Citologa y morfologa bacteriana

Esquema
Microorganismos, qu son?. Tamao y forma Diferentes formas de organizacin celular Pared (gram +, gram-, Archaea) Membrana. Citoplasma y genoma. Estructuras tpicas:
Fimbrias, pili, flagelo, endoesporas, inclusiones citoplasmticas, cpsula.

Diferencias entre Bacteria, Archaea y Eucarya.

PROCARIOTAS

CLASIFICACIN DE LOS SERES VIVOS

TIPOS CELULARES DOMINIOS* (Woese et al.,1990) TIPOS ORGANISMOS REINOS (Whittaker, 1969) PROCARIOTA 1. BACTERIA :BACTERIAS COMUNES (EUBACTERIAS)1. CIANOBACTERIAS (algas verde-azules) 2. ARCHAEAMICROBIOS EXTREMFILOS** (ARQUEOBACTERIAS): hipertermfilos, psicrfilos, halfilos, acidfilos, alcalinfilos, termoacidfilos, metangenos MONERA

Archaea (Archaebacteria
Clulas Prokariotas. Al contrario de Bacteria y Eukarya, tienen membranas compuestas de cadenas de carbono ramificadas unidas al glicerol por uniones de ter y tienen una pared celular que no contiene peptidoglicano. Mientras que no son sensibles a algunos antibiticos que afectan a las Bacterias, son sensibles a algunos antibiticos que afectan a los Eukarya. Los Archae tienen rRNA y regiones del tRNA claramente diferentes de Bacterias y Eukarya. Viven a menudo en ambientes extremos e incluyen a los metangenos, halfilos extremos, y termoacidfilos.

Bacteria (Eubacteria)
Las Bacterias son clulas Prokariotas. Como los Eukarya, tienen membranas compuestas de cadenas de carbono rectas unidas al glicerol por uniones ster. Tienen una pared celular conteniendo peptidoglicano, son sensibles a los antibiticos antibacterianos tradicionales, y tienen rRNA y regiones del tRNA claramente diferentes de Archaea y Eukarya. Incluyen a mycoplasmas, cyanobacteria, bacterias Gram-positivas, y bacterias Gram-negativas.

Eukarya (Eukaryota)
Los Eukarya (escrito tambin Eucaria) son Eukariotas. Como las Bacterias, tienen membranas compuestas de cadenas de carbono rectas unidas al glicerol por uniones ster. Si tienen pared celular, no contiene ningn peptidoglicano. No son sensibles a los antibiticos antibacterianos tradicionales y tienen rRNA y regiones del tRNA claramente diferente de Bacterias y Archaea. Incluyen a protistas, hongos, plantas, y animales.

TAMAO: clula eucariota versus clula procariota

Tamaos

Formas

FORMA DE LAS BACTERIAS

cocos

bacilos

espirilos

Haloquadra walsbyi

Area de superficie vs. volumen

Tamao pequeo intercambio ms eficiente, permite mayor velocidad metablica

Estructura celular

Pared celular
Bacteria:
Gram positivo Gram negativo Sin pared

Archaea:
Diversas estructuras Sin pared

Funciones de la pared
Rigidez (mantener la forma, evitar la lisis). Comunicacin con el medio exterior. Puede estar involucrada en patogenicidad (LPS: lipopolisacridos) Barrera para algunas molculas. Espacio periplsmico (enzimas de transporte, hidrolticas, etc.)

Formacin de Protoplastos

Baja concentracin de solutos

Alta concentracin de solutos

Lisozima -- protena que rompe el enlace glicosdico 1-4 en el peptidoglicano

Gram +

Bacteria

Gram-

MURENA O PPTIDO-GLICANO
Compuesto qumico caracterstico de bacterias.

