Hemocultivo: toma de muestra, transporte e interpretacin de resultados

Dra. Ma Mercedes Somarriba Ortega Pediatra Infectloga Servicio de Infectologa HINMJR Sep 2008

DEFINICIONES:
Infeccin del Torrente Sanguneo: Invasin al sistema circulatorio por bacterias provenientes de rganos o tejidos infectados. Bacteremia: invasin pasajera de bacterias al torrente sanguneo (stress, lavado de dientes, relacin sexual)

SEPSIS SECUENCIA DE EVENTOS

Infeccin
Respuesta inflamatoria a microorg. o Invasin tejidos estriles

SIRS

Sepsis

SIRS + proceso infeccioso presumido o confirmado

Sepsis severa
Sepsis con 1 signo de falla orgnica

Respuesta clnica a insulto inespecfico; incluye 2 de los siguientes:

Fiebre o hipotermia Taquicardia Taquipnea Leucocitosis o leucopenia o >10% bandas

CHOQUE SEPTICO

Cardiovascular (hipotensin refractaria) Renal Respiratoria Heptica Hematolgica SNC Acidosis metablica

Bone et al. Chest. 1992;101:1644; N Engl J Med. 1999;340:207

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FACTORES QUE FAVORECEN EL APARECIMIENTO DE SEPSIS Y BACTEREMIAS:

1. Desnutricin 2. Enfermedades metablicas (Ej. diabetes mellitus) 3. Cirrosis 4. Manipulaciones quirrgicas: urolgicas dentarias endoscpicas

5. Catter venoso central y perifrico 6. Malformaciones congnitas 7. Esplenectoma 8. Quemaduras 3er grado. 9. Bajo peso al nacer 10. Prematuros o ancianos 11. Enfermedades tumorales 12. Enf autoinmune

PARA CONOCER LA ETIOLOGIA DE LA INFECCION

HEMOCULTIVO

Factores que afectan la sensibilidad del Hemocultivo (resultados falso negativos):

1. Dilucin entre sangre y caldo inadecuada: conservar la relacin 1:10.

Sirve para diluir los factores bactericidas (complemento) y fagocitosis o antimicrobianos administrados previamente.

2. Eleccin equivocada del medio de cultivo: bacterias fastidiosas requieren condiciones especiales (por ejemplo Brucellosis)

Factores que afectan la sensibilidad del Hemocultivo (resultados falso negativos):

3. Administracin de antimicrobianos Previa a la toma del hemocultivo.

4. Cantidad de hemocultivos inadecuado: En algunos casos se necesitan como mnimo 3 hemocultivos el mismo da. 5. Momento inadecuado en el curso de la enfermedad: En la fiebre tifoidea los mayores ndices de recuperacin son en la primera y segunda semana. 6. Utilizar caldos que no estn hechos para funcionar como hemocultivos (slo BHI sin los otros componentes)

Componentes del caldo para hemocultivo

1. Caldo BHI o Tripticasa Soya

2. Anticoagulante SPS (polianetol sulfonato de sodio polianinico al 0.025-0.05% ):

Inhibe la actividad bactericida del suero. Inhibe la fagocitosis Inactiva complemento, Neutraliza lisozimas y aminoglucsidos.
3. CO2

NOTA: los frascos preparados por el

laboratorio conteniendo BHI sin SPS ni CO2 NO SON ADECUADOS PARA HEMOCULTIVOS

Materiales requeridos para la toma del hemocultivo

El material debe estar listo en una bandeja de trabajo y debe contener:

Alcohol 70% yodo povidona 7.5-10% Jeringas de 3, 5 o 10 mL descartables Gasas o torundas de algodn Guantes estriles Mascarilla (si es necesario) Frascos de hemocultivo para aerobios:

9mL para neonatos 20 mL para nios 50 o 70 mL para adultos

Volmenes de sangre requeridos

Se recomienda una dilucin 1/10 (1 mL de sangre por cada 9 mL de caldo del frasco de hemocultivo).
La dilucin de la sangre es necesaria con el fin de neutralizar las propiedades bactericidas de sta y el tratamiento antimicrobiano del paciente. El volumen de sangre a cultivar admitido es:

Neonatos: 1 mL. Frasco requerido: 9 mL de BHI Lactantes: 2 a 3 mL. Frasco requerido: 20-25 mL de BHI Preescolares y escolares: 5 ml. Frasco requerido: 50 mL Adolescentes y adultos: 10 mL. Frasco requerido: 70 mL

Sitio de la toma de la muestra

Cada una de las muestras de sangre se debe realizar en sitios diferentes y los puntos se seleccionarn previamente.
Las venas del antebrazo son las que se utilizan generalmente para este fin. No obtenga una muestra a travs de los catteres o canalizaciones perifricas.

Estudios de microscopia electrnica han revelado que el 100% de los catteres se colonizan con microorganismos de la piel a las 48 horas de instalados.

