BIOLOGIA CELULAR

BIOLOGIA CELULAR
3.1 Estructura y funcin del ncleo celular El ncleo de las clulas fue descubierto por Robert Brown en 1835. Desde ese entonces ha sido motivo de mltiples estudios, principalmente des de el punto de vista morfolgico y mas recientemente en el aspecto bioqumico y fisiolgico.

BIOLOGIA CELULAR
El ncleo es una estructura que contiene el material qumico fundamental (ADN) que lleva la informacin gentica. Actualmente ocupa el lugar mas importante en el estudio de la bioqumica y biologa molecular. Precisamente es en los cromosomas donde residen las unidades genticas.

BIOLOGIA CELULAR UNIDAD III

Con el fin de estudiar las funciones del ncleo se har necesario analizarlo mediante un criterio: 1.-Morfolgico 2.-Fisiolgico

BIOLOGIA CELULAR UNIDAD III

Al observar el ncleo celular en la interfase es cuando se pueden apreciar los siguientes elementos: 1.- Membrana nuclear. 2.-Nucleoplasma 3.-Nucleolo 4.-Cromosomas (formado por estructuras nucleoproteicas)

ESTRUCTURA DEL NCLEO

El ncleo est rodeado por la envoltura nuclear, una doble membrana interrumpida por numerosos poros nucleares. La envoltura nuclear es sostenida desde el exterior por una red de filamentos intermedios dependientes del citoesqueleto, mientras que la lmina nuclear, la cual se localiza adyacente a la superficie interna de la envoltura nuclear, provee soporte interno. El ncleo tambin tiene un nucleoplasma, en el cual estn disueltos sus solutos y un esqueleto filamentoso, la matriz nuclear la cual provee soporte a los cromosomas y a los grandes complejos proteicos que intervienen en la replicacin y transcripcin del ADN.

FUNCIONES DEL NUCLEO

1.-Almacenar la informacin gentica en el ADN. 2.-Expresin de la informacin gentica. Trascripcin del DNA, maduracin del hnRNA, procesamiento de tRNA, rRNA. 3.-Ensamblaje de ribosomas

4.- Replicacin del cromosoma celular.

a) a nivel de DNA fase S del ciclo

b) a nivel de protenas (sntesis citoplasmtica, ensamblaje nuclear) c) a nivel de patrn de expresin.

LA MEMBRANA NUCLEAR Y SU DINAMICA

Puede observarse al microscopio electrnico una membrana de estructura doble, separada de si misma por un espacio de 30 nm que se interrumpe en ciertos puntos conocidos como poros.

 En algunas ocasiones se ha llegado a observar otra membrana fina que cubriendo los poros permite la separacin del contenido nuclear del resto de la clula. Parece que hay una relacin entre la membrana nuclear y ciertos elementos del retculo endoplasmatico.

EL PORO NUCLEAR Y SUS MECANISMOS DE TRANSPORTE

Los poros nucleares tienen un dimetro cercano a los 100 nm se observan de 3000 a 4000 de ellos en el ncleo de la clula. No son simples orificios que perforan la cubierta, si no complejas cadenas formadas por 150 a 200 polipptidos los cuales constituyen una estructura muy elaborada con forma de rueda de carreta, por lo tanto se habla de complejos de poro.

 Los complejos de poro estn formados por cerca de 100 polipetidos llamados nucleoporinas. Los CPN presentan uno o varios canales acuosos a travs de los cuales las pequeas molculas solubles en agua se difunden (transporte no regulado). Las molculas de mayor peso molecular son transportadas en forma activa, por lo que requieren energa y molculas transportadoras.

Los mecanismos implicados en el transporte a travs del poro son diferentes al transporte de protenas en las membranas de otros organelos . Por ejemplo, las protenas nucleares son transportadas a travs del poro manteniendo su conformacin plegada, por el contrario las protenas que no se localizarn en el ncleo se despliegan durante el transporte.

