Actividad de la enzima antioxidante superxido dismutasa y niveles de cobre y zinc en pacientes con diabetes mellitus tipo 2

Introduccin
La diabetes mellitus es un estado crnico de hiperglicemia que afecta alrededor de 124 millones de personas en el mundo. An cuando existen varios tipos de diabetes, cerca del 90% de las personas afectadas presentan la tipo 2 (DM2), conocida comnmente como diabetes mellitus no dependiente de insulina. Estos pacientes por lo general son obesos, con elevados niveles de insulina plasmtica, resistencia a la insulina y usualmente deficiencia relativa de esta hormona. En la diabetes, se producen cambios metablicos que ponen de manifiesto una mayor produccin de radicales libres que son molculas que en su estructura atmica presentan un electrn desapareado o impar en el orbital externo, dndole una configuracin especial que genera una alta inestabilidad, reaccionando y alterando a la vez las funciones de diferentes biomolculas incluyendo carbohidratos, lpidos, protenas.

Materiales y mtodos
Se estudi una muestra de 34 pacientes adultos con diabetes mellitus tipo 2, en Maracaibo, Venezuela, con un tiempo de evolucin de la enfermedad de 5-10 aos, sin patologas asociadas ni complicaciones de la diabetes. La seleccin de los mismos fue realizada en forma aleatoria, incluyendo pacientes de ambos sexos con edades comprendidas entre 34 y 59 aos que cumplieran con los criterios anteriores. Con propsitos comparativos, fueron evaluados 30 individuos sin historia de diabetes mellitus (grupo control). Se excluyeron todos los sujetos que estuvieran consumiendo suplementos antioxidantes al menos un mes previo a la toma de las muestras sanguneas. Para realizar una valoracin antropomtrica de los voluntarios, se registr el peso, la talla y se calcul el ndice de masa corporal (IMC). Fueron colectadas muestras de sangre de los pacientes diabticos y controles por venopuncin en el rea antecubital, realizada en horario matutino y previo ayuno de 12 horas. Se dispens un volumen adecuado de sangre en tubos qumicamente limpios sin anticoagulante para la separacin del suero y en tubos con heparina o EDTA, para obtener sangre completa.

Determinaciones bioqumicas.
Se determin la glicemia basal (mg/dl), colesterol total (mg/dl), triacilglicridos (mg/dl) y colesterol asociado a las HDL (mg/dl), segn mtodos enzimticos normalizados. Adicionalmente, se midi la fraccin de hemoglobina glicosilada (HbA1c) en los pacientes diabticos, empleando un sistema basado en la separacin de esta molcula por cromatografa de afinidad con derivados del cido burnico. La concentracin total de hemoglobina se cuantific mediante el mtodo de la cianometahemoglobina.

Resultados
Tabla 1. Caractersticas clnicas-bioqumicas de los pacientes diabticos y controles

La Tabla 1 muestra las caractersticas clnicas-bioqumicas de los pacientes con diabetes mellitus tipo 2 y los controles evaluados en el presente estudio. No hubo diferencias significativas entre ambos grupos en cuanto a la edad, IMC, colesterol total y HDLcolesterol. La glicemia basal y los triacilglicridos fueron significativamente mayores en los diabticos en comparacin con los controles (p<0,05).
Diabticos Edad (aos) Sexo (M/H) IMC (kg/m2) Glicemia basal (mg/dl) Colesterol total (mg/dl) 56 1 18/16 28 2 174 12 * 230 20 No diabticos 52 3 20/10 29 1 85 3 * 226 11

Triacilglicridos (mg/dl)
HDL-colesterol (mg/dl) Hemoglobina glicosilada (%)

352 94 *
38 5 12 1

225 35 *
39 4 -

 Tabla 2. Actividad de la enzima superxido dismutasa y niveles de cobre y zinc en pacientes diabticos y controles
En la Tabla 2 se presentan los resultados sobre la actividad de la enzima superxido dismutasa, los niveles de cobre y zinc para los grupos en estudio. Los pacientes diabticos presentaron una actividad de Cu/Zn-SOD significativamente inferior a los controles (p<0,05). En los diabticos, los niveles de cobre en suero y eritrocitos fueron significativamente mayores que en los controles (p<0,05). La concentracin srica de Zn y la relacin Cu/Zn en los diabticos fueron significativamente bajas en comparacin con los controles, pero los eritrocitos de los diabticos contenan ms Zn que los controles (p<0,05).
Diabticos SOD (U/g Hb) Cu srico (mg/dl) Zn srico (mg/dl) Cu/Zn srico Cu eritrocitario (mg/g Hb) Zn eritrocitario (mg/g Hb) 1839 101 * 59,50 6,02 * 119,59 6,73 * 0,62 0,08 * 1,76 0,14 * 39,13 1,05 * No diabticos 2573 161 * 55,45 5,80 * 134,74 9,43 * 0,74 0,19 * 1,27 0,13 * 31,62 1,75 *

La Tabla 3 muestra el anlisis de correlaciones entre la actividad de la superxido dismutasa y los niveles de minerales en los pacientes con diabetes mellitus tipo 2 y controles. Slo se encontr una significativa correlacin positiva entre la actividad de la SOD y Zn srico en los controles (r=0,712; p<0,05). Tabla 3. Correlaciones entre la actividad de la enzima superxido dismutasa y los niveles de cobre y zinc en pacientes diabticos y controles.

