BIOQUIMICA oxidacin de cidos grasos

Mg. Helda C. Del Castillo C.

 Oxidacin de los cidos grasos. Rol de la carnitina. Etapas de la -oxidacin.. Balance energtico de la oxidacin de los cidos grasos.

Los problemas de la grasa

Son inconvenientes las grasas como reserva energtica?

Los cidos grasos constituyen la reserva secundaria (y principal) de energa. Son molculas mucho mas reducidas y menos hidratadas que los carbohidratos. La oxidacin completa de los cidos grasos de los TG produce unas 9 kcal/g comparadas con las 4 kcal/g para carbohidratos y proteinas.
Reservas de Energa de un hombre tpico de 70 kg:

- 100.000 kcal en triglicridos del tejido adiposo (~11 kg) - 25.000 kcal en protenas movilizables (6-7 kg, msculo) - 1.000 kcal en glucgeno (hgado + msculo) - 40 kcal en glucosa Aproximadamente 11 kg de este hombre seran grasa. Si sta energa tuviera que almacenarse en forma de carbohidratos esto supondra un total de unos 100 kg (25 + 75 de agua hidratacion) y el peso del hombre modelo sera entonces de unos 160 kg.

Valor de supervivencia de los lpidos

Los cidos grasos

Digestin de lipidos

 No se manifiesta digestin en boca o estmago.

-Boca: amilasa salival o ptialina. -Estmago: HCl, enzimas proteolticas (ej.pepsina)

La digestin de lpidos ocurre en Intestino

Enzimas involucradas
ENZIMAS LIPASA
ISOMERASA COLESTEROL ESTERASA FOSFOLIPASA A2

LOCALIZACIN Pncreas
Intestino Pncreas Pncreas
10

Lipasa
Cataliza la hidrlisis de uniones ster en los carbonos primarios (a y a) del glicerol de las grasas neutras (Triacilgliceroles)

H2C HC H2C

O O O

C CO C O

R R R

TAG LIPASA

H2C HC H2C

OH O O

O C C O R O

+
R

HO

1,2-DAG

AG

LIPASA

H2C HC H2C

OH O OH

O C R O

+
2-MAG

HO

AG
11

Isomerasa
Para la hidrlisis de 2-MAG es necesaria la presencia de esta enzima que traslada el grupo acilo de la posicin 2 ( b) a la posicin 1( a). Luego la hidrlisis del monoacilglicerol (MAG) se completa por accin de la Lipasa.

H2C HC H2C

OH O O OH C R

2-MAG ISOMERASA O H2C HC H2C O OH OH C R

1-MAG
12

Colesterol esterasa
Cataliza la hidrlisis de steres de colesterol con cidos grasos.

O R C O

COLESTEROLASA

OH
ESTER DE COLESTEROL COLESTEROL

O R C OH
AG

13

Fosfolipasa A2
Cataliza la hidrlisis del enlace ster que une el cido graso al hidroxilo del carbono 2 del glicerol en los Glicerofosfolpidos. Se forma un cido graso y lisofosfolpido

R2

O O H2C O C R1 FOSFOLIPASA H2C O A2 C O CH O HO CH H2C O P O X H2C O O

O C R1 + O P O X O

R2

O C OH

14

Papel de la bilis en la digestin de lpidos

CIDOS BILIARES: el ms abundante es el cido clico, en
menor proporcin se encuentra el cido quenodesoxiclico. Son excretados en la bilis conjugados con glicina o taurina. Ej.: cido glicoclico -cido tauroclico

cido glicoclico

cido tauroclico
15

Funcin de los cidos biliares

Aumentan la funcin de la Lipasa pancretica. Reducen la Tensin Superficial y con ello favorecen la formacin de una emulsin de las grasas. Contribuyen a dispersar los lpidos en pequeas partculas y por lo tanto hay mas superficie expuesta a la accin de la lipasa. Favorece la absorcin de Vitaminas Liposolubles. Accin Colertica: estimulan la produccin de bilis.

16

Digestin de lipidos

17

Digestin intestinal de lpidos

Los AG son oxidados o reesterificados como reserva.

