Laboratorio # 6:

El Microscopio y la Clula

Objetivos del laboratorio

Identificar las partes de un microscopio compuesto y de un microscopio d e diseccin para poder usarlos correctamente. Reconocer las diferencias entre el microscopio compuesto, electrnico, d e electrones y estereoscopio. Preparar laminillas simples para observar bajo el microscopio y aprender a enfocarlas a diferentes magnificaciones. Calcular el dimetro del campo de visin, su aumento total y el aumento ap roximado de lo observado con el microscopio. Describir las caractersticas de distintos tipos de clulas; sus organelos y funciones. Discutir la importancia evolutiva del aumento en complejidad celular de los organismos
organizacin unicelular a multicelular

EL MICROSCOPIO
Instrumento ptico utilizado para observar organismos muy pequeos que no se ven a simple vista Ojo humano

Tiene un poder de resolucin de 200 micrmetros. Poder de resolucin = medida de la capacidad para distinguir un objeto de otro Distancia mnima entre dos objetos para que sean percibidos como dos objetos separados. 1 milmetro (mm) = 1,000 micrmetros (m). Hay aproximadamente 25,000 micrmetros en una pulgada.

EL MICROSCOPIO
Tipos de microscopios: Microscopio de luz Compuesto Diseccin Microscopio electrnico De rastreo De transmisin Microscopio de contraste de fase Microscopio de fluorescencia Microscopio de luz:

Magnifica y enfoca los rayos de luz por medio de lentes Rayos de luz naturales o artificiales

EL MICROSCOPIO
Ejemplos: Microscopio compuesto: Estudia fragmentos pequeos y finos Distintas magnificaciones Fuente de luz debajo de la muestra Objetos de 0.2 a 100 micrmetros
Microscopio de diseccin: Estudia especmenes en tres dimensiones Baja magnificacin Fuente de luz sobre la muestra
Objetos de 0.05 a 20 milmetros

Tipos de microscopio
Microscopio de campo oscuro:
La luz no pasa directamente travs del organismo y slo se observa la luz reflejada de la muestra, por lo cual sta se ver brillante sobre un fondo oscuro.

Microscopio de contraste de fases:

El ndice de refraccin de la luz es mayor en la muestra que en el medio donde se coloca, lo cual hace que sta se vea oscura sobre un fondo claro.

Los microscopios de campo oscuro y de contraste de fases se usan para observar organismos, vivos o muertos, que no pueden teirse.

Tipos de microscopio
Microscopio de fluorescencia: Usa luz ultravioleta en vez de luz visible Organismos o clulas con compuestos fluorescentes emiten luz visible al iluminarlos con luz ultravioleta, por lo cual brillan sobre un campo oscuro.

Microscopio electrnico
Utiliza rayos de electrones que se magnifican y se enfocan en una placa fotogrfica por medio de lentes electromagnticos (imanes).
Aumento - 200,000 veces (200,000x) Usado para observar organismos o partculas sumamente pequeas.

Transmisin: Observar detalles internos. Rastreo o scanning : Estudiar la superficie de la muestra tridimencional

Microscopio Electrnico de Rastreo

Rango visual de los microscopios

Clulas nerviosas Objetos grandes Huevo de gallina

Clulas eucariticas Bacterias

Virus Lpido

tomo

1 km

1m

0.1 m

1mm

50 m

8 m

50 nm

3 nm

0.1 nm

Ojo humano Microscopio de diseccin

Microscopio compuesto Microscopio electrnico

Partes pticas del Microscopio

Ocular
Objetivos Lmpara Condensador

Partes pticas del Microscopio

Ocular o lente: Aumentar imagen formada por el objetivo. Tiene magnificacin de 10x Monocular-Binocular Muestran un indicador para facilitar la posicin de algn punto especfico Anillo de enfoque del lente ocular izquierdo Ajuste de distancia interpupilar

Partes pticas del Microscopio

Objetivos: Objetivo de rastreo (4X)Se observa el espcimen en su totalidad. Localizas la imagen. Objetivo de baja potencia (10x) - Se usa para enfocar la imagen Objetivo de alta potencia (40x) Se ve la imagen con mayor detalle Objetivo de inmersin de aceite (100x)- Aade aceite a la muestra antes de cambiar de objetivo

 La magnificacin total del microscopio se calcula multiplicando la magnificacin del objetivo por el ocular.
Ejemplos: ocular Baja potencia 10x Alta potencia 10x Rastreo 10x objetivo Total * 10x = 100x * 40x = 400x * 4x = 40x

Partes pticas del Microscopio

Lmpara: Fuente de luz Condensador - lente colocado debajo de la platina

Partes Mecnicas del Microscopio

Diafragma Al disminuir la apertura del diafragma, se aumenta el contraste de la imagen y la profundidad del foco, pero se disminuye la resolucin.

