Prof.

Amanda Fraga

Biofsica
A BIOFSICA o estudo da Matria, Energia, Espao e

Tempo nos Sistemas Biolgicos. A composio, estrutura e funo quantitativa e qualitativa dos fenmenos e compostos orgnicos so mensuradas pelas grandezas fsicas e suas derivadas.

Membrana celular

Modelo do Mosaico Fluido (Singer e Nicolson, 1972)

Composio intra e extracelular

Intracelular Potssio Sdio Magnsio Clcio Cloro Fosfatos Protenas 155 12 15 2 8 90 60 4 145 2 2 110 2 15 Extracelular

Transporte atravs da membrana

Difuso simples
Osmose Transporte mediado por protenas atravs das

membranas

Transporte facilitado (difuso facilitada) Tranporte ativo Primrio Secundrio Co-transporte Contratransporte

Transporte passivo

Transporte ativo

Corrente eltrica
Uma corrente eltrica um fluxo de cargas eltricas. Para que seja mantida uma corrente eltrica num certo meio condutor e necessrio que haja uma ddp, isto , um campo eltrico nesse meio. Num condutor ou numa soluo eletroltica, define-se a intensidade media de corrente eltrica l, atravs de uma rea A, como sendo:

I= Q/ t onde, Q a carga eletrica total que atravessa a rea A durante o intervalo de tempo t.
Movimento ordenado de cargas eltricas, na direo do campo, que constitui a corrente eltrica. A relao entre a densidade de corrente JE e a intensidade do

campo eltrico E :
JE= 1/pE onde, p a resistividade do meio considerado. Sua unidade .m

Propriedades eltricas da membrana

2 vias de passagem de corrente eltrica:
1. 2.

Obdece Lei de Ohm (canais inicos) Natureza capacitiva (dieltrico lipdico)

Rigidez dieltrica ddp entre as

superfcies internas e externas. Campo eltrico

Capacitncia Cm = F/cm2 Resistncia incluso de

protenas Rm = cm2

Eletricidade
Histrico: Luigi Galvani (1760) eletricidade animal Alejandro Volta (1800) primeiro gerador qumico Helmholtz (1850) velocidade de propagao da onda de excitao Bernstein (1868) registro do potencial de injria do nervo lesado Waller (1887,1889) batimentos cardacos Einthoven (1913) galvanmetro de mola, pioneiro do eletrocardiograma
A Bioeletricidade ou Bioeletromagnetismo (algumas vezes tambm chamado de biomagnetismo) refere-se a voltagem esttica de clulas biolgicas e as correntes eltricas que fluem em tecidos vivos, tal como nervos e msculos, em consequncia de potenciais de ao.

Eletricidade animal
Potencial de injria Corrente de injria corrente eltrica entre uma zona lesada e uma

intacta. Diferena de Potencial eltrico fisiolgica (ddp) (-100mV < V < 50mV), em geral, lineares, para meios extra e intracelular de mesma composio Clulas no-excitveis -20mV Nervos e msculos -90mV
Potencial de repouso cl integra gerando uma ddp constante Potencial transmembrana ou potencial de membrana diferena entre meio externo e o interno

Canais inicos
So protenas, encontradas na membrana de

Ilustrao da capa da Nature Insight sobre canais inicos.

praticamente todas as clulas conhecidas, que formam poros ou canais ou carregadores, ligando os meios extra e intracelulares.
Responsveis pelo fluxo rpido e controlador de

ons selecionados atravs da membrana celular.

Vista frontal de um receptor acetilcolino de nicotina, da Torpedo marmorata. Por Nigel Unwin, MRC Laboratory of Molecular Biology.

Poros tneis hidroflicos na bicamada lpdica, de dimetro amplo e esttico. No tem gating Canais razoavelmente hidroflicos atravs das bicamadas lipdicas, formado por protenas, bastante estrita aos ons inorgnicos. Conformaes distintas. Possuem o gating.

Canais inicos
Propriedades: 1 - Conduo inica 2 - Seletividade 3 - Capacidade de abrir e fechar

Propriedades
1 Conduo inica Permitem a passagem de grande quantidade de on em curto intervalo de tempo (at 107 de ons/seg). Elevada condutncia que permite gerar os potenciais de ao.

Propriedades
2 Seletividade Tamanho do componente on-gua Filtro de seletividade Presena de aas polares no interior do canal que permitem a liberao do on das molculas de gua e permitem a passagem do mesmo.