Estructura del Peptidoglicano

Pared Celular Gram Positiva

Acidos Teicoicos

Polisacridos cidos de paredes de Gram positivos Unidos covalentemente al peptidoglicano(OH del C6 de NAM)
Atraviesan la pared y alcanzan la superficie de la bacteria Unin hidrofbica a la membrana celular

Otros compuestos qumicos caractersticos de la pared de Gram+

cidos teicurnicos
cidos miclicos

Membrana Externa de Gram Negativos

Porinas - proteinas que permiten el pasaje de molculas pequeas a travs de la membrana -- especficas e inespecficas

Lipopolisacrido (LPS)

Solo en bacterias Gram negativas Parte de la membrana externa

Lipopolisacrido (LPS)
Lpido A (NAG-P + grupos acilos) Ncleo del polisacrido contiene KDO (cetodesoxioctonato) otros carbohidratos (ramnosa, cido galacturnico) usualmente especfico de especies O-antigeno nmero de repeticiones variables tambin contiene carbohidratos especfico de cepa A menudo txico para animales - endotoxina Crea superficies densamente hidroflicas

 Algunas bacterias no poseen pared

Mycoplasma, Chlamydia.
Membrana celular mas gruesa pueden tener esteroles y lipoglicanos. Pleiomrficos

Pared celular de Archaea

No contiene peptidoglicano Puede ser de
pseudopeptidoglicano (pseudomureina) tie G+ pseudomureina cubierta de proteina,tie G+ monocapa superficial de proteina o glicoproteina, sin pseudomureina (alg halfilos, alg.metanognicos y termoacidfilos) tie G-

Existen Archaea sin pared

Funciones de la pared
Rigidez y resistencia osmtica (mantener la forma, evitar la lisis). Comunicacin con el medio exterior. Puede estar involucrada en patogenicidad (LPS) Barrera para algunas molculas (porinas en gram negativos). Espacio periplsmico (enzimas de transporte, hidrolticas, etc.)

Cmo se sintetiza la pared?

Sntesis de Peptidoglicano

Bactoprenol (C55 alcohol isoprenoide) -- carrier lipdico que transporta el disacride pentapeptido del citoplasma al periplasma y lo inserta en la pared celular en crecimiento La transpeptidacin, es inhibida por penicilina

Transpeptidacin

Inhibido por la penicilina G.

Sntesis de peptidoglicano: transpeptidacin Inhibido por la penicilina G.

Sntesis de la pared celular

La pared celular se abre por autolisinas y se deposita nuevo pptidoglicano

La membrana celular
Estructura:
Bicapa fosfolipdica con protenas embebidas; puede contener tambin hopanoides de estructura similar al colesterol. En Archaea, teres de alcohol isoprenoide, algunas forman monocapas.

Estructura de la Membrana Citoplasmtica

Los lpidos en Bacteria y Archaea tienen diferentes enlaces qumicos

Ester - Bacteria Eter - Archea

Funciones de Membrana Citoplasmtica

Barrera de Permeabilidad slo molculas pequeas, sin carga, hidrofbicas, pueden atravesar la membrana por difusin. Ancla de Protenas transporte, generacin de energa, quimiotaxis Generacin de fuerza proton motriz En fototrofas: Intracitoplasmticas, soportan el aparato fotosinttico (Vesculas, tbulos, tipo tilacoides) Sntesis de pared, y estructuras extracelulares.

Membrana citoplasmtica de E. coli

Estructura celular procariota - DNA

No tiene membrana nuclear. El DNA est en el citoplasma: nucleoide : zona que ocupa el DNA. Es haploide. Genoma: una nica molcula de DNA de doble cadena, circular.

El genoma contiene 1 - 6 x 106 pares de bases (bp) en procariotas de vida libre; 1000-5000 genes

No contiene histonas. Puede contener otros elementos genticos no indispensables para la vida: plsmidos y genomas fgicos.

Procariotas
No tienen membrana nuclear.
No hay procesamiento del ARNm La transcripcin est ligada a la traduccin.

Tamao del Genoma

DNA Cromosomal

Citoplasma
Protenas (enzimas, complejos enzimticos, estructurales) Ribosomas (70S (Sverdberg): 55 protenas, rRNA 5S, 16S, 23S)- polisomas mRNA, tRNA Otras macromolculas, solutos Sin estructura visible al microscopio No tienen citoesqueleto.

Estructuras caractersticas
Estructuras con funciones especficas. No todos los microorganismos las tienen. Son caractersticas de gnero y especie (taxonoma) Ejemplos:
fimbrias, flagelo, pili, endoespora, cpsula, inclusiones citoplasmticas

Flagelos
Apndices filamentosos helicoidales. Movilidad bacteriana. Presentes solo en bacilos. Formado por: cuerpo basal, un gancho y un filamento externo (flagelina). Buenos inmungenos. Antgenos flagelares se denominan antgenos H.

 flagelos
Disposicin:
Peritrica, Monotrica, Loftrica y Anfitrica Rotacion:

Rotacin de anillos en el cuerpo basal. Rotacin antihoraria, movimiento hacia adelante:corridas. Rotacin horaria ,cese del movimiento hacia adelante: vueltas Corridas/ Vueltas controladas por quimioatrayentes y repelentes

Fimbrias o pili
Microfibrillas parecidas a pelos que rodean ha algunas Gram (-). Constituidas por el ensamblaje de una protena estructural pilina. Posee propiedades de adhesina. Fimbrias tipo 1, que se adhieren a residuos de manosa.