Los complejos de poro nuclear hacen de la envoltura nuclear una barrera selectiva entre el ncleo y el citoplasma. Estos complejos constituyen la principal va de comunicacin entre el compartimiento nuclear y citoplasmtico de la clula ante el pesado trfico molecular. Aun cuando las protenas pequeas y otras molculas viajan a travs de los canales perifricos, las protenas de gran tamao deben poseer una etiqueta para ingresar por el canal central. Estas protenas sintetizadas en el citoplasma contienen la seal de localizacin nuclear (nuclear signal localization, NSL).

La entrada y salida de grandes molculas del ncleo est estrictamente controlada por los complejos de poro nucleares. Aunque las pequeas molculas pueden entrar en el ncleo sin regulacin, las macromolculas como el ARN y las protenas requieren asociarse a carioferinas llamadas importinas para entrar en el ncleo, y exportinas para salir. Las protenas cargadas que deben ser translocadas desde el citoplasma al ncleo contienen cortas secuencias de aminocidos conocidas como seales de localizacin nuclear que estn unidas a las importinas, mientras que las transportadas desde el ncleo al citoplasma poseen seales de exportacin nuclear unidas a las exportinas De hecho se ha demostrado que se produce un transporte activo que da lugar a la deformacin de las partculas o de la estructura de los poros.

MATRIZ NUCLEAR
Es una red fibrilar que se extiende por todo el ncleo desde la lmina nuclear hasta contactar con los cromosomas. Contribuye a mantener y dar forma al ncleo.

FUNCIONES DE LA MATRIZ NUCLEAR

A) Estructural: organizacin de la cromatina y de los otros elementos estructurales por ejemplo el nucleolo y la unin de los filamentos intermedios citosolicos. B) Funcional: lugar de anclaje de los complejos de replicacin, trascripcin y de replicacin viral.

ESTRUCTURA Y COMPOSICION DE LA MATRIZ NUCLEAR

Depende de RNAsa Por microscopia electrnica se han descubierto tres componentes: 1.-Lamina nuclear 2.-Complejos de poro 3.-Red entera de fibras y residuos del nucleolo.

LA CROMATINA
Es una masa densa de material fibroso que se acumula cerca de la superficie interna de la envoltura nuclear Esta formada por ARN, ADN y protenas bsicas llamadas histonas

COMPONENTES QUIMICOS DE LA CROMATINA Y TIPOS DE DNA SEGN SU GRADO DE REPETICION

La cromatina esta compuesta por: a) DNA en un 35% y puede ser de: 1) una hebra/ cromosoma (G0-G1) 2) dos hebras/cromosoma (G2-M) b) Protenas en un 60% 1) Histonas: *Nucleosomales(H2A,H2B,H3,H4) *No nucleosomales (H1) 2) No histonicas (HMG) c) RNA: transcrito, RNA estructural

COMPACTACION DE LA CROMATINA EUCROMATINA Y HETEROCROMATINA

La cromatina se pueden encontrar de dos formas: 1.-heterocromatina, es una forma inactiva condensada localizada sobre todo en la periferia del ncleo, que se tie fuertemente con las coloraciones. La heterocromatina puede ser de dos tipos diferentes: a) la constitutiva, idntica para todas las clulas del organismo y que carece de informacin gentica,.

 b) y la facultativa, diferente en los distintos tipos celulares y que contiene informacin sobre todos aquellos genes que no se expresan 2.-Eucromatina, diseminada por el resto del ncleo y no visible con el microscopio de luz. Representa la forma activa de la cromatina en la que se est transcribiendo el material gentico de las molculas de DNA a molculas de RNAm.

FUNCIONES DE LA CROMATINA
Las funciones de la cromatina dependen de del grado de empaquetamiento y son: a) proporcionar informacin gentica necesaria para la sntesis de RNA mediante la trascripcin b) conservar y transmitir la informacin gentica contenida en el ADN y para ello se produce las duplicacin del mismo, cuyas hebras quedaran unidas en un punto y formaran las dos cromatidas de un cromosoma

CONCEPTO MORFOLOGIA Y CLASIFICACION DE LOS CROMOSOMAS

Nombre que recibe una diminuta estructura formada por cidos nucleicos y protenas presente en todas las clulas vegetales y animales y para fines didcticos se la da una forma de X

 El tamao de los cromosomas es variable segn el tipo de clula y del momento funcional de la clula, no obstante oscila entre 0.2 micras a 50 micras de longitud por 0.2 a 2 micras de dimetro y en la especie humana entre 4 y 6 micras