Vesicula biliar

Sales biliares emulsionan las grasas de la dieta formando micelas Lipasas intestinales degradan TG

Los AG ingresan a la clula La lipoproteinlipasa del capilar hidroliza los TG a AG y glicerol Los `QM son conducidos por sistema linftico a la sangre y tejidos Los `TG son incorporados con el colesterol y apolipoprotenas a QM

Los AG son captados por la mucosa intestinal y resintetiizafdos a TG

Para que los tejidos perifricos puedan acceder a la energa almacenada en los lpidos del tejido adiposo, estos lpidos deben movilizarse. Este proceso se realiza en tres etapas

1.

Los triacilglicridos se degradan a cidos grasos y glicerol, que se liberan desde el tejido adiposo y se transportan a los tejidos que requieren energa.

En estos tejidos, los cidos grasos deben activarse y transportarse al interior de la mitocondria para su degradacin

En su degradacin oxidativa , los cidos grasos se descomponen de manera secuencial en acetil-CoA, que posteriormente se procesa en el ciclo del cido ctrico.

1.-Hidrlisis de los triacilglicridos

Las LIPASAS hidrolizan los triacilglicridos en un proceso denominado lipolisis.

La lipasa del tejido adiposo es activada en presencia de las hormonas: adrenalina, noradrenalina, glucagn y hormona adrenocorticotrpica, que se unen a receptores especficos de la membrana plasmtica (receptores 7TM), que a su vez activan a adenilato ciclasa. El aumento en los niveles de AMP cclico a su vez, activa a la proteinquinasa A, que a su vez activa a las lipasas por fosforilacin. Insulina por otro lado inhibe el proceso de lipolisis.

Del proceso de lipolisis se obtienen:

Los cidos grasos liberados, no son solubles en el plasma sanguneo. Es necesaria la intervencin de albmina presente en el suero, que se une a los cidos grasos y acta como portador. De esta manera los cidos grasos libres pasan a la sangre y pueden ser accesibles a otros tejidos.
Glicerol,que es captado por el hgado, siendo fosforilado y oxidado a dihidroxiacetonafosfato e isomerizado a gliceraldehido3-fosfato, intermediario tanto de las vias glucoltica como gluconeognica. Glicerol y este tipo de intermediarios son fcilmente interconvertibles en el hgado dependiendo de las necesidades del organismo.

2. Activacin y transporte de los cidos grasos a la mitocondria

Activacin de los cidos grasos

Los cidos grasos son activados en el citosol mediante su conversin a tiosteres de coenzima A catalizada por acil-CoA sintetasa,en una reaccin que consume ATP. Esta enzima se encuentra en la membrana externa mitocondrial Esta activacin tiene lugar en dos etapas:

1.El cido graso reacciona con ATP para formar un aciladenilato,. Esta molcula permanece fuertemente unida al enzima. 2.El grupo sulfhidrilo del CoA ataca entonces al aciladenilato para formar acil-CoA y AMP.

ACTIVACION DE LOS ACIDOS GRASOS

Paso 1: O RCO - + A T P

O RC- AM P + PPi acil adenilato intermediario O RC- SCo A + A MP acil-CoA

Paso 2: O RC- AM P + Co A - S H

acil-CoA O sintetasa - + + RCO A TP Co A - S H

O RC- SCo A + A MP + PPi

Transporte de los cidos grasos a la mitocondria

Una vez activado el cido graso debe ser transportado al interior de la mitocondria para ser oxidado: Los cidos grasos de cadena corta (12C o menos) son transportados directamente a la matriz mitocondrial, Los cidos grasos de cadena larga (ms de 14C) necesitan un mecanismo de transporte especial para pasar a travs de la membrana interna mitocondrial: conjugacin a carnitina

(3-hidroxi-4-trimetilaminobutirato )

El transporte mediante carnitina consiste en:

