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Ana Varela
anava60@hotmail.com aleseba23uy@gmail.com
Alejandro Negro
Concepto, clasificacin y mtodos cromatogrficos. Aplicacin, estudio de caso y actividad experimental para educacin media.
Definicin
Mtodo analtico empleado en la separacin, identificacin y determinacin de los componentes qumicos en mezclas complejas.
Mtodo fsico de separacin. Los componentes de una muestra se distribuyen entre dos fases:
FASE ESTACIONARIA Slida o lquida, inmvil y contenida en un soporte FASE MVIL Lquida o gas, pasa a travs de la fase estacionaria
Su inventor fue el britnico ruso Mikhail Tswett. En 1903 aplic por primera vez la cromatografa de adsorcin para separar pigmentos vegetales. Como los componentes separados aparecan como bandas coloreadas, llam al mtodo cromatografa, que proviene del griego chroma "color" y graphos "escribir").
Cromatografa de afinidad
Cromatografa de adsorcin
El soluto se adsorbe en la superficie de las partculas slidas de la fase estacionaria. Es un fenmeno superficial.
Cromatografa de afinidad
Emplea interacciones especficas entre una clase de molculas de soluto y una segunda molcula que est unida covalentemente a la fase estacionaria.
Cromatografa en columna
Cromatografa gaseosa (CG) Cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC)
Cromatografa plana
Fase estacionaria
Sostenida por una placa plana o en los poros de un papel.
Fase mvil
Se mueve a travs de la fase estacionaria por accin capilar o gravedad.
Cromatografa en columna
Fase estacionaria
Dentro de un tubo angosto.
Fase mvil
Forzada a pasar a travs del tubo bajo presin o gravedad.
Cromatoplacas
El adsorbente (fase estacionaria) fijo a un soporte (vidrio, plstico o aluminio).
Adsorbentes ms usados
Papel
Fase estacionaria Agua retenida en el papel
Fase mvil
Se pueden utilizar un nico disolvente o mezclas de disolventes.
Cmara de desarrollo
Recipiente con tapa que cierra hermticamente, donde se forma el cromatograma.
Desarrollo
Es el proceso por el cual una muestra migra a lo largo de la fase estacionaria por accin de la fase mvil.
Tipos de desarrollo
Desarrollo ascendente
Desarrollo descendente
Desarrollo horizontal
Desarrollo ascendente
Desarrollo descendente
Desarrollo bidimensional
Desarrollo horizontal
Aplicacin
Tcnica de inmersin
Tcnica de pulverizacin
Clasificacin de reveladores
Clasificacin de reveladores
Cromatografa en columna
ELUCIN: proceso de paso de un lquido o un gas a travs de una columna cromatogrfica. ELUYENTE: fluido que entra por la columna.
Se hace pasar el analito en forma gaseosa a travs de la columna, arrastrado por una fase mvil gaseosa, llamada gas portador.
Fase mvil: gas (normalmente He, N2 o H2). Fase estacionaria: normalmente lquido no voltil, pero tambin puede ser un slido. Analito: gas o lquido voltil.
Cromatgrafo de gases
Componentes
Inyectores Columnas Detectores
Inyectores
Ayuda a volatilizar la muestra. Retiene productos de descomposicin y no voltiles. Diferentes muestras requieren diferentes tipos de inyeccin.
Columnas
Columnas Tubulares Abiertas
Columnas empaquetadas
Columnas Empaquetadas
Son de Acero Inox. Nquel o Vidrio Contienen soporte slido fino recubierto de fase estacionaria
Detectores
Luego de separados, se tiene que detectar los analitos a medida que van saliendo de la columna.
Utiliza una presin elevada para forzar al disolvente a que pase por una columna que contiene partculas muy finas, consiguiendo as separaciones de gran resolucin.
Es muy utilizada.
Tipos
Reparto Adsorcin Intercambio inico
Exclusin molecular
Afinidad
Fase mvil
La composicin de la fase mvil depende del tipo de analito, del tipo columna cromatogrfica a utilizar y del equipo.
Longitud: 10-30cm Dimetro interno: 2-5 mm Partculas para empaquetamiento de la columna: 3-10 m
Detectores
Dependiendo de la naturaleza del analito buscado varan los tipos de detectores que se pueden utilizar. Estos se clasifican segn la propiedad que midan ya sea de la solucin o del soluto. No existen detectores universales. Mas usados se basan en la absorcin de UV y visible.
APLICACIN
Estudio de Caso
La educacin bsica representa, para una gran proporcin de uruguayos, la nica posibilidad de acceder a aprender QUMICA.
Por lo tanto, elaborar estrategias de enseanza de la QUMICA, plantea para nosotros los docentes, el desafo de conocer y analizar nuestras propias prcticas.
Debemos fomentar que el alumno se acerque lo ms posible al conocimiento cientfico, de tal manera que sea capaz de utilizarlo en su vida cotidiana y as ampliar su comprensin del mundo.
La experimentacin para la enseanza es distinta a la que se realiza en la investigacin cientfica; no es posible pretender que se efecte en cada caso el extenso proceso que conduce al cientfico a un descubrimiento.
Por eso, los experimentos efectuados con fines didcticos tienen siempre un carcter de verificacin mediante el redescubrimiento, la interpretacin o comprobacin.