CLASIFICACION DE LOS CROMOSOMAS DE ACUERDO A LA POSICION DEL CENTROMERO

Los cromosomas son organelos constantes en numero, forma y caractersticas, pero los cromosomas de una clula pueden ser diferentes unos de otros. Estas diferencias estn sobretodo en la posicin del centrmero que es variable lo que permite clasificar a los cromosomas en:

a) metacntricos b) submetacentricos c) acrocentricos d) telocentricos

Metacntricos: El centrmero est ubicado ms o menos en el centro, es decir los brazos p y q son aproximadamente de la misma longitud. Submetacntricos: El centrmero se encuentra desplazado claramente del centro. (Los brazos difieren en longitud). Acrocntricos: El centrmero est ubicado cerca a un extremo. (Un brazo considerablemente grande comparado con el otro) Telocntricos: Con el centrmero en un extremo, este cromosoma solo tiene el brazo largo

ESTRUCTURA Y ELEMENTOS FUNCIONALES DE LOS CROMOSOMAS

En cada cromosoma podemos observar: a)CROMATIDA: en la metafase cada cromosoma esta formado por dos componentes simtricos cada uno de los cuales contiene una molcula de ADN.

b) CENTROMERO: es la regin del cromosoma donde convergen las fibras del huso mittico, se encuentra en una parte ms delgada del cromosoma la constriccin primaria.

 c)TELOMERO: al extremo de cada brazo del cromosoma se le denomina telomero. El AND de los telomeros no se transcribe y en cada proceso de divisin se acorta o reduce. Cuando los telomeros desaparecen el cromosoma sigue acortndose y la clula pierde informacin gentica til y degeneran. Se cree que su funcin es evitar que se "peguen" o fusionen con otros fragmentos. Zona que no posee informacin gentica.

EL ORGANIZADOR NUCLEOLAR
En algunos cromosomas se encuentra la regin del, organizador nucleolar (NOR), en ella se sitan los genes que se transcriben como ARNr, con lo que se promueve la formacin del nucleolo y de los ribosomas. Esta zona no se espiraliza tanto y por eso se ve mas clara.

El satlite (SAT).-es el segmento del cromosoma entre el organizador nucleolar y el telomero correspondiente. Solo poseen satlite aquellos cromosomas que tienen NOR.

ULTRA ESTRUCTURA DEL CINETOCORO

El cinetocoro es una estructura compleja que en general aparece como placa trilaminar estrechamente unida con el centromero de cada cromatida. Los dos cinetocoros de un cromosoma metafasico estn orientados en sentidos opuestos y sirven como sitio de anclaje a los microtubulos.

DEFINICION Y ESTRUCTURA DE UN GEN

GEN: is defined as the entire nucleic acid sequence that is necessary for the synthesis of a functional polypeptide

 En todo gen, adems, distinguiremos las siguientes regiones: - La regin promotora o promotor (P) - La regin codificadora (C) - La regin terminadora o terminador (T)

a)La regin promotora es una porcin del ADN situada al principio del gen y que, sin codificar ningn aminocido, sirve para que las enzimas que realizan la transcripcin reconozcan el principio del gen. b)La regin codificadora es la parte del gen que contiene la informacin para la sntesis de la protena. En la regin codificadora van a existir fragmentos de ADN que no contienen informacin: los intrones, y fragmentos que s que contienen informacin: los exones. c)La regin terminadora. Marca el final del gen.

REPLICACION, REPARACION Y RECOMBINACION DEL DNA

Existe un nico sitio en el cromosoma en el que se inicia la sntesis del DNA y se le denomina origen de la replicacin. El origen de la replicacin consiste en una secuencia especifica de 300pb que es reconocida por protenas especificas de la iniciacin.

 En el origen de la replicacin la doble hlice de DNA se abre y el inicio de la replicacin del DNA se produce en las dos cadenas. Al sitio de inicio de la replicacin se le denomina horquilla de la replicacin para moverse a lo largo del DNA.

