Tema 4

La revolucin gentica

1.- HISTORIA DE LA GENTICA Ya en la prehistoria se aprovechaba la observacin de que algunos caracteres pasaban de una generacin a otra para seleccionar las variedades de animales y vegetales ms deseables y mejorar as la agricultura y la ganadera

Mendel puso de manifiesto que hay unos factores hereditarios incluidos en las clulas reproductoras que pasan de padres a hijos y que son los responsables de los caracteres externos de los seres vivos Desde 1910 esos factores hereditarios reciben el nombre de genes

1.1 POSTULADOS PREMENDELIANOS DE LA HERENCIA Preformismo:La observacin de espermatozoides con un microscopio en el s.XVIII hizo creer que tras la fecundacin, solo por crecimiento, estos daban individuos adultos

Epignesis: Al mejorar las tcnicas microscpicas se postul que adems de crecimiento haba transformaciones estructurales.

Pangnesis.Los rganos producen unas gmulas que viajan por la sangre a los genitales y de ah a los hijos.

Caracteres adquiridos (Lamarck): Teora de Lamarck, que consideraba que las variaciones eran adquiridas y hereditarias. Los individuos cambian para adaptarse al medio y ests caractersticas se transmiten a los descendientes
Plasma germinal (Weissmann):Existe un plasma formado por los tejidos reproductores que se perpeta a s mismo. Las modificaciones del plasma germinal originaran modificaciones en el cuerpo. Hay diferencia entre clulas germinales y clulas somticas.

1.2 HERENCIA MENDELIANA Monje agustino catlico y naturalista, en la actual Repblica Checa, que describi las llamadas Leyes de Mendel que rigen la herencia gentica, por medio de los trabajos que llev a cabo con diferentes variedades de la planta del guisante. Su trabajo no fue valorado cuando lo public en el ao 1866.
Hugo de Vries, botnico holands, junto a Carl Correns y Erich von Tschermak, redescubrieron las leyes de Mendel por separado en el ao 1900.

Mendel seleccion siete caracteres para sus experimentos, cada uno de los cuales tena dos posibilidades y obtuvo razas puras de guisantes para cada uno de estos caracteres. Posteriormente cruz entre s las razas puras que presentaban diferencias respecto a uno de los caracteres elegidos

Conclusiones de Mendel: a) La herencia se transmite por factores hereditarios almacenadas en los gametos. Dichos factores son de procedencia materna y paterna que se unen en el nuevo individuo sin mezclarse, y volvindose a separar al formar las clulas reproductoras. b) La herencia sigue normas estadsticas sencillas.

1.3 HERENCIA POSMENDELIANA 1900. Redescubrimiento de las Leyes de Mendel. 1910. Experimentos de Morgan. Demuestra que los genes estn en los cromosomas, y los que estn en el mismo cromosoma se transmiten juntos y los que estn en cromosomas independientes se transmiten por separado. Se comprob la existencia de recombinacin o intercambio entre cromosomas homlogos (los dos cromosomas iguales que proceden uno del padre y otro de la madre)
1944. El ADN es el portador de la informacin gentica (Experimentos de Avery)

2.- BIOLOGA MOLECULAR

Ciencia que nace a partir del descubrimiento de la estructura del ADN (1953, Watson y Crick) Se dedica a 1.-Estudio de la vida a nivel molecular 2.-Esclarece la estructura molecular del ADN 3.- Estudia los procesos de formacin de un ser vivo a partir del ADN: Replicacin del ADN Transcripcin a ARN Sntesis de protenas Regulacin de los genes

2.1 MODELO MOLECULAR DEL ADN

El ADN est formado por dos cadenas antiparalelas de nucletidos. Los puentes de hidrgeno que unen ambas cadenas dan estabilidad a la estructura . La combinacin de las secuencias de bases nitrogenadas (A, T, G y C) forma los distintos ADNs.

Esta enorme variabilidad origina todas las diferentes protenas que podemos encontrar en los seres vivos. Las dos cadenas son complementarias Las uniones siempre son:
A-T C-G

2.2 RELACIN ENTRE LOS GENES Y LAS PROTENAS El ADN (ms concretamente, los genes que contiene y que se definen como segmentos de ADN que codifican una protena) contiene la informacin con las caractersticas de los seres vivos. Esta informacin se expresa en forma de protenas.
Las protenas son las que finalmente definen al ser vivo, junto con la influencia que puede ejercer el medio ambiente

La relacin entre genes y protenas se expresa a travs del dogma central de la Biologa Molecular (1970, Crick) :

ADN

Transcripcin

ARN m

Traduccin

Protena s

Si incluimos a algunos virus como los retrovirus ( cido nucleico es el ARN)

Replicacin

ADN

Transcripcin
Retrotranscripci n

ARN m

Traduccin

Protena s

A raz de la modificacin del Dogma central de la Biologa Molecular se han cuestionado los conceptos de gen y ADN basura (ADN que no codifica informacin para protenas). Actualmente se cree que este ADN basura puede tener un papel regulador importante, as como que un gen puede dar lugar a varias protenas (hasta hace muy poco, el concepto fundamental era un gen, una protena).