Para obtener la mejor imagen posible hay que cambiar la apertura del diafragma cada vez que se cambia el lente objetivo.

Filtro azul - Absorbe el exceso de luz roja y amarilla que produce

el iluminador de tungsteno para que la iluminacin sea ms similar a la luz natural. Tornillo macromtrico o ajuste grueso Tornillo micromtrico o ajuste fino

Partes Mecnicas del Microscopio

Platina Ajustadores de platina Carro mecnico Ganchos Brazo Base Revlver

Microscopio parafocal
Microscopio en donde todo lo que hay que hacer es girar el revlver hasta que el objetivo de alta potencia est en posicin y la imagen estar enfocada. Si el microscopio no es parafocal, se debe aumentar la distancia entre el objetivo y la laminilla antes de girar el revlver para que el objetivo no vaya a chocar con la laminilla. Entonces se coloca en el objetivo en posicin y se vuelve a enfocar la imagen.

La clula

LA CLULA
Unidad bsica de los organismos Teora celular

Unicelular
Caractersticas de los seres vivos: Movimiento Respiracin

Metabolismo
Reproduccin Responden a estmulos

Pluricelular

LA CLULA
Dos tipos de clulas: Eucaritica Procaritica

Parte Experimental

Instrucciones generales
Limpiar los lentes del microscopio siempre, antes y despus de usarlo con papel de lente. Colocar la laminilla encima de la platina, centralizan do el rea del cubreobjetos en la abertura de la misma Encender el microscopio Colocar el objetivo de baja potencia en posicin a utilizar Mirar por el ocular intentando localizar la imagen en el rea observada (campo visual)

Uso de laminilla de letra e

Coloque la laminilla en la plataforma en la misma posicin que la observ. Enfoque con el objetivo 4X. (Utilice el tornillo macromtrico girndolo suavemente hasta observar la imagen). Cuando obtenga una imagen ntida no mueva ms el tornillo. Mientras observa a travs del microscopio, mueva la laminilla hacia la izquierda y luego hacia abajo

Hacia dnde se mueve la imagen?

Uso de laminilla de letra e

Luego de enfocar la laminilla de la letra e utilizando el lente 4X, cambie el lente al 10X girando el revlver. La imagen debe permanecer enfocada. Si necesita aclarar ms la imagen, utilice solamente el tornillo micromtrico. Dibuje la imagen que observa en el campo visual.

Uso de laminilla de letra e

Cambie ahora al objetivo 40X. La imagen debe permanecer en foco. Si necesita aclarar ms la imagen utilice solamente el tornillo de ajuste micromtrico. Dibuje la imagen que observa en el campo visual.

Diferentes montajes dependiendo de lo que se desee observar

montajes hmedos o laminillas de tejidos infiltrados en plstico o parafina.

Laminilla con hilo de colores (Profundidad de foco)

Obtenga una laminilla fija con hilos de colores. Usando el objetivo de menor aumento (4X) localice el punto donde los tres hilos se cruzan. Determine el orden de los hilos en su laminilla de arriba hacia abajo enfocando con el tornillo macromtrico.

Laminilla con hilo de colores (Profundidad de foco)

Segn vaya enfocando, usted ver que los diferentes hilos enfocan a diferente nivel.
Un hilo o parte de un hilo est en foco mientras que los otros se vern empaados. Enfocando hacia arriba y hacia abajo los hilos, usted puede percibir la profundidad de foco que no es evidente cuando el foco se deja en un mismo punto.

Clula Vegetal
Observacin de hoja de Elodea Coloque una hoja de Elodea sp. en una gota de agua sobre una laminilla limpia y cbrala con un cubreobjeto. Contesta: Qu estructuras y organelos puede distinguir ? Qu estructuras no se observan en clulas animales? Puede observar el movimiento citoplsmico?

Clula Animal
Preparacin de laminilla Con un palillo de dientes, raspe leveme nte la superficie interior de su mejilla y coloque las clulas epiteliales sobre u na laminilla con azul de metileno. Coloque cubreobjetos Examine la preparacin; observe la membr ana celular, el ncleo y el citoplasma.

Clulas (Volvox)

Elodea

Asignacin
Tabla 6.1 Comparacin de cuatro tipos de microscopio Tipo de lentes Estereoscopio Compuesto TEM SEM Magnificacin mxi ma Resolucin

Preparacin de mue stra Usos