Asignatura: Microbiologa y taxonoma microbiana Facilitadora: Vernica Hernndez Prez Alumna: Gabriela Snchez Martnez Grupo: BI-MTM-1303-002

Evidencia de Aprendizaje. Mundo microbitico AGAR VERDE BRILLANTE PARA EL AILAMIENTO DE SALMONELLA SPP

Caractersticas Generales de la Salmonella spp. Salmonella es un bacilo Gram negativo que hace parte de la familia Enterobacterieceae, actualmente contempla cerca de 2700 serivares. Con excepcin de la serovariedad Gallinarum-Pollorum, son mviles gracias a la presencia de flagelos pertricos. Este gnero bacteriano se divide en dos especies: Salmonella entrica y Salmonella bogori (Grupo V). Salmonella entrica se subdivide en 6 subespecies como se observa en la siguiente tabla que se presenta a continuacin.

Caractersticas de crecimiento y sobrevivencia Crecimiento Temperatura Salmonella puede crecer entre 7-49C, su crecimiento se ve reducido a <15C, temperatura de este microorganismo, sealan que pueden crecer a 5-9C, sin embargo estos datos no son concluyentes porque dependen de serovar y el medio de cultivo donde se inocula. En el caso de la carne de pollo empacad al vaco se ha observado que Salmonella sobrevive a 3C pero no se multiplica. pH Salmonella crece a un pH que vara entre 4-9, la tolerancia al cido depende del tipo y tamao del cido al cual se expone el microrganismo, y por factores como la temperatura y sustancias como los nitritos. Diversos serovares de Salmonella se han adaptado al pH del ciego en los pollos, favoreciendo de esta manera su colonizacin. Por el pH cercano a la neutralidad que tiene el pollo, Salmonella no se ve inhibida. Condiciones atmosfricas Salmonella se clasifica como anaerobio facultativo. El crecimiento bajo atmsferas de nitrgeno es ligeramente menor a las condiciones aerbicas. Puede crecer de 8-11C con concentraciones de 20-50% de CO2 19o, su crecimiento se ve retardado cuando hay un 80% de CO2 en el aire. Imgenes de Salmonella spp

Medios de cultivo agar verde brillante

Fundamento Desarrollado por Kristensen, Lester y Jurgens en 1925 y modificado por Kauffmann. En el medio de cultivo, la pluripeptona y el extracto de levadura, constituyen la fuente de nitrgeno, vitaminas y minerales.

Composicin Extracto de levadura 3,0 g Digerido pptico de tejido animal 5,0 g Digerido pancretico de casena 5,0 g Lactosa 10,0 g Cloruro de sodio 5,0 g Sacarosa 10,0 g Rojo fenol 80,0 mg Agar 20,0 g Verde brillante 12,5 mg Agua destilada 1.000Instrucciones de preparacin Suspender 58. g del polvo en 1 litro de agua purificada. reposar 5 minutos. Calentar con agitacin frecuente y llevar a ebullicin para disolucin total. Disolver en recipientes apropiados y esterilizar en autoclave a 118-121C durante 15 minutos. Enfriar y distribuir en placas de Petri estriles. mL pH final 6,9 0,2 (El pH se puede ajustar con NaOH 1.0 N o H2SO4 1.0 N)

Agar Verde Brillante para el ahilamiento de salmonella spp Uso Medio de enriquecimiento altamente selectivo para el aislamiento de Salmonella spp., excepto Salmonella typhi y Salmonella paratyphi a partir de muestras clnicas, alimentos, y otros materiales de importancia sanitaria.

Instrucciones de preparacin Suspender 58. g del polvo en 1 litro de agua purificada. reposar 5 minutos. Calentar con agitacin frecuente y llevar a ebullicin para disolucin total. Disolver en recipientes apropiados y esterilizar en autoclave a 118-121C durante 15 minutos. Enfriar y distribuir en placas de Petri estriles.

Caractersticas del producto Medio de cultivo deshidratado: color verde, homogneo, libre deslizamiento. Medio de cultivo preparado: color naranja amarronado. Almacenamiento Medio de cultivo deshidratado a 10-35C. Medio de cultivo preparado a 2-8C. Procedimiento de siembra Sembrar en superficie por estriado un inculo denso de la muestra directa o de una dilucin. Incubacin En aerobiosis, a 35-37C hasta 48. horas. Conclusiones:

Interpretacin de los resultados Bacterias que fermentan la lactosa y/o sacarosa: colonias amarillo-verdosas, rodeadas por un halo de color amarillo verdoso del medio de cultivo. Bacterias que no fermentan la lactosa y/o sacarosa: colonias de color blanco rosadas o transparentes rodeadas por un halo rojizo del medio de cultivo

El medio de cultivo agar verde brillante es altamente selectivo para el aislamiento de Salmonella spp, por ello es de suma importancia antes de utilizarlo conocer las caractersticas de crecimiento y sobrevivencia de la salmonella spp, es por ello, al inicio de esta exposicin se presentan dichas caractersticas, una vez que ya conocemos el tipo de microorganismos que queremos identificar, se prepara el medio de cultivo siguiendo las indicaciones del proveedor, es sumamente importante que el pH quede dentro de especificaciones, y de igual manera cuidar el tiempo de esterilizacin y las condiciones de envasado en cajas Petri, y finalmente se deben cuidar que las condiciones de cultivo sean estriles, para poder interpretar con claridad los resultados. Bibliografa: Articulo: Perfil de riesgo Salmonella spp. (no tifoideas) del instituto nacional de salud http://www.iica.int/Esp/regiones/sur/uruguay/Documentos%20de%20la%20Oficina/CursoBPPPA/Literatura/Colombia,%20PERFIL%20DE%20RIESGO%20SALMONELLA%20SPP.p df Salmonelosis no tifoidea y su transmisin a travs de alimentos de origen aviar Catalina Uribe, M.V.1, Martha Cecilia Surez, M.V., M.Sc.2 http://www.scielo.org.co/scielo.php?pid=S1657-95342006000200011&script=sci_arttext Verde brillante agar. Britania http://www.britanialab.com/productos/321_hoja_tecnica_es.pdf UCV. Facultad de farmacia. http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/verdebrillante.pdf