REPLICACIN: La replicacin es el proceso en que se sintetizan dos copias idnticas de ADN tomando como molde otra cadena de ADN. Es una replicacin semiconservativa ( los nuevos ADN tienen una hebra antigua y otra nueva)
Se realiza antes de cada divisin celular para que las clulas hijas lleven la misma informacin que la clula madre.

Se basa en la complementariedad de las bases nitrogenadas (al igual que en los procesos de reparacin de secuencias daadas y transcripcin del ARN)

Para la replicacin es necesario la separacin de las dos hebras de la cadena ; cada una de las cuales servir de molde para sintetizar la complementaria ( siempre A-T, G-C) Para esta sntesis se precisa desoxirribonucletidos y una enzima que los una : ADN polimerasa

TRANSCRIPCION
Es la sntesis de ARNm tomando como molde una hebra de ADN

Se basa en el mismo mecanismo (complementariedad de bases) que la replicacin, pero intervienen enzimas diferentes y se sustituye la base nitrogenada Timina por Uracilo. En eucariotas el ARN resultante sufre un proceso de maduracin, y el ARN maduro sale al citoplasma celular. El ARNm lleva la informacin a los ribosomas donde se producir la sntesis de protenas

TRADUCCIN Es la formacin de protenas a partir de la informacin que lleva el ARNm Tiene lugar en los ribosomas (citoplasma) Son necesarias otras molculas como: - ARNt - Aminocidos -Enzimas diversos El proceso de traduccin se hace segn el Cdigo Gentico

Las protenas estn formadas por aminocidos. El orden de colocacin de los aminocidos viene dado por la secuencia de bases del ARNm. Cada tres bases de ARNm (triplete o codn) indica la colocacin de un aminocido.

AUG - CCU AAG UUU GCU CUC .

ME T

PR O

LYS

PHE

AR G

LEU

PROTENA

Con las 4 bases nitrogenadas (A, U, G, C) se pueden formar 64 tripletes diferentes, que llevan la informacin para los 20 aminocidos que forman todas las protenas de los seres vivos

El cdigo gentico est compuesto por codones (codn= 3 bases nitrogenadas) que definen el proceso de traduccin

61 codones para aminocidos (existen 20 aminocidos diferentes) 3 codones de terminacin

Caractersticas del cdigo gentico: Es un cdigo universal. Todos los seres vivos conocidos lo utilizan (hay una excepcin, las mitocondrias, un orgnulo del interior de las clulas eucariotas).
Es un cdigo redundante o degenerado. Hay ms tripletes de bases que aminocidos.

Es un cdigo sin superposicin o sin solapamientos: dos aminocidos sucesivos no comparten nucletidos de sus tripletes. La lectura del ARN mensajero es continua, sin interrupciones. Cualquier prdida o ganancia de un slo ribonucletido produce a partir de ese punto una modificacin de la pauta de lectura, cambiando todos los aminocidos desde el lugar de la alteracin.

3.- INGENIERA GENTICA Se puede definir como la formacin in vitro de nuevas combinaciones de material gentico, por medio de la insercin de un ADN de inters en un vehculo gentico (vector), de modo que tras su introduccin en un organismo husped, el ADN hbrido (recombinante) se pueda multiplicar, propagar, y eventualmente expresarse

Aplicaciones: ayuda a averiguar el funcionamiento de los genes y se utiliza en la secuenciacin de genomas, diagnstico de enfermedades, terapia gnica, sntesis de sustancias de inters, obtencin de animales y vegetales transgnicos

a) ADN recombinante El ADN recombinante es aquel que tiene fragmentos de distinta procedencia. De forma natural existen ADN recombinantes, cuando los virus insertan su ADN en el ADN de la clula husped.
Se pens hacer lo mismo de manera artificial en el laboratorio utilizando enzimas de restriccin. Estas enzimas, procedentes de bacterias, tienen la capacidad de reconocer una secuencia determinada de nucletidos y las cortan por lugares concretos

