Universidad de Valparaso Facultad de Medicina Carrera de Tecnologa Mdica Asignatura de Biotecnologa

TECNOLOGIAS DE CULTIVOS CELULARES EN EL AMBITO DEL TRASPLANTE DE TEJIDOS

Integrantes : -Jeanette Herrera Cadenas. Evelyn Yez Muoz Docentes: Profesor: Francisco Aguilera Profesora: Pamela Fandez

Objetivos
Objetivos generales Definir la aplicacin de los cultivos celulares en ingeniera de tejidos, enfocados en la generacin de piel. Objetivos especficos Describir los factores que influyen en la realizacin de un cultivo celular. Dar a conocer una aplicacin clnica de los cultivos celulares (Ingeniera Tisular). Explicar algunos procedimientos para la produccin de piel. Presentar la generacin de piel en nuestro pas, a travs del proyecto SII y cules son sus aplicaciones (en quemados, escaras y lceras crnicas)

Introduccin
Las lesiones cutneas son un grave problema de salud pblica. Para dar respuesta existe una disciplina denominada, Ingeniera Tisular. Su herramienta fundamental, los cultivos celulares.

Cultivos celulares

Cultivo celular
Definicin: Un conjunto de tcnicas que permiten el
mantenimiento de las clulas 'in vitro', manteniendo al mximo sus propiedades fisiolgicas, bioqumicas y genticas.


Establecimiento de un cultivo celular

Sustrato.

Condiciones fsico-qumicas y fisiolgicas del medio

Naturaleza y composicin de la fase gaseosa

Condiciones de incubacin.

Ingeniera Tisular

Cartlago

Hgado

Tejido nervioso

Ingeniera Tisular

Pncreas

Piel

Intestino

Histologa y lesiones de la piel.

La Piel
Es el rgano mas grande del cuerpo humano.

Sus funciones son:

Proteccin contra lesiones, invasin bacteriana y desecacin Regulacin de la temperatura corporal Recepcin sensorial. Absorcin de la radiacin ultravioleta del sol para la sntesis de vitamina D

Histologa de la piel

La piel esta formada por dos capas: La epidermis y la dermis

Clula principal de la epidermis, son los Queratinocitos La epidermis esta formada por cuatro estratos

Histologa de la piel
La dermis Esta dividida en dos capas: La capa papilar La capa reticular La clula principal de la dermis, es el fibroblasto.

Fibroblastos

Lesiones de la Piel
Quemaduras

Son lesiones producidas en los tejidos vivos, debido a la accin de diversos agentes. Agentes fsicos Agentes qumicos Agentes biolgicos

Lesiones de la Piel
Escaras Las escaras, son un tipo de lesin causadas por un trastorno de irrigacin sangunea y nutricin celular como resultado de presin sobre prominencias seas o cartilaginosas.

Segn profundad y tejidos comprometidos se clasifican desde estadio I, hasta estadio IV.

Procedimientos para la generacin de piel

Generacin de anlogos epidrmicos

[Rheinwald y Green et al 1975]

Cultivos de mltiples capas de queratinocitos, que posteriormente podan ser utilizados a nivel clnico sembrndolos sobre las lesiones de los pacientes.

Generacin de anlogos drmicos

[Burke y Yanas et al 1980]

INTEGRA Membrana bilaminar conformada por: Una lmina externa de silicona Una lmina inferior (colgeno y glicosaminoglicanos)

Generacin de anlogos dermo- epidrmicos

Utilizacin de una matriz de condroitn-6-sulfato y colgeno como soporte para el cultivo de queratinocitos
[Boyce y Hansbrough et al 1988].

Cultivos de queratinocitos y fibroblastos autlogos en una matriz de colgeno.(Colombia 1990)

Generacin de anlogos dermo- epidrmicos

Queratinocitos y fibroblastos se cultivan y se colocan en una estructura tridimensional basada en plasma sanguneo coagulado. (Espaa 2006)

Inicio del tratamiento 27 de septiembre.

Trmino del tratamiento 15 de noviembre

Cultivos de piel realizados en Chile

Proyecto SII
El proyecto (SII) o Sistema de Implante Integrado, comenz a desarrollarse en el 2003 por universidades de la quinta regin. La tcnica consiste, que a travs de un soporte polimrico se integra en su matriz queratinocitos y fibroblastos autlogos embebidos en un gel de fibrina. No se conoce el procedimiento de generacin de piel en especifico, ya que el proyecto an no esta patentado. La tcnica la dividimos en 3 etapas: 1.- Generacin de queratinocitos y fibroblastos. 2.- Propiedades del Polmero 3.- Integracin del polmero con clulas de la piel y el cogulo de fibrina.

1.- Generacin de queratinocitos y fibroblastos.

biopsia de piel

Se lava 3 veces con buffer fosfato

Se procede a una digestin enzimtica

Epidermis

Dermis

1.- Generacin de queratinocitos y fibroblastos.

Epidermis

Dermis

Se realiza una segunda digestin enzimtica

Tripsina

Colagenasa

Queratinocitos

Fibroblastos

Se lavan con el medio de cultivo DMEM

1.- Generacin de queratinocitos y fibroblastos.

Queratinocitos

Cultivo

Fibroblastos

Medio definido para queratinocitos

DMEM/F12

2.- Propiedades del Polmero

En el proyecto SII, se utiliza como base o matriz un polmero. Y el polmero usado est constituidos por 3 componentes: El quitosan cido Hialurnico Gelatina

3.- Mezcla del polmero, clulas de la piel y fibrina

Se fabrica la matriz polimrica en la Universidad Federico Santa Mara

Es trasladad a la Universidad de Valparaso

Donde se incorporan los queratinocitos y fibroblastos, junto con un coagulo de fibrina en la matriz

Como resultado, obtenemos el Sistema de Implante Integrado y es posible implantarlo a los 10 das del procedimiento

Discusin
Desafos: 1.- Generar piel artificial con anexos y todos sus componentes celulares. 2.- En Espaa, el cultivo de piel se esta aplicando en otras patologas dermatolgicas como la epidermlisis bullosa. 3.- Mejorar las tcnicas de Ingeniera Tisular, para generar piel en mayor volumen y calidad y as brindar una mejor calidad de vida a quienes padecen lesiones o enfermedades cutneas.

Conclusin
En nuestro trabajo de investigacin cumplimos con todos los objetivos planteados. Aprendimos en que consisten los cultivos celulares y la gran gama de factores que influyen en su realizacin Conocimos la Ingeniera Tisular, la cual manipula las clulas vivas para la generacin de sustitutos biolgicos. Tambin se aprendi sobre de la Ingeniera Tisular en la generacin de piel artificial, que ofrece una nueva y moderna alternativa para aquellas personas que sufren de lesiones en la piel, como quemaduras, lceras crnicas, pie diabtico y escaras. Y se conoci la generacin de piel hecho en Chile, gracias al proyecto SII

Gracias