Universidad Estatal

Facultad de ciencias medicas sub. grupo n10 Integrantes: Borbor Silva Peter Larrea Lus Prez Londo Daniela Ramos Vsquez Andrs Valverde Latorre Federico Romo-Leroux Bravo Julio

Temas:
1.
2. 3.

Las Bases Qumicas de la Herencia: La Doble Hlice.

La Qumica de la Herencia El Lenguaje de la Vida La Pista del DNA: Los Microbios Revestidos de Azcar y el factor Transformante La naturaleza del DNA Experimentos con Bacterifagos Evidencia adicional a favor del DNA Los Resultados de Chargaff La Hiptesis se confirma

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5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15.

El Modelo de Watson y Crick

Los Datos Conocidos Construccin del Modelo

Replicacin de DNA
Una Confirmacin de la Replicacin Semiconservadora La Mecnica de Replicacin del DNA Cebadores del RNA y la Direccin de la sntesis Correccin de Pruebas Energtica de la Replicacin del DNA El DNA como portador de Informacin

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17. 18. 19.

Las Bases Qumicas de la Herencia: La Doble Hlice.

A comienzos de la dcada de los 40 ya no haba dudas de la existencia de los genes y el hecho de que estuviesen en los cromosomas. Pero qu eran los genes? Qu Hacan en realidad?
La pregunta es Cmo estos pequeos grumos de materia, los cromosomas, fuesen los portadores de gran cantidad de informacin extremadamente compleja.

La Qumica de la Herencia
Los Cromosomas estn compuestos por tomos ordenados en molculas. Algunos Cientficos pensaban que si se entenda la estructura qumica de los cromosomas, entonces podra llegarse a comprender el funcionamiento de los cromosomas como portadores de la informacin gentica. Este pensamiento marc el comienzo de la vasta gama de investigaciones que conocemos como: Gentica Molecular

La Pista de DNA Los Microbios revestidos de Azcar y el factor transformante

Una evidencia importante del papel del DNAcomo portador de la informacin gentica, aunque no aceptada generalmente, fue aportada por Frederick Griffith, un bacterilogo de salud pblica de Inglaterra. Griffith estaba estudiando la posibilidad de desarrollar vacunas contra Streptococcus pneumoniae, un tipo de bacteria que causa una forma de neumona. Como saba Griffith, estas bacterias, llamadas comnmente neumococos, posean formas virulentas -causantes de la enfermedad- y formas no virulentas, o inocuas. Las virulentas estaban cubiertas por una cpsula de polisacridos y las no virulentas carecan de cpsula. La produccin de la cpsula y su constitucin son determinadas genticamente, es decir, son propiedades hereditarias de las bacterias.

El descubrimiento de la sustancia que puede transmitir caractersticas genticas de una clula a otra result de los estudios con neumococos, las bacterias que causan la neumona. Una cepa de estas bacterias tiene cpsulas de polisacridos (cubiertas externas protectoras), y otra no. La capacidad para fabricar cpsulas y causar la enfermedad es una caracterstica heredada que pasa de una generacin bacteriana a otra, cuando las clulas se dividen.

La Naturaleza del DNA

En 1869 fue aislado por primera vez por un mdico Alemn Fiedrich Miescher, La sustancia era blanca, azucarada, ligeramente cida y contena Fsforo. Se la llamo nuclena y luego se la llamo cido desoxirribonucleico para distinguirlo del cido ribonucleico (RNA). En 1914 Robert Feulgen descubri que el ADN tena una fuerte atraccin al colorante rojo llamado Fucsina. Y esta coloracin de Feulgen se empez a utilizar y demostr que haba la presencia de ADN en todas las clulas y se ubicaba en los cromosomas.

Levene demostr que el DNA poda ser degradado en un azcar de 5 carbonos, un grupo fosfato y 4 bases nitrogenadas:

Adenina y Guanina (Purinas) Timina y Citosina (Pirimidinas).

Cada base nitrogenada esta unida a una molcula de azcar que a su vez est unida a un grupo fosfato para formar una molcula nica un nucletido.

