30: elucin demasiado lenta 2 < k < 10: elucin ideal

Factor de selectividad ()

kB = kA

= 1: Los compuestos no estn separados > 1: Los mximos de los picos cromatogrficos
estn separados

Volumen de retencin (Vr)

Vr = tr ur

ur : caudal de la fase mvil

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4. Parmetros fundamentales

ANCHURAS CARACTERSTICAS

wi
tr
Respuesta del detector

Punto de inflexin

wh

t=0 Inyeccin

Tiempo

wi = 2 wh = 2,35 wb = 4

wb

Fig.1

wb = 2wi wb = 1,7wh
13

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4. Parmetros fundamentales

EFICACIA DE UNA COLUMNA: H, L

L N= H
Martin y Synge

H= L

wb = 4

N=

L H

tR N =16 w b N =

n compuestos en el cromatograma:

N
i =1

14

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4. Parmetros fundamentales

Factor de resolucin (Rs)

Fig.1

Rs 1,5: separacin ideal

Rs=

wb,A + wb,B 2

1,5 > Rs > 1: separacin aceptable Rs < 1: separacin inaceptable

15

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4. Parmetros fundamentales

Resolucin = 0,5 Seal Seal

Resolucin = 0,75

Resolucin =1 Seal Seal

Resolucin = 1,5

Tiempo
F1

Tiempo

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5. Aplicaciones de la cromatografa

ANLISIS CUALITATIVO

Disolucin estndar
Seal analtica F1

CH4

Octano

Nonano

Decano

Tiempo

Muestra
Seal analtica

La muestra no contiene metano ni octano. Si los contiene ser a concentraciones inferiores a los correspondientes lmites de deteccin

CH4

Octano Nonano? Decano?

Tiempo

Identificacin positiva: - Comparacin de datos de retencin - Uso de detectores en lnea

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5. Aplicaciones de la cromatografa

ANLISIS CUANTITATIVO rea

Seal analtica

Altura, h

Fig.1
tm tr Tiempo

MTODOS DE ANLISIS CROMATOGRFICO CUANTITATIVO 1. Calibracin con patrones

Preparacin de disoluciones patrn Obtencin de sus cromatogramas
rea de pico, s
0,4

0,3

0,2

0,1

0,0 0 5 10 15 20 25 30

Concentracin, ng ml-1

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5. Aplicaciones de la cromatografa

B. Mtodo del estndar interno

0,35 0,30 0,25

Se aade a disoluciones patrn y a muestras

0,20 0,15 0,10

Analito 1
Seal analtica
Area de pico/Area del estndar interno

0,05 0,00 0 10 20 30 40 50 60

Estndar interno

Concentracin, ng ml-1

Analito 2

Tiempo
Fig.1

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CRDITOS DE LAS ILUSTRACIONES PICTURES COPYRIGHTS

-Logo encabezado de pginas OCW-UM. Autor: Universidad de Murcia. Direccin web: http://ocw.um.es -Pgina 3, Fig.1. Direccin web: http://es.wikipedia.org/wiki/Mija%C3%ADl_Tsvet. -Pgina 5, Fig.1. Direccin web: http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Chromatography_tank.png. -Pgina 10, Fig.1 y Fig.2. Direccin web: http://bcs.whfreeman.com/qca/default.asp. -Pginas 11, 13, 15 y 17, Fig.1. Direccin web: http://bcs.whfreeman.com/qca/default.asp. -Pgina 18, Fig.1. Direccin web: http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Chromatogram_1.jpg. Autor: CCC/CHT Original uploader was Sortjai at nl.wikipedia. -Pgina 19, Fig.1. Direccin web: http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Chromatogram.png. Autor: User Dubaj on sk.wikipedia

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