 Pili sexual
Son mas largos. 2 3 por clula. Se comportan como adhesinas. Intercambio gnico entre bacterias CONJUGACION

Exopolisacridos
Cubierta de naturaleza polisacarida que rodea un bacteria. Sintetizados en MC., atraviesan PC y se establecen afuera. Se clasifican en:
Capsula. Glicocalix.

 Cpsula
Sustancia mucosa o viscosa. Unin firme a las bacterias Rgidas Protegen a las bacterias de la fagocitosis. Factor de virulencia. Poseen los antgenos capsulares k. Debido a estructura fibrilar hidratada, no se tien con tinciones habituales. Tincin negativa o Tinta china.

 Glicocalix
Es Flexible Participa en la formacion de biopeliculas. Forma colonias rodeadas de glicocalix. Protegen de fagocitosis o accion de antimicrobianos.

Espora
Dos gneros: Bacillus sp. y Clostridium sp. Se originan dentro de la clula vegetativa. Se libera por lisis celular. Se produce en condiciones adversas. Forma muy resistente (dipicolinato de calcio y deshidratacin).

 Morfologa
Apariencia birrefringente.
No se tie con colorantes habituales

Esfrico u oval Dimetro: de 0.2 a 2.0 Deformante ( Clostridium ) No deformante ( Bacillus )

Fromacin de esporas

A- el ADN se duplica y enrolla alrededor del eje central (filamento axial) B- Uno de los cromosamas se rodea de membrana plasmtica. C- el protoplasto es rodeado por la clula madre D- se sintetizan las cubiertas de la espora. E- se elimina agua, se forma estructura resistente al calor. F- se libera la espora por lisis de la clula madre. En B. subtilis 6-7 horas, 50 genes.

DIFERENCIAS CEL. VEGETATIVA VS. ENDOSPORAS

Caracterstica
Contenido de Calcio Pequeas protenas solubles en cido Contenido de agua pH citoplasma Actividad enzimtica Metabolismo Resistencia: calor, radiacin, compuestos qumicos Sensibilidad lisozima

Clula vegetativa
bajo ausentes 80-90% 7 elevada elevado baja

Endoespora
alto presentes 10-25% 5.5-6 baja Bajo o ausente elevada

Sensible

Resistente

Inclusiones citoplasmticas
Algunas bacterias tienen estructuras internas grnulos de almacenamiento - polifosfato,azufre, polihidroxibutirato (PHBs) vesculas de gas flotacin Carboxisomas, clorosomas.

Inclusiones citoplasmticas Glicgeno Polihidroxi Butirato

Organismos donde se encuentran Varias bacterias (E. coli) Varias bacterias (Pseudomonas) (Corinebacterium) Fottrofas del S Littrofas del S Bacterias acuticas Algunas bacteris acuticas Bacterias autotrficas Bacterias verdes

Composicin poliglucosa Polmero de dihidroxibutirato

Funcin Reserva de C y energa Reserva de C y energa

Polifosfato
Grnulos de S Vesculas de gas Magnetosomas

Varias bacterias

Polmeros de fosfato
S elemental Estructura proteica Magnetita Fe3O4

Reserva de fosfato
Reserva de S flotacin Orientacin en campo magntico Fijacin de CO2 Captura de la luz

Carboxysomas Chlorosomas

Enzimas fijacin de CO2 Lpidos, protenas bacterioclorofila

Diferencia entre la estructura celular de Bacteria, Archaea y Eucarya

Propiedad Bacteria Eucarya Archaea

Membrana NO SI nuclear Organelos NO SI Tamao 70S 80S ribosoma Peptidoglicano SI NO en la pared Esteroles en NO SI membrana (hopanoides) Lpidos de Ester unidos Ester unido a membrana a glicerol glicerol

NO
NO 70S NO

SI
Eter, ramificados