Diabticos SOD-Zn srico SOD-Cu srico SOD-Zn eritrocitario SOD-Cu eritrocitario r* -0,271 -0,210 -0,243 0,209 p ** NS NS NS NS

No diabticos r* 0,712 0,334 0,270 -0,249 p ** <0,05 NS NS NS

Conclusiones
Se ha observado que inicialmente se produce un incremento de la SOD, como respuesta a la elevada generacin del anin superxido (O2) en la clula y su eliminacin por la enzima; sin embargo, la intensa produccin de este radical por un tiempo prolongado, agota la estimulacin de la actividad enzimtica, ya que el producto de la reaccin puede inhibirla. Cuando se evaluaron los niveles sricos de zinc, estos resultaron significativamente bajos en los diabticos, lo cual se corresponde con la mayora de las investigaciones realizadas con diabticos tipo 1 y tipo 2, aunque difieren de otros estudios.

Caracterizacin Fitoqumica y Efecto Hipoglucemiante de Tecoma stans y su Relacin con la Presencia del Cromo como Factor de Tolerancia a la Glucosa

INTRODUCCION
La diabetes es una enfermedad crnica de gran importancia mdico social porque afecta a muchos adultos y su frecuencia est aumentando con el envejecimiento de las poblaciones. A nivel mundial, en el ao 2000 sufran diabetes 171 millones de personas, y se prev que en el 2030 esa cifra alcance un total de 366 millones. En algunos pases, 1 de cada 20 personas sufre diabetes, pero menos de la mitad de los casos son diagnosticados. En Mxico, aproximadamente el 10% de la poblacin padece diabetes, se estima que el 90% de los casos son del tipo II.

METODOLOGA Durante la poca de verano se recolect T. stans en el municipio de Los Rayones, Nuevo Len, Mxico, siendo las coordenadas de la cabecera municipal de Rayones: latitud norte 25, longitud oeste 100 04 , mientras que la altitud es de 906 metros sobre el nivel del mar. Se seleccionaron especmenes sanos, maduros y sin dao aparente, siguiendo un procedimiento aleatorio simple. Se llev un ejemplar seco de la planta al Departamento de Botnica de la Facultad de Ciencias Biolgicas, UANL. para su identificacin sistemtica.

Molienda, secado y obtencin de extracto Se separaron las hojas de T. stans, se secaron a temperatura ambiente y con aireacin por una semana y se molieron en molino elctrico, utilizando un tamao de malla mediano. Para obtener el extracto acuoso se pesaron 50 gramos de planta seca y molida y se prepar una infusin en agua, se repos por 20 minutos y se filtr utilizando papel filtro Whatman No. 40 en matraz kitasato y con la ayuda de una bomba de vaco. El sobrenadante se coloc en viales especiales para liofilizadora, se congelaron a -21C por 12 horas y despus a -70C para su posterior liofilizacin (Labconco, Freeze Dry System, Freezone 12).

Materiales y mtodos
Para conocer el efecto antidiabtico de T. stans se utilizaron 24 animales de laboratorio, de los cuales a 12 se les indujo la diabetes, de tal forma que se tuvieron 8 grupos (n=3) y diariamente se administr lo siguiente: *Grupo diabtico (n=3): agua por va oral (v.o) *Grupo diabtico (n=3): infusin de la planta por v.o. *Grupo diabtico (n=3): picolinato de cromo (200 g/kg de peso) por v.o. *Grupo diabtico (n=3): picolinato de cromo ms infusin de la planta por v.o. *Grupo no diabtico (n=3): agua por v.o *Grupo no diabtico (n=3): infusin de la planta por v.o. *Grupo no diabtico (n=3): picolinato de cromo por v.o. *Grupo no diabtico (n=3): picolinato de cromo ms infusin de la planta por v.o.

 Se les realiz seguimiento de peso, niveles de glucosa sangunea y urinaria; as como se observ el comportamiento renal y heptico. La determinacin de los niveles de glucosa se realiz a los 7, 15, 30 y 45 das, despus de administrado el EZT y el extracto de la planta. Para la glucosa sangunea se tuvo un ayuno de 4-5 horas en cada uno de los animales, se obtuvo sangre de la cola, se utilizaron tiras reactivas y un glucmetro manual (Roche). Para la determinacin de la glucosa urinaria se tuvo un ayuno previo de 7 horas, se colect orina de los animales y se utilizaron tirillas reactivas especiales para uroanlisis. Para el anlisis estadstico, se utiliz la prueba de ANOVA de una sola va.

RESULTADOS Concentracin de cromo

Se encontr cromo en las hojas de T. stans en una concentracin de 54 g/100 g. Como se mencion anteriormente, el cromo se considera elemento traza esencial en humanos y animales y tiene una funcin importante en el metabolismo de la insulina, como factor de tolerancia a la glucosa (FTG). El hecho de encontrarlo presente en esta especie resulta favorable en la reduccin de la hiperglicemia (Anderson 1998). Mltiples estudios se han realizado para estudiar la funcin del cromo, como factor de tolerancia a la glucosa (Chowdhury et al., 2003; Brown 2003; Broadhurst y Domenico, 2006; Balk et al., 2007), sin embargo, solo se encuentra un trabajo reportado (Castro et al., 2002) y el presente estudio en el que se asocia este elemento y su efecto hipoglucemiante.

CONCLUSIONES
A los 45 das de tratamiento, el grupo al cual se le administr la infusin de T. stans fue el que mostr el mayor porcentaje de reduccin de la hiperglucemia (33.5%). Aunque se conoce que el cromo favorece la reduccin de la hiperglucemia, el grupo tratado con la planta ms picolinato de cromo tuvo menor porcentaje de disminucin de la hiperglucemia con respecto al grupo tratado solamente con T. stans (32.3% vs 33.5%), sin mostrar diferencia estadsticamente significativa entre estos dos grupos (p>0.05). Al aplicar los tratamientos en los grupos de animales no diabticos no se presentaron cambios en cuanto a la concentracin de glucosa.