Cantidad de hemocultivos

1. Se recomienda 2 hemocultivos en 24 horas con un intervalo de 30 a 90 minutos 2. En casos de meningitis y shock sptico se tomar un set de 2 hemocultivos con un intervalo de 30 minutos o menos 3. Si el paciente va a requerir inicio de tratamiento antimicrobiano inmediato, se puede obtener dos hemocultivos al mismo tiempo, de diferentes sitios de puncin

Toma de la muestra: antisepsia del sitio y de las manos

4. Si se sospecha endocarditis infecciosa, se recomienda obtener el primer set de 2 hemocultivos y si estos van negativos en las primeras 24 horas, obtener un segundo set de 3 hemocultivos ms 5. En caso de hemocultivo para Infeccin del Torrente Sanguineo asociado a catter, tomar la muestra de un sitio distante al de la vena canalizada.

Toma de la muestra: antisepsia del sitio y de las manos

1. Lvese las manos con agua y jabn (preferiblemente lquido), luego aplique alcohol gel *. Colquese los guantes 2. Limpie el tapn de goma con alcohol etlico al 70% y deje que se seque solo.

3. Haga antisepsia rigurosa del rea elegida. Utilice alcohol etlico al 70%. Repita el procedimiento las veces que sea necesario si el algodn muestra evidencias de suciedad.
*Lea la tcnica para la antisepsia de manos en la Gua para el uso racional de antispticos, desinfectantes e higiene de manos MINSA/Unicef/QAP/USAID 2008

Toma de la muestra: antisepsia del sitio y de las manos

4. Extienda sobre la misma rea, yodo povidona 7.5-10%. 5. Deje secar durante un mnimo de 2 minutos ( tiempo en que se muestra la accin del yodo povidona). 6.- Cmbiese los guantes, previo uso del alcohol gel y secado

Toma de la muestra: antisepsia del sitio y de las manos

Inserte la aguja en la vena elegida para extraer el volumen de sangre determinado. Inoclela rpidamente en el medio de cultivo para evitar la coagulacin de la sangre en la jeringa. El medio de cultivo debe estar a Temperatura ambiente y rotulado con el nombre del paciente y expediente

Toma de la muestra: antisepsia del sitio y de las manos

No hablar o toser mientras realiza la extraccin. (usar mascarilla en caso necesario)

RECORDAR

La limpieza se realiza en forma excntrica, de dentro hacia fuera, sin retornar al centro. Es importante esperar a que el compuesto yodado se seque para que ejerza su accin oxidante. No utilice gaza o algodn para secarlo!!.

En pacientes alrgicos al yodo, realice la antisepsia slo con alcohol al 70%. Repita el procedimiento.

Traslado de la muestra

Los hemocultivos se deben enviar inmediatamente al Laboratorio de Microbiologa. Si no es posible, debe haber disponible una incubadora 36C Si no se dispone de sta, se dejarn a temperatura ambiente por NO MAS DE DOS HORAS. Nunca refrigerar. Las muestras se transportan a temperatura ambiente.

Cultivo de punta de catter

Antes de cultivar la punta del catter venoso central realice una limpieza del sitio de insercin con alcohol y luego con solucin yodada. Retirar y enviar 5 cm del extremo distal del catter en tubo seco estril de forma inmediata.

El crecimiento reportado es contaminante o causante?

Staphylococcus coagulasa negativa 94% Bacillus spp en el 94 % Propionibacteriun acnes 99% Corynebacterium spp 79% Clostridium perfringens 50% Streptococcus viridans 48%.

CUANDO SE CONSIDERAN PATOGENOS?

Cuando se aslan en hemocultivo mltiples Cuando corresponden a pacientes inmuno suprimidos (cncer, transplante) Cuando los pacientes son portadores de dispositivos protsicos como catter venosos centrales, prtesis ortopdicas, prtesis vasculares o vlvulas de derivacin ventrculo-peritoneal

Bacteremias por mas de un agente

En situaciones tales como abscesos intraabdominales infecciones de catteres Neutropnicos febriles con mucositis intensa Grandes quemados

En la gran mayora de las situaciones clnicas, las bacteriemias o fungemias son por un microorganismo nico.

INCUBACIN Y LECTURA

1. Temperatura de incubacin: 36C 2. Tiempo de incubacin: 7 dias 3. Subcultivos: Dias 2, 3, 7, excepto con sospecha de neumococo: Das 2 y 3. S. pneumoniae se autolisa rpidamente!!!

Informe de resultados: qu esperar?

Se deben pedir tres informes:

1. El resultado del examen diario de cada hemocultivo: informe verbal (hay o no hay crecimiento bacteriano) 2. El resultado de la tincin de Gram, en caso de haber crecimiento bacteriano. Se informa por escrito. 3. La identificacin definitiva de los microorganismos aislados y el resultado de su sensibilidad a los antimicrobianos. Se debe enviar por escrito.

ACTUALMENTE SE ESTA DISEANDO UNA FICHA DE SOLICITUD DE CULTIVOS PARA OBTENER MEJOR INFORMACION Y ANALISIS DE DATOS EN WHONET

MUCHAS GRACIAS

Extraccin de sangre a travs de sistema cerrado Vacutainer. Se inocula directamente en el frasco de hemocultivo, al vaco.