Cromatografa

Principios tericos de las separaciones cromatogrficas

Definicin

Cromatografa: tcnica de separacin basada en las diferentes interacciones de los compuestos con dos fases, la fase mvil y la fase estacionaria

Mikhail Tswett (1903) pigmentos de plantas

Componentes:

Fase mvil: transporta e interacciona (en algunos casos) con la muestra a travs de un medio soporte que contiene la fase estacionaria Fase estacionaria: recubrimiento con el cual interactan los compuestos

El medio soporte es una superficie slida en la cual se encuentra la fase estacionaria

Lo que se hace antes de analizar una muestra compleja es. SEPARAR los componentes:

Se coloca la Se agrega muestra fase mvil La columna contiene la fase estacionaria

Se colectan las fracciones con los componentes

Cromatografa de columna

Cromatograma

En columna

http://www.uniregensburg.de/Fakultaeten/nat_Fak_IV/Organische_Chemie/Didaktik/Ke usch/D-CC-e.htm

Tapa

Cromatografa Planar

papel
ascenso del solvente

Solvente (fase mvil)

http://www.youtube.com/watch?v=jzf0stGQhr k&feature=related

http://www.metacafe.com/watch/yt-gzp2S0e9o8s/chromatography/

Fundamentos y conceptos en la cromatografa

Fase mvil y fase estacionaria Retencin - Migracin Bandas Equilibrio !

En columna vs. planar TIPOS:

Lquida vs. gas vs. FSC Particin Adsorcin Intercambio inico Exclusin por tamao

Cromatografa
Reparto

Cromatografa de columna

Cromatograma

Cromatografa:

separacin de picos

Velocidad de migracin ensanchamiento de banda

Cromatografa: Separacin de picos

Separacin pobre

Myor separacin

Total separacin y mejor forma de picos

Constante o Coeficiente de Distribucin (K)

A es un soluto determinado

A mvil A estacionaria

Kc

cS s [A] c MM [A]

estacionaria mvil

Si hay mayor K > Retencin en la fase estacionaria Tiempos de Retencin elevados

Tiempos de Retencin

tM = tiempo de retencin de la fase mvil (tiempo muerto) tR = tiempo de retencin del analito (soluto)
L = longitud de la columna

Velocidades

Velocidad = distancia/tiempo longitud de la columna/t de retencin

Velocidad del soluto:

L tR L tM

Velocidad de la fase mvil:

Factor de retencin : describe velocidades de migracin de los solutos en las columnas

B es ms retenido que A >1

KB Si k<< 1 , laK elucin es A

Particin

muy rpida. kla Si k 20 -30, B elucin es demasiado lenta. kA

tR = Tiempo de Retencin tFactor muerto M = Tiempo de Retencin

(tR ) A tM (tR ) B tM kA and k B tM tM

Compuesto B (tR ) B tM (tR ) AValor tideal: entre 2 y 10 M Compuesto A

Forma de los picos cromatogrficos

EFICIENCIA

Picos anchos
POCA EFICIENCIA

Eficiencia de una columna

Platos Tericos

Ms platos tericos (N)

La columna es ms eficiente mientras tenga:

Cada plato sea de menor altura (H)

N=L/H

Ensanchamiento de Banda
Procesos cinticos

Altura de plato terico

Ecuacin de Van-Deemter

Velocidad lineal fase mvil

H A B / (CS CM )

Ensanchamiento de Banda
Caminos mltiples

Ensanchamiento de Banda
Caminos mltiples
A = 2ldp
l depende de la distribucin en el tamao

de partcula: valores pequeos de l implica mejor empaquetado

dp es dimetro de la partcula
A es menor, si el tamao de partcula es pequeo Independiente del flujo de la fase mvil

Ensanchamiento de Banda
Difusin Longitudinal
Columna

Difusin del soluto

Ensanchamiento de Banda
Difusin Longitudinal
Velocidad de migracin en un gradiente de concentracin

B = 2gDM
B/u = 2gDM /u

= Factor de obstruccin: se relaciona con la calidad del relleno

DM es el coeficiente de difusin en
la fase mvil H se relaciona de manera inversa al flujo de la fase mvil

Temperatura y viscosidad afectan a DM

Ensanchamiento de Banda
Difusin Longitudinal

Ensanchamiento de Banda
Transferencia de masa
Columna

El soluto en el centro se mueve ms rpido a travs de la fase mvil, que el que est en los extremos.

Ensanchamiento de Banda
Transferencia de masa
Columna
Depende inversamente de: DM = coeficiente de difusin en la fase mvil

DS = coeficiente de

difusin en la fase estacionaria Depende directamente de: df = grosor de la pelcula dp = tamao de partcula

No hay suficiente tiempo de equilibrio con la fase estacionaria

Ensanchamiento de Banda
Transferencia de masa
C no disminuye

Columna

Si la pelcula es gruesa

(las molculas recorren ms camino para llegar a la superficie), y Con coeficientes de difusin menores

No hay suficiente tiempo de equilibrio con la fase estacionaria

irn ms despacio

Variables que influyen en la Eficiencia de la Columna

Es mayor a T altas (menos viscosidad)

Ensanchamiento de Banda
Procesos cinticos

Ecuacin de Van-Deemter

H A B / (CS CM )