REPLICACION
La replicacin del DNA consiste en la formacin de dos cadenas de DNA a partir de una siguiendo como modelo de copia las dos hebras de la molcula progenitora. Las estrictas reglas de apareamiento de bases significa que la utilizacin de una cadena como molde dar lugar a otra cadena con una secuencia de bases complementaria.

1 paso

2 paso

3 paso

O = helicasa || = ADN () = ADN, enrollado

O = polimerasa iii || = ADN ! = ARN

En este paso, la helicasa rompe los enlaces de hidrgeno para separar las dos hebras de ADN, por segmentos.

O = polimerasas i y ii + endonucleasa || = ADN ! = ARN

En este paso, la polimerasa iii, agrega la hebra de ADN hija, en el lado derecho de manera continua, en el lado izquierdo, es discontinuo para poder hacerlo en el sentido correcto. El trozo de ARN, lo utiliza como partidor, sin el cual, el proceso no funciona.

En este paso, las polimerasas i y ii, en conjunto con la endonucleasa, verifican que los nucletidos de la hebra hija estn bien puestos y corrigen los pedazos de ARN, transformndolos en ADN. La revisin, se realiza nucletido por nucletido. Esta correccin, reduce las probabilidades de error de 1/1.000.000 a 1/1.000.000.000.000.

1. DNA Polimerasa I. 2. DNA polimerasa II. 3. DNA polimerasa III. 4. Girasa. 5. Primasa. 6. Helicasa. 7. Ligasa. 8.Topoisomersa

RECOMBINACION GENETICA
La recombinacin gentica es el proceso mediante el cual la informacin gentica se redistribuye. La recombinacin gentica ocurre durante la profase I de la meiosis. La meiosis es la divisin celular que genera clulas haploides (gametas) a partir de clulas diploides. El proceso se conoce como gametognesis

La gametognesis ocurre solo en las clulas sexuales de los individuos y su resultado es la formacin de gametas (clulas) haploides, diferentes geneticamente entre s. Las gametas femeninas, resultado de la meiosis o gametogenesis se llaman ovocitos y las masculinas espermatocitos.

Viajemos al interior de nuestro organismo, hasta donde se genera la recombinacin gnica

En las clulas sexuales durante la gametogensis . . .

La molcula de ADN se condensa en cromosomas, indicando que inicia la meiosis

RECOMBINACION GENERAL Y HOMOLOGA

Tipos principales de recombinacin: 1) Recombinacin general u homloga 2) Recombinacin especfica (no-homloga), en la que a su vez distinguimos: a) Rec. especfica legtima, conservativa; b) Rec. especfica ilegtima, propiciada por elementos genticos transponibles.

 Recombinacin general u homologa: Puede ocurrir en cualquier lugar del genomio, por emparejamiento entre pares de secuencias que presenten una homologa suficientemente extensa. Depende de la intervencin de un equipo enzimtico caracterstico, en el que la protena RecA (o equivalente) es central en el proceso

 Recombinacin especfica legtima (conservativa) Requiere cortas secuencias de homologa entre el exogenote y el endogenote (por eso se llama tambin especfica de sitio), que son reconocidas por protenas especficas. Es independiente de RecA. Este tipo de recombinacin es tpica de la integracin de genomas de fagos en sitios concretos del genoma de bacterias hospedadoras.

Recombinacin especfica ilegtima: fenmenos de transposicin No depende de homologas (ni siquiera cortas) entre el exogenote (en este caso, un elemento gentico transponible, como IS o Tn) y el endogenote Tambin es independiente de RecA. El elemento transponible codifica una enzima (genricamente se les denomina transposasas) que reconoce secuencias especficas inversamente repetidas en los extremos del propio elemento, lo cual se requiere para el proceso de transposicin. Muchos elementos transponibles (pero no todos) poseen un mecanismo replicativo de transposicin: es decir, al transponerse dejan una copia de s mismos en el sitio original, y generan una copia nueva en el sitio a donde se transponen (recombinacin especfica duplicativa).

DAOS O MUTACIONES DEL ADN

La mayor parte de las mutaciones gnicas que afectan a las clulas se producen espontneamente durante la replicacin del DNA Mutaciones gnicas Las mutaciones gnicas mas comunes son: 1. Sustitucin de un nucletido por otro. 2. Perdida (deleccin) de uno o varios nucletidos. 3. Insercin(intercalcin) de uno o varios nucletidos en la molcula de ADN.