1.El grupo acilo se transfiere desde el tomo de azufre del CoA al grupo hidroxilo de la carnitina para formar acilcarnitina, en una reaccin catalizada por carnitina aciltransferasa I (carnitina palmitil transferasa I), enzima unida a la membrana externa mitocondrial. 2.Acilcarnitina acta entonces como una lanzadera a travs de la membrana interna mitocondrial, por accin de una translocasa. 3.Una vez en el lado de la matriz mitocondrial el grupo acilo es transferido de nuevo a una molcula de CoA en una reaccin catalizada por la carnitina aciltransferasa II (carnitina palmitil transferasa II), inversa a la que tiene lugar en el lado citoslico. 4.Translocasa devuelve de nuevo la carnitina a la cara citoslica intercambindose por otra acilcarnitina que entra.

Varias enfermedades se deben a deficiencias en este sistema de transporte

Deficiencia en carnitina: ligeros calambres musculares hasta debilidad severa o incluso muerte. Deficiencia en carnitina aciltransferasa: sntomas de debilidad muscular durante el ejercicio prolongado, (el msculo depende de los cidos grasos como fuente de energa a largo plazo). En estos pacientes los cidos grasos de cadena corta y media (C8-C10) , que para entrar en la mitocondria no necesitan carnitina, se oxidan con normalidad.

3. Degradacin oxidativa de los cidos grasos (-oxidacin)

Localizacin:Mitocondrial Tejidos: Todos los que tengan mitocondrias. Excepto el Cerebro Comprende la oxidacin del carbono del cido graso.

-Oxidacin de cidos Grasos; etapas

Una vez en la matriz mitocondrial, las molculas de acil-CoA son degradadas mediante una secuencia repetitiva de cuatro reacciones : 1.Oxidacin por FAD. 2.Hidratacin 3.Oxidacin por NAD+ 4.Tiolisis por CoA Como resultado de estas reacciones, la cadena del cido graso se recorta en dos carbonos y se genera FADH2, NADH y Acetil-CoA. Esta serie de reacciones se conoce como -oxidacin (hlice de Ly nnen) porque la oxidacin tiene lugar en el carbono .

AcilCoADeshidrogenasa

4 tipos dependiendo de la longitud del cido graso: VLCAD; LCAD; MCAD SCAD

Los electrones liberados por oxidacin de los cidos grasos entran en la cadena de transporte electrnico va CoQ

Enzima Trifuncional (MTP)

Enoil-CoAHidratasa

3-L-hidroxiacil-CoADeshidrogenasa

Enzima Trifuncio nal (MTP)

Tiolasa

Enzima Trifuncional (MTP)

ENZIMAS DE LA beta-OXIDACIN
Una vez dentro de la matriz mitocondrial, todos los AcilCoA, se oxidan en posicin a travs de la accin de cuatro enzimas, especficas para cada
longitud de cadena, : 1. las Acil de diferente longitud de cadena

CoA deshidrogenasas

VLCAD , (very long chain dehidrogenase) dehidrogenasa de cadena muy larga(>24 C), LCAD (long chain dehidrogenase) dehidrogenasa de cadena larga (de 13 a 24 ), MCAD (medium chain dehidrogenase) dehidrogenasa de cadena media (de 6 a 12C) SCAD (short,chain dehidrogenase) dehidrogenasa de cadena corta (de 3-6 C) ), unidas todas ellas al complejo II de cadena respiratoria mitocondrial, el electro transfer flavoprotena, cuyo cofactor es el Flavinadenin dinucletido (FAD);

2. la segunda reaccin la cataliza la Enoil CoA hidratasa,

comn para todas las longitudes de cadena;

3. la tercera reaccin la catalizan las 3OH acil deshidrogenasas, especficas para cada longitud de cadena
(VLCHAD, LCHAD, MCHAD,SCHAD), unidas al complejo I de cadena respiratoria mitocondrial, cuyo cofactor es el Nicotinamida adenin dinucletido (NAD) y por ltimo 4. la

-ceto acilCoA tiolasa.

Estas tres ltimas, se encuentran unidas formando la llamada Enzima trifuncional (MTP) compuesta por 4 subunidades alfa (actividades LCHAD+Enoil hidratasa) y 4 subunidades beta con actividad -ceto tiolasa.