Los fragmentos tienen bordes cohesivos o complementarios a otros extremos de ADN cortados con la misma enzima
Por lo tanto, es posible quitar un gen de la cadena principal y en su lugar colocar otro De esta manera es posible introducir ADN de unos organismos en el genoma de otros. El ADN introducido se expresar como propio, fabricndose en el organismo receptor la protena para la que codifica

Para llevar el ADN recombinante desde un donador hasta la clula receptora se utilizan los llamados vectores gnicos en los que se inserta el gen a transferir. Son fcilmente manipulables y pueden transferirse hasta la clula husped para obtener las clulas transgnicas.
Los principales vectores utilizados son: Plsmidos Bacterifagos Csmidos Cromosomas artificiales de levaduras

En los vectores, adems del gen de inters se colocan otros genes denominados marcadores. Son genes que permiten identificar aquellas clulas que han incorporado el ADN del vector.

En general, estos genes dan a la clula que los contiene resistencia a antibiticos, de tal forma que si aadimos el antibitico a una mezcla de clulas con y sin el ADN de inters, las que no lo tengan (y por tanto, tampoco el gen de resistencia al antibitico), morirn

b) Amplificacin del ADN El estudio y manipulacin del ADN requiere muchas copias de los fragmentos de ADN que se quieren estudiar.
El mtodo clsico de obtencin de copias era la clonacin mediante bacterias. Era un proceso lento y costoso.

En 1983, Mullis diseo un mecanismo para obtener mltiples copias de forma mucho ms sencilla. Este mtodo denominado PCR (Polimerasa Chain Reaction) ha sido determinante en mltiples reas del conocimiento que utilizan ADN

Esta tcnica se fundamenta en la propiedad natural de las ADN polimerasas para replicar hebras de ADN, para lo cual emplea ciclos de altas y bajas temperaturas alternadas para separar las hebras de ADN recin formadas entre s tras cada fase de replicacin y, a continuacin, dejar que vuelvan a unirse a polimerasas para que vuelvan a duplicarlas.

c) Mutaciones Es todo cambio en la informacin hereditaria (ADN, cromosomas o cariotipo). Las mutaciones pueden producirse tanto en clulas somticas (no se heredan) como en clulas germinales (se transmiten a la descendencia). Las mutaciones pueden ser: naturales (espontneas) o inducidas (provocadas artificialmente con radiaciones, sustancias qumicas u otros agentes mutgenos).

Las propiedades adquiridas por mutaciones son por lo comn negativas para el organismo, a veces son neutras y en ocasiones pueden ser beneficiosas en determinados ambientes

Segn la extensin del material gentico afectado se distinguen los siguientes tipos de mutaciones: 1) Gnicas. Son aquellas que producen alteraciones en la secuencia de nucletidos de un gen. 2) Cromosmicas estructurales. Son los cambios en la estructura interna de los cromosomas. 3) Cromosmicas numricas o genmicas. Son alteraciones en el nmero de los cromosomas propios de la especie. Pueden ser: Euploidas y Aneuploidas

4.- PROYECTO GENOMA HUMANO El proyecto fue fundado en 1990 por el Departamento de Energa y los Institutos de la Salud de los Estados Unidos, con un plazo de realizacin de 15 aos. Debido a la amplia colaboracin internacional (ms de 20 pases implicados), a los avances en el campo de la genmica y la informtica un borrador inicial del genoma fue terminado en el ao 2000.

El objetivo inicial del Proyecto Genoma Humano fue no slo determinar los 3 mil millones de pares de bases en el genoma humano, sino tambin identificar todos lo genes en esta gran cantidad de datos.

Este proyecto supone la realizacin de dos tipos de mapas:

Mapas genticos: Estos mapas indican la posicin relativa de los diferentes genes Mapas Fsicos: de mayor resolucin, pues muestra la secuencia de nucletidos en la molcula de ADN que constituye el cromosoma. Se establece la situacin real de los genes en los cromosomas

RESULTADOS: Algunos de los aspectos que ms han llamado la atencin es el bajo nmero de genes encontrados (en comparacin a lo esperado), as como lo repetitivo, similar y duplicado que es el genoma humano.
Las clulas humanas tienen 46 cromosomas (44 autosomas y2 cromosomas sexuales), distribuidos en dos series (una de procedencia paterna y otra materna). Cada serie tiene unos 3200 millones de bases y menos de 25000 genes. El resto es el ADN basura (cerca del 95%) El trabajo de interpretacin del genoma no ha hecho nada ms que empezar. Los beneficios de conocer e interpretar el genoma se esperan fructferos en los campos de la medicina y de la biotecnologa.