Revisar y profundizar temas tales como MEZCLAS Y MTODOS DE FRACCIONAMIENTO. Desarrollar capacidades tales como: Observacin Indagacin Reflexin
Generar actitudes positivas hacia el aprendizaje de los conocimientos cientficos que los permite relacionarlos con su entorno.
Qu nos motiva en ocasiones a decir estas expresiones sino hemos probado los postres?
En la actualidad la industria alimenticia emplea los colorantes artificiales con el objeto de modificar las preferencias del consumidor.
O sea el color es el principal atributo para la preferencia de un alimento. Se asocia color con sabor.
TARTRACINA
Se presenta en forma de polvo y es soluble en agua; hacindose de color ms amarillo en tanto ms disuelta est.
Tartracina
Cdigo UE Uso de Otros nombres Cantidad 1 MOL / 1L agua* 1/2MOL / 1L agua* 1/4MOL / 1L agua* 1/8MOL / 1L agua*
(*) 1 litro de agua desmineralizada. Colores aproximados debido a que el color final no es de tonalidad transparente
La tartracina aumenta su potencial comercial porque al ser mezclada con otros colorantes, como el azul, se obtienen diversas tonalidades de verde.
Como colorante posee los cdigos E-102 (Unin Europea) o INS 102 (Sistema Numrico Internacional) o Amarillo 5 Yellow 5 (FDA-USA), lo cual nos posibilita identificar que productos la tienen.
Algunas personas son sensibles a la tartracina y pueden presentar reacciones alrgicas y, aunque la susceptibilidad a presentar reacciones alrgicas es baja (1 de cada 10.000)
Aunque Aumenta entre las personas hipersensibles a la aspirina (el 10% de ellas son alrgicas a la tartracina).
Est relacionada con un gran porcentaje de los casos de hiperactividad en los nios.
ACTIVIDAD PRCTICA
OBJETIVOS:
Fabricar
Interpretar
el cromatograma obtenido
Separar
Materiales y Sustancias
Balanza.
Vaso
de Bohemia. Probeta. Capilares mondadientes. Porta Objetos o lminas de acetato. Varilla de Vidrio. Estufa.
Colorantes
Slica
4
calcio. Medir 60 mL de agua. Verter todo en un vaso de bohemia y mezclar con varilla.
la mezcla, sobre los porta objetos, de tal forma que se forme una capa fina. Poner a calentar en estufa durante 2 hora a 105 C para activar las cromatoplacas.
una solucin de NaCl 1% m/v Colocar dentro del frasco 10 mL de la solucin preparada.
Tapar
el frasco.
SIEMBRA
Trazar
una lnea de siembra con lpiz, a 1,5 cm del borde. Marcar puntos de siembra a 0,5 cm de los bordes y 1,0 cm entre estos e identificarlos.
Sembrar
utilizando capilares, mondadientes. Aplicar de a una vez, dejando secar entre cada aplicacin.
DESARROLLO
Colocar
las cromatoplacas en las cmaras de desarrollo. Esperar hasta que la fase mvil est a 1 cm del borde superior.
Retirar
secar.
y dejar
INTERPRETACIN Y PREGUNTAS
Por
qu se usa lpiz en vez de bolgrafo para marcar la cromatoplaca? Por qu la fase mvil sube por la placa?
Por
qu se separan los colorantes? El colorante verde es una mezcla de colorantes? Las personas alrgicas a la TARTRACINA pueden consumir alimentos de cualquier color?
X, Cromatografa en papel y en capa delgada, Monografa N 16, Secretaria General de la OEA, 1975 Harris, D, Anlisis qumico cuantitativo, Tercera edicin, Revert, 2003. Phillips John S. y otros, Qumica Conceptos y aplicaciones, Mc Graw Hill, Mxico, 2007 Skoog-West-Holler, Qumica Analtica, Sexta edicin, Mc Graw Hill, 1995. Skoog-West-Holler-Crouch, Fundamentos de Qumica Analtica, Editorial Thomson, 2005.
Domnguez.
BIBLIOGRAFA
QUE SON LOS COLORANTES AZOICOS? Los colorantes azoicos forman parte de una familia de sustancias qumicas orgnicas caracterizadas por la presencia de un grupo peculiar que contiene nitrgeno unido a anillos aromticos. Los colorantes azoicos constituyen el grupo ms extenso, de todos los colorantes orgnicos disponibles en el mercado. La estructura qumica de este tipo de colorantes, se caracteriza por la presencia del grupo azo N=N como cromforo, asociados a grupos auxocromo de tipo amino o hidroxilo. La fabricacin de los colorantes azo tiene lugar mediante la diazotacin de una arilamina primaria, obtenindose la sal de diazonio. Para la diazotacin, se emplea cido nitroso, que se obtiene por disolucin de nitrito sdico en agua y posterior adicin de cido clorhdrico. Esta se hace reaccionar con una amina aromtica o un compuesto alcohlico, con objeto de formar el colorante. Esta reaccin denominada de acoplamiento o copulacin, se realiza en medio cido en el caso de las aminas y en medio bsico en el caso de alcoholes. TOXICOLOGIA El grupo azo caracterstico de los colorantes azoicos, es susceptible de reducirse, dando lugar a la formacin de aminas aromticas. Algunas de estas arilaminas aromticas, tienen un potencial cancergeno demostrable