Experimentos con Bacterifagos

En 1940, los microbilogos Max Delbrck y Salvador Luria iniciaron una serie de estudios sobre el papel del DNA usando un grupo de virus que atacan a las clulas bacterianas: los bacterifagos ("comedores de bacterias") o fagos, para abreviar. Cada tipo conocido de clula bacteriana es atacado por un tipo particular de virus bacteriano y, a su vez, muchas bacterias son hospedadores de muchos tipos diferentes de virus. Veinticinco minutos despus de que un solo virus infectaba una clula bacteriana, esa clula estallaba, liberando una centena o ms de virus nuevos, todos copias exactas del original. Otra ventaja (que no se descubri hasta despus de comenzada la investigacin) fue que este grupo de bacterifagos tiene una forma altamente distintiva que permite identificarlos fcilmente con el microscopio electrnico. Los cientficos Hershey y Chase demostraron mediante un memorable experimento que la protena es slo un "envase" para el DNA del bacterifago. Es el DNA del bacterifago el que penetra en la clula y lleva el mensaje hereditario completo de la partcula viral, dirigiendo la formacin de nuevo DNA viral y de las nuevas protenas virales.

(a) Luego de obtener los dos tipos de virus (unos con el DNA marcado con fsforo y otros con las protenas marcadas con azufre) los cientficos infectaron cultivos de bacterias con ambos tipos de fagos marcados. Una vez infectadas (b), las clulas se incubaron en un agitador (c) y luego fueron centrifugadas para separarlas de cualquier material viral que permaneciera fuera de las clulas

(d). Las dos muestras, la que contena

material extracelular y la que contena material intracelular, se analizaron luego en busca de radiactividad. Hershey y Chase encontraron que el 35S haba permanecido fuera de las clulas bacterianas, en las cubiertas virales vacas, y que el 32P haba entrado a las clulas, las haba infectado y haba causado la produccin de nueva progenie viral. Por consiguiente, se concluy que el material gentico del virus era el DNA y no la protena.

Evidencia adicional a favor del DNA

El papel del DNA en la transformacin y replicacin viral constituyo una evidencia de que el DNA es el material Gentico.

Alfred Mirsky; Mostr que las clulas somticas de cualquier especie Dada contienen cantidades iguales de DNA y los gametos contienen precisamente la mitad de DNA que se encuentra en las clulas somticas.

Los Resultados de Chargaff

Chargaff Analizo el contenido de purinas y pirimidinas del DNA de muchos tipos diferentes de seres vivos y encontr que, las bases nitrogenadas no siempre aparecen en proporciones iguales. Las proporciones de las 4 bases nitrogenadas son iguales en todas las clulas de todos los individuos de una especie, pero vara de una especie a otra. Las variaciones en la composicin proporcionan un lenguaje que controlan el crecimiento celular.

La Hiptesis se Confirma
EL DNA es el material gentico pero an queda una pregunta crtica: De qu manera est contenida la informacin en el DNA? Esta respuesta se encuentra en la propia estructura de la molcula de DNA
1.- Debe llevar la informacin gentica de clula madre a hija y de generacin en generacin. 2.- Debe contener informacin para producir una copia de si mismo. 3.- Debe ser qumicamente estable, de otro modo no podra llevar la informacin gentica de generacin en generacin.

4.- Debe ser capaz de mutar. Si se comete algn error debe ser copiado igual con el error y de esa manera habra la evolucin por seleccin natural.
El DNA tena el tamao, la configuracin y la complejidad requeridos para satisfacer estos requisitos, y se lo acept universalmente como Material Gentico.

El Modelo de Watson y Crick

James Watson y Francis Crick se dedicaron a examinar y constrastar todos los datos existentes acerca del DNA, y a unificarlos en una sntesis significativa. En la dcada de los 50 James Watson llego a Inglaterra para estudiar los problemas de la estructura molecular. All en el laboratorio conoci al fsico Francis Crick. Ambos estaban interesados en el DNA y pronto comenzaron a trabajar juntos para resolver el problema de su estructura molecular.

Los Datos Conocidos

En el momento en que Watson y Crick comenzaron sus estudios, ya haba un cmulo de abundante informacin saba que la molcula de DNA era muy grande, tambin muy larga y delgada, y que estaba compuesta de nucletidos que contenan las bases nitrogenadas

1.- Se saba que la molcula de DNA era grande, larga y delgada y compuesta de nucletidos y que contenan las bases nitrogenadas.
2.- Los nucletidos estn ensamblados en unidades repetidas de 4.