Propriedades
3 Capacidade de abrir e fechar Presena de resting channels Ficam abertos e so importantes para manter o potencial de repouso Canais com comportas Canais ligando-dependentes Canais dependentes de fosforilao Canais voltagem-dependentes Canais mecano-dependentes

Potencial de equilbrio de um on
Energia potencial eletroqumica () = energia potencial eltrica +

energia potencial qumica. = 0 Potencial de equilbrio de um on

Equao de NERNST:
Vs = RT/zF ln [S]1/[S]2

Fluxo inico
O fluxo de on por um canal inico passivo. A fora propulsora e o sentido do fluxo depende da diferena de

concentrao (fora difusional) e do potencial eltrico (fora eltrica), resultando na fora propulsora eletroqumica.
Lei de Ohm:

I = V/Re = GV

G=condutncia Re= resistncia eltrica(em ohms )

Inibio do fluxo inico

Saturao: ligao do on com stio especfico no interior do canal Com [ on] temos um momento que a fora propulsora eletroqumica no poder ser mais aumentada. Inibio por bloqueio do canal

Estado funcional do canal

Perodo refratrio
Inativao: ocorre em alguns canais voltagemdependentes aps a fase de ativao.

Dessensitizao: ocorre por exposio prolongado ao ligando em um canal ligando-dependente

Canal inico
Atividade do canal so chamadas de chaveamento.
Disfunes no chaveamento dos canais so

responsveis por uma srie de doenas clnicas. H 3 formas de chaveamento:

por diferenas de potencial ao longo da membrana; pela ligao de pequenas molculas transmissoras ao canal; por estmulos mecnicos

Potencial de repouso Bomba Na/K

Action Potentials (2).avi

Potencial de repouso da membrana

Atlas de Fisiologia Humana NETTER

Potencial de repouso clula nervosa

Fatores que alteram o potencial de repouso

Diminuio da atividade da bomba Na/K Diminuio da produo de ATP Ao de drogas que alteram a permeabilidade da membrana

Potassium channel openers Potassium channel closers

Potencial de ao

Potencial de Ao

Potencial de ao da cl. nervosa

Sequncias de potenciais de ao ao longo dos axnios nos

circuitos neuronais. Canais dependentes de Ca+2 Resposta do tipo tudo-ou-nada Tipos de Sinapses:

Eltrica primeiros mecanismos sinpticos

Sinapses Qumica mecanismo sinptico mais eficiente resultado da evoluo da sinapse eltrica

 Sinapse Eltrica: ocorre atravs de conexons (protenas conexinas)

que formam gaps (junes) eletronicamente acopladas Assim, as fendas estreitas permitem que o impulso ELTRICO seja transmitido da clula PR-SINPTICA para a clula PSSINTICA.

 Sinapse Qumica: ocorre pela transmisso . de informao da clula

PR-SINPTICA para a clula PS-SINPTICA atravs da ao de MEDIADORES QUMICOS, conhecidos como NEUROTRANSMISSORES

Tipos de Sinapses no SNC:

Diferenciao nas Membranas sinapse tipo I ou assimtrica geralmente excitatrias sinapse tipo II ou simtrica geralmente inibitrias

PEPS (POTENCIAL EXCITATRIO PS-SINPTICO)

PIPS (POTENCIAL INIBITRIO PS-SINPTICO)

Potencial de ao do corao
Contrao = despolarizao. Distole = Repouso Canais lentos de Na e Ca. Longo Plat de despolarizao.

Formas de Potenciais do corao

Tipo A Componente rpido Componente lento Clulas Amplia o potencial de ao No participa Miocrdio Tipo B Pouco desenvolvido Amplia o potencial de ao Cl. de transio Tipo C No apresenta Apresentam Cl. nodais ou cl. Marcapassos Ndulos e anel valvar

Conduo Ventricular Sino-atrial Atrio-ventricular

Potencial de ao do corao

Potencial Cardaco
Fase 0 despolarizao da clula;

canal de Na. Fase 1 rpida, precoce e incompleta de repolarizao; Fase 2 plat, tempo longo de despolarizao e um potencial constante. Canal Cl, Na, Ca. Fase 3 repolarizao, recuperando o potencial de repouso; Canal K. Fase 4 distole eltrica; potencial de membrana constante. Fases lentas de Na, Ca e K.

Tipo B ao das fibras de resposta lenta praticamente no h plat e depois a clula se repolariza.

Tipo C no tem componente rpido. Clulas nodais.

