Universidade Federal de Pelotas Centro de Biotecnologia Graduao em Biotecnologia

SOLUES TAMPO
Aula prtica Tcnicas Instrumentais 2011/1

Solues Tampo
Solues tampo, soluo tamponada ou simplesmente tampo, so solues que atenuam a variao dos valores de pH (cido ou bsico), mantendo-o aproximadamente constante, mesmo com adio de pequenas quantidades de cidos ou bases.

Solues Tampo
So geralmente formadas por um cido fraco e um sal formado pela reao desse cido com uma base forte, ou, ento, por uma base fraca e um sal formado pela reao dessa base com um cido forte. Elas so preparadas dissolvendo-se os solutos em gua.
Exemplos: cido actico-acetato (tampo acetato), cido carbnico-bicarbonato (tampo bicarbonato), fosfato bicido-fosfato monocido (tampo fosfato)

Solues Tampo
Todo o sistema ou processo que dependa do pH, est associado a um TAMPO. Ex.: sistemas biolgicos sangue, sistemas enzimticos; reaes qumicas reaes de precipitao, reaes eletrdicas; biotecnologia lavagem de clulas, quebrar o DNA, eletroforese.

Solues Tampo

O tamponamento resulta do EQUILBRIO das duas reaes reversveis que ocorrem numa soluo aquosa de um doador e um receptor de prtons, ambos em concentraes prximas da igualdade.

Solues Tampo
Tampo biolgico plasma sanguneo cido fraco: cido carbnico H2CO3 Sal : bicarbonato HCO3 Excesso de H: desloca o equilbrio para a esquerda H2CO3 = H + HCO3 Excesso de OH: desloca o equilbrio para a direita OH + H2CO3 = H2O + HCO3

Solues Tampo
sistemas de tamponamento dependem de: Ka (constante de dissociao): tendncia caracterstica de cada cido para perder o seu prton em soluo aquosa; [ ] de cido e base; pH

Solues Tampo
A Equao de Henderson-Hasselbalch utilizada para calcular o pH de uma soluo tampo, a partir do pKa (a constante de dissociao do cido) e de concentraes do equlibro cido-base, do cido ou base conjugada. pH = pKa + log [receptor de prtons] [doador de prtons]

Solues Tampo
Quando a [doador de prtons] = [receptor de prtons] = poder tamponante mximo da soluo tampo onde ocorrem as menores variaes de pH pela adio de H ou OH, e o pH = pKa pH = pKa + log 1,0 = pKa + 0 = pKa

Solues Tampo
Soluo tampo preparo:
Material e equipamentos

PESAGEM
balana Papel de pesagem; Esptulas;

Solues Tampo
MISTURA
Proveta; Bquer; Agitador magntico e bailarina; gua destilada; pHmetro; Frasco

DICAS
1. Adicionar o slido pesado ao frasco contendo 80% do lquido, medido em proveta; 2. Ligar o agitador magntico depois de colocar o bquer contendo a soluo e a bailarina; 3. Verificar o volume em proveta ou balo volumtrico, e completar at 90% do volume; 4. Medir o pH devolver a soluo para o bquer;

Solues Tampo
Soluo tampo PBS 10X
NaCl KCl Na2HPO4 KH PO gua qsp
2 4

80g 2g 14,4g 2,4g 1000ml

Bibliografia
Lehninger, A. L. et al, PRINCPIOS DE BIOQUMICA, Sarvier Editora de Livros Mdicos LTDA, 1995, So Paulo. Barker, Kathy, NA BANCADA: MANUAL DE INICIAO CIENTFICA EM LABORATRIOS DE PESQUISAS BIOMDICAS, Artmed, 2002, Porto Alegre.