3.- Pauling sugiri que la cadena de DNA se asemejaba a una hlice con giros sucesivos.
4.- Las fotografas del DNA por difraccin de rayos X, mostraban patrones que mostraban giros de una hlice gigante. 5.- La cantidad de Timina es igual a la Adenina y que la Guanina es igual a la Citosina. A=T G=C

Construccin del Modelo

Reuniendo los diferentes datos, los dos cientficos fueron capaces de deducir que el DNA es una doble hlice, entrelazada y sumamente larga. Si se tomase una escalera y se la torciera para formar una hlice, manteniendo los peldaos perpendiculares, se tendra un modelo grosero de la molcula de DNA. Los dos parantes o lados de la escalera estn constituidos por molculas de azcar y fosfato alternadas. Los peldaos perpendiculares de la escalera estn formados por las bases nitrogenadas adenina, timina, guanina y citosina. Cada peldao est formado por dos bases, y cada base est unida covalentemente a una unidad azcar-fosfato. En la doble hlice, las bases enfrentadas se aparean y permanecen unidas por puentes de hidrgeno, esos puentes relativamente dbiles que Pauling haba encontrado en sus estudios sobre la estructura de las protenas. De acuerdo con las mediciones efectuadas mediante rayos X, las bases apareadas (los peldaos de la escalera) deban ser siempre combinaciones de una purina con una pirimidina. Notaron tambin que la cadena tiene direccin: cada grupo fosfato est unido a un azcar en la posicin 5' -el quinto carbono en el anillo de azcar- y al otro azcar en la posicin 3' -el tercer carbono en el anillo de azcar-. As, la cadena tiene un extremo 5' y un extremo 3'.

Encontraron otra restriccin interesante e importante. No solamente las purinas no podran aparearse con purinas, ni las pirimidinas con pirimidinas, sino que, a causa de las estructuras particulares de las bases, la adenina slo poda aparearse con la timina, formando dos puentes de hidrgeno (A=T) y la guanina solamente con la citosina, formando tres puentes de hidrgeno (G=C). Las bases apareadas eran complementarias. Las dos cadenas corren en direcciones opuestas, es decir, la direccin desde el extremo 5' al 3' de cada cadena es opuesta y se dice que las cadenas son antiparalelas. Aunque los nucletidos dispuestos a lo largo de una cadena de la doble hlice pueden presentarse en cualquier orden, su secuencia determina el orden de los nucletidos en la otra cadena. Esto es necesariamente as, porque las bases son complementarias (G con C y A con T).

El armazn de la hlice est compuesto por las unidades azcar-fosfato de los nucletidos. Los peldaos estn formados por las cuatro bases nitrogenadas, adenina y guanina (purinas) -cada una de ellas con un anillo doble en su estructura- y timina y citosina (pirimidinas), ms pequeas, cada una con un slo anillo. Cada peldao est formado por dos bases. El conocimiento de las distancias entre los tomos fue crucial para establecer la estructura de la molcula de DNA. Las distancias fueron determinadas con fotografas de difraccin de rayos X del DNA, tomadas por Rosalind Franklin y Maurice Wilkins.

En el modelo de Watson y Crick, cada nucletido consiste en un azcar desoxirribosa, un grupo fosfato y una base prica o pirimdica. Ntese la secuencia repetida azcar-fosfato-azcar-fosfato que forma el esqueleto de la molcula. Cada grupo fosfato est unido al carbono 5' de una subunidad de azcar y al carbono 3' de la subunidad de azcar del nucletido contiguo. As, la cadena de DNA tiene un extremo 5' y un extremo 3' determinados por estos carbonos 5' y 3'. La secuencia de bases vara de una molcula de DNA a otra.Las cadenas se mantienen unidas por puentes de hidrgeno (representados aqu por guiones) entre las bases. Ntese que la adenina y la timina pueden formar dos puentes de hidrgeno, mientras que la guanina y la citosina pueden formar tres. Dados estos requerimientos de enlace, la adenina puede aparearse slo con la timina y la guanina slo con la citosina. As, el orden de las bases en una cadena TTCAG- determina el orden de las bases en la otra cadena -AAGTC. Las cadenas son antiparalelas, es decir, la direccin desde el extremo 5' a 3' de una es opuesta a la de la otra.