5.- BIOTECNOLOGA Segn el Convenio sobre Diversidad Biolgica de 1992, la biotecnologa se define como: Toda aplicacin tecnolgica que

Se han aplicado procesos biotecnolgicos desde muy antiguo (aunque sin saber nada de biotecnologa): 6000 a. C.: Medio Oriente, elaboracin de cerveza con levadura. 4000 a. C.: China, fabricacin de yogur y queso por fermentacin lctica utilizando bacterias. 2300 a. C.: Egipto, produccin de pan con levadura

utilice sistemas biolgicos y organismos vivos o sus derivados para la creacin o modificacin de productos o procesos para usos especficos

Hoy en da, la biotecnologa moderna se basa en la ingeniera gentica.

Inconvenientes de la biotecnologa: 1. Falta de control sobre los microorganismo manipulados. 2. Produccin y almacenamiento de armas biolgicas. 3. Aparicin de especies nuevas con funcin desconocida en los ecosistemas. 4. Transito de genes entre especies. 5. Agudizar la diferencia entre pases ricos y pobres.

5.1 BIOTECNOLOGA MDICA Algunos ejemplos de las aplicaciones en medicina son:

Diseo de organismos para producir antibiticos. Desarrollo de vacunas ms seguras y nuevos frmacos. Diagnsticos moleculares. Terapias regenerativas Desarrollo de la ingeniera gentica para curar enfermedades a travs de la manipulacin gnica. Trasplante de rganos a partir de animales modificados genticamente.

Las dos aplicaciones principales son: 1.- obtencin de frmacos

Se obtienen a partir de microorganismos que contienen el gen que produce la protena de inters farmacolgico (insulina, hormona del crecimiento)
Las principales ventajas son: Se controla mejor la produccin, disminuye el riesgo de contaminacin, se abaratan los costes Por el mismo procedimiento se pueden fabricar vacunas, evitando el riesgo de utilizar virus atenuados

2.- DETECCIN DE ENFERMEDADES Consiste en poner en contacto ADN de un individuo con secuencias de genes responsables de una determinada enfermedad. Las hebras del ADN del paciente se separan y si hibridan con el ADN de la enfermedad, es que el paciente tiene ese gen. La terapia gnica consiste en modificar los genes anmalos para impedir que se manifieste la enfermedad o curarla una vez manifestada.

En las clulas afectadas se puede introducir una copia correcta del gen defectuoso mediante vectores (infeccin vrica), corrigiendo el problema.

El proceso se podra hacer incluso en las clulas germinales, pero esto plantea problemas ticos.
Es una tcnica prometedora pero an en una fase muy temprana, con todava muy pocos logros significativos.

5.2 BIOTECNOLOGA AGRCOLA Se basa en la modificacin de plantas por IG para que generen protenas de inters. Son las plantas transgnicas. Los principales objetivos son: Lograr plantas resistentes a herbicidas, bacterias, virus e insectos Aumentar el rendimiento fotosinttico (ms produccin) Fijacin del nitrgeno atmosfrico Mayor calidad de los productos Obtener plantas con protenas de inters comercial (vacunas, interferones, vitaminas)

5.3 BIOTECNOLOGA GANADERA Consiste en la alteracin gentica de animales para mejorar el rendimiento que de ellos se obtiene. La investigacin se centra en la obtencin de animales que produzcan protenas y compuestos de inters farmacolgico y a obtener rganos destinados a trasplantes humanos (fundamentalmente a partir de cerdos)

5.4 BIORREMEDIACIN Microorganismos y plantas son utilizados para eliminar contaminantes del medio, fundamentalmente de suelos y agua. Los genes de los organismos que intervienen en estos procesos pueden ser aislados y posteriormente clonados en otros organismos

Podra servir para la eliminacin de vertidos txicos, mareas negras , tratamiento de aguas residuales

6 REPRODUCCIN ASISTIDA La reproduccin asistida tiene como finalidad solucionar problemas de esterilidad Una pareja es estril cuando no consigue tener descendencia despus de doce meses de relaciones sexuales sin usar anticonceptivos Actualmente tambin se utilizan para evitar la aparicin de enfermedades genticas (diagnostico gentico preimplantacional) y obtener bebes sanos cuyas clulas del cordn umbilical sirvan para salvar vidas de familiares enfermos

6.1 INSEMINACIN ARTIFICIAL Consiste en la introduccin mdica del semen, previamente tratado, en el tero de la mujer El protocolo es el siguiente: 1. Control y estimulacin de la ovulacin mediante hormonas. 2. Obtencin y preparacin del semen. 3. Seleccin de espermatozoides. 4. Inseminacin en el momento adecuado del ciclo. 5. Tratamiento hormonal para favorecer el desarrollo del embrin.