Hlice de Lynnen.

Rendimiento de la -oxidacin de cidos grasos.

N de vueltas N de molculas de acetil CoA producidas N/2 Molculas reducidas por vuelta Rendimiento del Ciclo de Krebs Rendimiento de la fosforilacin oxidativa 1NADH2 rinde 3 ATP y 1 FADH2 rinde 2 ATP

cido graso de N carbonos

(N/2)- 1)

1 NADH2 y 1 FADH2/vuelta TOTAL (N/2)-1) NADH2 (N/2)-1) FADH2

Cada acetil CoA rinde 3NADH2 1 FADH2 y 1 GTP

cido caproico(6 C, igual que la glucosa) TOTAL

2 NADH2 2 FADH2

9 NADH2 33 ATP 3 FADH2 10 ATP 3 GTP(ATP)

3ATP

menos 1 ATP gastados para entrar=

45 ATP

Rendimiento energtico de la -oxidacin

La hlice de Lynen cuando slo quedan cuatro tomos de carbono, da la ltima vuelta, puesto que se producen 2 Acetil-Co A. Por tanto, un cido graso sufrir tantas vueltas como la mitad menos uno del nmero de tomos de carbono tenga. Por ejemplo: el cido palmitico tiene 16 tomos de carbono, por lo tanto dar 7 vueltas :

[(16/2)-1] = 8 1 = 7 vueltas producir 8 acetil-Co A + 7 NADH + 7 H+ + 7 FADH2

En el caso del acido miristico (14 carbonos)

Primero debe activarse a miristil CoA. Eso requiere de 1 molecula de ATP, pero como esta es hidrolizada a AMP + 2 (P), energeticamente se considera que se necesitan 2 ATP. Luego entra en la beta oxidacion: 1ra vuelta: Produce un acil CoA de 12 carbonos y un acetil CoA + NADH.H+ + FADH2 2da. Vuelta: Produce un acil CoA de 10 carbonos y un acetil CoA + NAD H.H+ + FADH2 3ra vuelta Produce un acil CoA de 8 carbonos y un acetil CoA + NAD H.H+ + FADH2

 4ta vuelta Produce un acil CoA de 6 carbonos y un acetil CoA + NAD H.H+ + FADH2 5ta vuelta Produce un acil CoA de 4 carbonos y un acetil CoA + NAD H.H+ + FADH2 6ta vuelta Produce un acil CoA de 2 carbonos y un acetil CoA + NAD H.H+ + FADH2 Pero el acil CoA de 2 carbonos es un Acetil CoA, asi que no hacen falta mas vueltas!

Que tenemos al final? 7 acetil CoA Y 6 NADH.H+ y 6 FADH2

1) multiplicamos el numero de NADH.H y de FADH2 por el numero de ATP que cada uno rinde. Siguiendo nuestra convencion de que cada NADH.H+ rinde 3 ATP en la cadena respiratoria y cada FADH2 rinde 2 ATP, entonces tenemos: 6 x 3 =18 ATP 6 x 2 =12 ATP

30 ATP

2) Pero tambien se produjeron 7 acetil CoA que cuando sean oxidadas hasta CO2 y agua tambien produciran ATP. Se sabe que en el Ciclo de Krebs: cada acetil CoA genera 12 ATP, entonces : 7 x 12 ATP/acetil CoA = 84 ATP 3) se suman entonces : 30 + 84 = 114 4) PERO RECUERDA QUE SE GASTARON 2 ATP EN LA ACTIVACION INICIAL! * por lo tanto deben restarse :

114 2 = 112

 Ese es el rendimiento energetico de la Betaoxidacion del acido miristico (14 Carbonos) NOTA *Si bien slo se utilza 1 ATP, la hidrlisis que produce pirofosfato y AMP, y luego el pirofosfato se hidroliza a 2Pi, se contabilizan como dos enlaces de alta energa. (2ATP)

NOTA
Cada vuelta de la beta oxidacin produce : 17 ATP. El No de vueltas es (N/2)_ 1 Un acetil CoA rinde 12 ATP Se debe descontar 2 ATP por la activacin.

