Protenas con Actividad Cataltica

ENZIMAS
Son catalizadores biolgicos macromoleculares. La mayora son protenas, pero en los ltimos aos se ha descubierto que algunas molculas de RNA tienen actividad cataltica. Sus caractersticas ms sobresalientes son:

Poder cataltico Especificidad La catlisis tiene lugar en una regin pequea de la molcula llamada Centro Activo

COFACTORES: Son compuestos no proteicos fundamentales para la actividad cataltica de una enzima. Pueden o no estar fuertemente asociados a las enzimas. Pueden se molculas orgnicas pequeas (Coenzimas) o Iones Metlicos.

COENZIMAS
Funcionan como:
Portadoras de grupos qumicos pequeos (carboxlico COOH, Acetilo CO CH3, metilo CH3, etc) Transportadoras de electrones (e-) o de e- y protones (H+) Las Coenzimas permiten llevar a cabo funciones que la parte proteica no puede efectuar.

Pueden estar fuertemente ligados a las enzimas constituyendo los Grupos Prostticos, o bien pueden unirse a la enzima en el momento de la reaccin.

Vitaminas y sus Formas Coenzimticas: Funcin promovida

Tiamina Riboflavina Tiamina Pirofosfato Flavina Mononucletido (TPP) Flavina Adenina Dinucletido(FAD) Aldehido Hidrgeno (e-)

Ac. Nicotnico

Nicotinamida Adenina Dinucletido (NAD) Nicotinamida Adenina Dinucletido Fosfato (NADP) Ac. Pantotnico Coenzima A (CoA) Piridoxina Fosfato de Piridoxal Biotina Biocitina Ac. Flico Ac. Tetrahidroflico Vit. B12 Ac. Lipoico Coenzima B12 Lipoil-Lisina

Hidrgeno (e-)

Acetilo Amino Carboxilico

Compuesto Monocarbonado Desplazamiento H H y Acetilo

Flavina Adenina Dinucletido = FAD

Pentosa

Iones metlicos como Cofactores

Zn++ Mg++ Mn++ Alcohol deshidrogenasa, Anhidrasa carbnica, Carboxipeptidasa Fosfohidrolasas, Fosfotransferasas Fosfotransferasa, Nitrogenasa

Fe+++ Fe++ Citocromos, Catalasas, Peroxidasa Cu++ (Cu+) Citocromo oxidasa K+ Na+ Piruvato quinasa (Mg++) ATPasa de la membrana plasmtica (Mg++,K+)

Clasificacin de acuerdo al tipo de reaccin: NOMENCLATURA

1 Oxidoreductasas Oxidacin-Reduccin 2 Transferasas

Lactato deshidrogenasa

Nuclesido Transferencia de un grupo monofosfato quinasa

3 Hidrolasas
4 Liasas 5 Isomerasas 6 Ligasas

Ruptura de enlaces por hidrolisis Adicin o separacin de grupos para formar dobles enlaces Modificacin del ordenamiento espacial de la molcula Unin de 2 sustratos a expensas de hidrlisis del ATP

Acetilcolinesterasa
Fumarasa Triosa fosfato isomerasa Aminoacil-tRNa sintetasa

Ejemplo segn la International Union of Biochemistry - 1964

Nuclesido monofosfato quinasa EC 2. 7. 4. 4

2. TRANSFERASA 7. Transfieren grupos fosforilos 4. Grupo aceptor P 4. Aceptor especfico (NMP) NMP + ATP NDP + PPi

Las Enzimas
Son altamente especficas

Aumentan la velocidad de la reaccin No alteran el equilibrio de la reaccin

Reducen la Energa libre de activacin

La primera etapa es la formacin del Complejo Enzima-Sustrato

ESPECIFICIDAD: Ej. Enzimas Proteolticas

Tripsina

Trombina

Disminucin de la Energa de Activacin

H2O2 H2O + O2

Catalizador
Ninguno

Energa de Activacin
(J mol -1)

75.600

Platino coloidal

49.140

CATALASA

8.400

Analoga de las bollillas flotantes con la catlisis Enzimtica

REACCION NO CATALIZADA

REACCION CATALIZADA

CATALIZADA
NO CATALIZADA

Cambio de Energa Libre (G)

Es la funcin termodinmica ms adecuada para

determinar si se puede producir una reaccin. Esta slo puede producirse si el (G) es negativo
El G de una reaccin es independiente de la va El G0 es el cambio de energa libre en condiciones estndares. El G0 es el cambio de energa libre en condiciones de pH 7

La esencia del PROCESO CATALITICO es la unin especfica entre la Enzima y el Sustrato con formacin del Complejo ES.

En el Modelo de ADAPTAMIENTO INDUCIDO, la Enzima sufre una transformacin conformacional al ligarse al Sustrato.
El Sitio Activo es complementario al sustrato luego que el sustrato se une a la Enzima

Modelo de Michaelis-Menten

Vmax se correlaciona con el Nmero de Recambio

(turnover)
Nmero de Recambio: El N de molculas de sustrato convertidas en producto por unidad de tiempo, por molcula de enzima, cuando la reaccin procede a la velocidad mxima, es decir cuando la Enzima se encuentra completamente saturada con el Sustrato

Enzima
Catalasa Acetilcolinesterasa Quimotripsina Lisozima

N de Recambio(seg-1) 4 x 107 1,4 x 104 1,9 x 102 0,5

Km, su importancia metablica

Afinidad Enzima - Sustrato
GLUCOSA + ATP
E1 = Hexoquinasa

GLUCOSA-6-P + ADP
Km = 50 mol dm3

E2 = Glucoquinasa

Km = 10 mmol dm3

Ayuno Posprandial

Glucosa en sangre

mmol dm3

Glucosa en sangre 10-12 mmol dm3

Las Enzimas pueden inhibirse mediante molculas especficas

Ej. Ms importantes:

Sitio Activo:
Presenta Complementaridad Geomtrica y Electrnica

Algunas caractersticas del Centro Activo

Implica una porcin relativamente pequea del

total de la enzima

Es una hendidura tridimensional que puede incluir residuos de aminocidos distantes

Las uniones enzima-sustrato estn formadas por numerosas fuerzas dbiles La especificidad depende de la disposicin exacta de los tomos en los hoyos que forman el Sitio Activo

Sitio activo de la Enzima CARBOXIPEPTIDASA A

Cambios Conformacionales con la unin del sustrato

Cambios conformacionales de la Enzima ADENILATO CICLASA

Sitio activo de la
QUIMIOTRIPSINA

His 57

Enzimas Alostricas

PROTEINAS ALOSTERICAS

Regulacin de las Actividades Enzimticas

Sntesis

de Precursor Inactivo y su posterior activacin en un tiempo y lugar fisiologicamente apropiados (Quimotripsingeno) Presencia de ciertas Protenas Moduladoras que pueden estimular o inhibir la actividad enzimtica (Calmodulinas) Modulacin Covalente (fosforilacin Ser, en metabolismo del glucgeno) Efectores Alostricos

Estructura de la fosfofructoquinasa