Se utiliza fundamentalmente en los siguientes casos: Infertilidad masculina Enfermedades venreas Enfermedades hereditarias Obtencin de hijos sin relaciones sexuales Riesgo de embarazo mltiple derivado de la estimulacin ovrica

6.2 FECUNDACION IN VITRO

Es una tcnica de reproduccin asistida en la que la unin espermatozoide y del vulo se realiza en el laboratorio La FIV es el principal tratamiento para la infertilidad cuando otros mtodos de reproduccin asistida no han tenido xito.

El ovulo fecundado (preembrin) se implanta en la madre

Los pasos son los siguientes 1. Estimulacin ovrica por medio de hormonas
2. Extraccin de vulos y espermatozoides 3. Fecundacin extrauterina 4. Divisiones de los preembriones 5. Implantacin de los preembriones seleccionados

Inconvenientes: Embarazos mltiples

Embarazos ectpicos (embarazo que se desarrolla fuera del tero) Problemas de tipo moral (por la acumulacin de embriones congelados no utilizados) La inyeccin intracitoplasmtica consiste en la inyeccin de un espermatozoide en el interior del vulo

6.3 TRANSFERENCIA DE EMBRIONES DONADOS Se usa cuando los dos miembros de la pareja son estriles. Los preembriones llevan una informacin gentica diferente a la de los padres (preembriones sin utilizar de otras parejas, congelados o no)

7.- CLONACIN Es la obtencin de copias (ADN, clulas u organismos) genticamente iguales. Las primeras clonaciones de organismos se hicieron por fisin de embriones tempranos.
Un embrin, obtenido por procedimientos normales, se divida, y los embriones resultantes eran genticamente idnticos, pero no se saba las caractersticas que iban a tener.

Esto ya se puede saber a partir de la primera clonacin por transferencia de ncleos de clulas de individuos adultos. Los embriones resultantes eran genticamente idnticos al donante del ncleo.

La primera clonacin de mamferos fue realizada por Ian Wilmut en 1996 utilizando tres ovejas, la donadora de la informacin (ncleo) la donadora del ovulo y la madre de alquiler (oveja nodriza). El resultado fue la oveja Dolly

Aplicaciones: 1. Obtencin de animales que contengan y produzcan protenas de inters mdico. 2. Mejora controlada del ganado 3. Recuperacin de especies extintas o en peligro de extincin. Inconvenientes: xito de clonacin muy bajo Individuos clonados con problemas

CLULAS MADRE La clonacin humana con fines reproductivos est prohibida, pero la clonacin teraputica si es legal en muchos pases. Consiste en implantar, en un vulo, material gentico de un individuo, y del embrin obtenido sacar clulas madre embrionarias, que podran dar lugar a los diferentes tejidos, y por lo tanto evitar los problemas de rechazo en los trasplantes. Adems se podran ensayar tratamientos mdicos sobre estas clulas antes de dar los medicamentos al paciente, para conocer la respuesta. Clulas Madre son aquellas que tienen capacidad de multiplicarse y la posibilidad de desarrollarse y diferenciarse dando lugar a clulas especializadas

Tipos: Embrionarias o troncales:

Se obtienen de embriones de menos de 14 das. Pueden generar un organismo completo (totipotentes). Adultas o somticas

Estn en los adultos. Pueden generar clulas especializadas de diferentes tejidos (no son totipotentes)

Hayun unimportante importantedebate debate(poltico, (poltico,tico ticoyycientfico) cientfico) Hay sobreel eluso usode delas lasclulas clulasmadre madre Qu tipo de clula sobre madre es ms conveniente usar (embrionaria o adulta)?
La solucin puede venir de los ltimos avances cientficos. Se ha logrado obtener clulas madre pluripotenciales a partir de clulas adultas (se comportan como clulas madre embrionarias)

En 1979, se definieron como cuatro los principios de la Biotica: autonoma, no maleficencia, beneficencia y justicia Principio de autonoma. Es un principio de respeto a las personas que impone la obligacin de asegurar las condiciones necesarias para que acten de forma autnoma. Principio de beneficencia: Obligacin de actuar en beneficio de otros, promoviendo sus legtimos intereses y suprimiendo perjuicios.

Principio de no maleficencia (Primum non nocere):

Abstenerse intencionadamente de realizar acciones que puedan causar dao o perjudicar a otros. Es un imperativo tico vlido para todos, no slo en el mbito biomdico sino en todos los sectores de la vida humana. Principio de justicia: Tratar a cada uno como corresponda con la finalidad de disminuir las situaciones de desigualdad (biolgica, social, cultural, econmica, etc.)