 si la pregunta fuera: Cuantos ATP se obtienen en la oxidacion total (hasta CO2 y agua) de un acido graso de 14 carbonos? La respuesta sera entonces: De la beta oxidacion 28 ATP Del Ciclo de Krebs 7 acetil CoA x 12 ATP/acetil CoA = 84 ATP Total: 112 ATP

 Para calcular la oxidacion de cualquier acido graso, se utilizan estos sencillos calculos:
Numero de carbonos del acido graso/2 = # de acetil CoA Numero de vueltas de beta-oxidacion= Numero de acetil CoA -1 Asumiendo que cada NADH produce 3 ATP y cada FADH2 2 ATP: # de vueltas x 5 ATP/vuelta Resta 2 ATP que se usaron en la activacion. Si se trata de calcular el balance de la oxidacion total, multiplica el # de moleculas de acetil CoA por 12 (ya que cada Acetil CoA oxidado en el ciclo de Krebs rinde 12 ATP, asumiendo un rendimiento de 3 ATP por NADH y 2 ATP por FADH2)

Ejemplo: Acido graso de 12 carbonos:

# acetil CoA: 12/2 = 6 acetil CoA # vueltas en Beta-oxidacion: 6-1 =5 vueltas # ATP en Beta-oxidacion: 5 x 5 = 25 ATP -2 ATP usado en la activacion del acido graso Total de ATP de la Beta oxidacion de un acido graso de 12 carbonos: 23 ATP Total de la oxidacion hasta CO2 y agua de un acido graso de 12 carbonos: 23 ATP + (6 acetil CoA x 12 ATP/Acetil CoA) = 95 ATP

Formacin de Cuerpos Cetnicos (Cetognesis)

Despus de la degradacin de los ac. Grasos, el AcetilCoA es oxidado en el Ciclo de Krebs. Para esto es necesaria la presencia de oxalacetato (1er intermediario del ciclo de Krebs). Si la cantidad de este es insuficiente, las unidades de acetil-CoA son utilizadas mediante una va alternativa en la que se producen Cuerpos Cetnicos Estos compuestos se forman principalmente en el hgado, a partir de acetil-CoA mediante una serie de etapas.
55

CETOGENESIS
Ocurre en HGADO

1. El 1er paso es la inversa de la ltima etapa de la boxidacin. 2. El acetoacetatil-CoA se condensa con otro acetilCoA para dar HMG-CoA. 3. El HMG-CoA se rompe formando acetoacetato y Ac-CoA. 4. El Acetoacetato puede originar los otros cuerpos cetnicos.
56

Utilizacin de los cuerpos cetnicos

El Hgado es el principal productor ya que posee todas las enzimas necesarias. Es incapaz de usarlos como combustible. Los rganos que los usan son: cerebro, msculo esqueltico, corazn y otros. Solo se usan como fuente de energa en situaciones metablicas especiales. Ej: Diabetes, ayuno prolongado. El aumento de estos provoca Acidosis Metablica.

57

Formacin y exportacin de cuerpos cetnicos (hgado)

Gotas de lpidos

Hepatocito

Los cuerpos cetnicos se forman y exportan desde el Hgado.

Acetoacetato y b hidroxibutirato exportados como energa para: corazn, msculo, rin y cerebro.

En condiciones energticamente desfavorables, el oxalacetato se deriva hacia la Gluconeognesis, para liberar glucosa a la sangre. El ciclo de Krebs trabaja muy lentamente en el Hgado.

Glucosa exportada como combustible para cerebro y otros tejidos.

58

Bibliografa
Berg,Tymoczko and Stryer. Biochemistry.7 ed. WH. Freeman, 2011.Cap22. Voet and Voet. Biochemistry. 4 ed. Wiley, 2011. Cap 25. Baynes and Dominiczak. Bioqumica Mdica. 3 ed. Elsevier, 2011. Cap 15. Devlin. Textbook of Biochemistry with Clinical correlations. 7 ed. Wiley, 2010. Cap 17