La clula ha desarrollado mecanismos especiales para corregir estos errores. Esos mecanismos eliminan el 99.9% de los errores.

DAOS O MUTACIONES DEL ADN

Existen otras clases de mutaciones genicas espontaneas no vinculadas con la replicacion del AND y son:
Desaminacion: La desaminacin es un proceso normal en el que las bases nitrogenadas citosina y adenina pierden sus grupos amino (-NH2). Esto cambia la estructura de los enlaces puente de hidrgeno que la base puede formar, si el dao no es reparado cuando ocurra la duplicacin de ADN se producir la mutacin por apareamiento de la base mutada con otra base que no corresponde.

1.

DAOS O MUTACIONES DEL ADN

La adenina tambin sufre desaminacin a Hipoxantina (A -> H), molcula que puede formar pareja con citosina, produciendo una transicin AT-->GC.

DAOS O MUTACIONES DEL ADN

2.Apurinacin o despurinacin:
ocurre cuando una purina se desprende de su desoxirribosa, de modo que el nucletido afectado pierde su base. Como consecuencia, queda en el gen un sitio apurinico, (AP) un sitio sin informacin a pesar de no haberse cortado el ADN.

Existen tres grupos de agentes ambientales que al actuar sobre la clula inducen la aparicin de mutaciones. 1.Agentes qumicos 2.Radiaciones ionizantes: UV, rayos gama y rayos X 3. Virus capaces de introducir ADN forneo AGENTES QUIMICOS: Numerosas sustancias tienen accin mutgena: la mayora de las drogas como el LSD, la cafena, la nicotina, el opio, la morfina, quinina y muchos edulcorantes. Segn el tipo de sustancia que sea, pueden provocar distintos efectos

Radiaciones ionizantes. Son radiaciones que tienen longitud de onda muy corta y son por tanto muy energticas. Estas radiaciones son rayos X, rayos ganma y la emisin de partculas alfa y beta que se producen en las explosiones nucleares. Las radiaciones provocan la prdida de electrones en algunos tomos del ADN que quedan en forma de iones muy reactivos. Pueden provocar la rotura de los cromosomas favoreciendo la aparicin de mutaciones cromosmicas y tambin producir modificaciones en las bases que conlleva a la formacin de mutaciones puntuales.
Radiaciones no ionizantes. Son, fundamentalmente, las radiaciones ultravioleta. No provocan ionizacin, pero los electrones pasan a niveles orbitales superiores lo que provoca la aparicin de mutaciones puntuales.

Virus. Pueden producir cambios en la expresin de algunos genes. Se cree que los virus mutagnicos podran realizar su accin al llevar en su genoma fragmentos de ADN tomados de una clula previamente infectada que incorporaran a la nueva clula parasitada.

ESTRUCTURA DEL NUCLEOLO

Tienen una estructura proteica densa (hasta un 40%), y dos tipos de elementos: grnulos de ARN y fibrillas de ADN. Su funcin principal es la sntesis del ARN ribosmico.

 Dentro del nucleolo, se han descrito tres regiones: el centro fibrilar (CF), la regin fibrilar (F) donde se cree que ocurre la transcripcin y el ensamblaje inicial y la regin granular (G) donde se finalizan las unidades pre-ribosomales

ESTRUCTURA Y FUNCION DE LOS RIBOSOMAS

Los ribosomas son orgnelos sin membrana, slo visibles al microscopio electrnico debido a su reducido tamao ( 29 nm en clula procariota y 32 nm en eucariota). Estn en todas las clulas vivas (excepto en el espermatozoide). Su funcin es ensamblar protenas a partir de la informacin gentica que le llega del ADN transcrita en forma de ARN mensajero (ARNm).

 El ribosoma consta de dos subunidades que se encajan y trabajan juntas para la traduccin del ARNm en protenas en el proceso de sntesis proteica. Cada subunidad est formada por una, dos o tres molculas muy grandes de ARN (llamado ARN ribosmico) y numerosas protenas ms pequeas.