Clulas Marcapassos auto-estimulao do corao, associadas ao

ritmo cardaco; Potencial de ao cel. Marcapassos Cl.NSA, NAV e His-Purkinje, o potencial de repouso no se mantm estvel. H uma despolarizao gradual, fenmeno denominado despolarizao diastlica da fase 4 ou lenta (DDL), o que confere a propriedade de automatismo.

Ritmo cardaco

ECG - Eletrocardiograma
Finalidade

: captar, orientar e traduzir/reproduzir os movimentos inicos no corao. Para o registro do ECG necessrio que se feche o circuito eltrico entre o corao e o eletrocardigrafo.

O traado eltrico a consequncia dos correntes eltricos que se movimentam dentro do corao, e, na medida que essa corrente se aproxima ou se afasta do eletrodo que esta medindo, a deflexo do cursor que marca o ECG pra cima (positivo) ou pra baixo (negativo).

Derivaes
O ECG standard

(padro) se compe de 12 derivaes separadas: DI, DII, DIII (derivaes perifricas bipolares) aVR, aVL e aVF (derivaes perifricas unipolares) V1, V2, V3, V4, V5, V6 (derivaes precordiais)

Eletrofisiologia e farmacologia dos canais inicos

Bombas ativadas pelo ATP

Exoplsmico 2H+ 4H+

V0

F0

A
P
ATP Citoslico ADP 2H+ ATP ADP + Pi

P
ATP ADP + Pi

4H+

P
ADP + Pi V1 F1 ATP

Canais K+
Canais K+

Canais de K+ Retificadores para dentro (Kir)

2 segmentos na membrana,

interligados por um domnio;

Filtro de seletividade; Regulam o potencial de

membrana das clulas musculares vasculares de vrios tipos de artrias e operam quando aumentam as concentraes de K+, H+ e adenosina.
Figura.Fisiologia. Margarida. Dendrograma com as relaes filogenticas para alguns dos canais K. Retificadores para dentro, com 2 segmentos na membrana, e os sensveis a voltagem, com 6 segmentos na membrana. As protenas mais prximas, ao dendrograma, tm mais identidades na sequncia de aminocidos.

 Sete famlias de sub-canais Kir so conhecidos cada partilha de

identidade ~ 60% de aminacidos entre os membros individuais dentro de cada sub-famlia e ~ 40% de identidade entre as subfamlias.

Modulam a excitabilidade celular, estando envolvidas na repolarizao do potencial de ao, estabelecendo o potencial de repouso da clula, e contribuindo para a homeostase do potssio.

Canais de K+ dependentes de voltagem (KV)

6 segmentos na membrana S4 o sensor de voltagem Restabelece a ddp na membrana quando esta despolarizada, como ocorre no potencial de ao.

Canais de K+ dependentes de Ca2+ (KCa2+)

Dependem da voltagem e da

concentrao intracelular de Ca2+

Importantes no controle do tnus

miognico

Figura.Fisiologia. Margarida. Dendrograma com as relaes filogenticas para alguns dos canais K. Retificadores para dentro, com 2 segmentos na membrana, e os sensveis a voltagem, com 6 segmentos na membrana. As protenas mais prximas, ao dendrograma, tm mais identidades na sequncia de aminocidos.

Canais de K+ dependentes de ATPintracelular

O ATP funciona como um bloqueador do canal de K+, no permite a

abertura do canal. A [ATP] intracelular leva abertura prematura do canal de K+ e diminui a durao do potencial de ao, retornando a repolarizao.

Canalopatias
Sndrome De Andersen

Trade clnica que consiste na paralisia peridica sensvel ao potssio, ectopia ventricular e caractersticas dismrficas. Resulta de mutaes do gene KCNJ2 que codifica para canal retificador de sada de potssio Kir2.1. Este o principal canal responsvel pelas caractersticas do potencial de repouso transmembrana (PRT), com importante papel no controle da excitabilidade da fibras do msculo esqueltico e cardaco.

Canais de Na+ dependentes de voltagem (Na+V)

Potencial de ao em clulas excitveis Ativados por despolarizao Processo de inativao

http://www.ff.up.pt/toxicologia/monografias/ano0506/tetrodotoxina/tetrotx_ficheiros/page0007.htm

Canais de Na+ Epiteliais (ENaC)

No dependente de potencial [Na]intracelular modula negativamente o canal. Modulao complexa, interferncia de mltiplos fatores, como

hormonais.
Bloqueador ENaC Amiloride Esta droga tambm presente em formulaes combinadas de diurticos

Canalopatias
Paralisia peridica hipercalemica (HYPP) [V-HYPP]

Defeito congnito dos canais de sdio voltagem-dependentes (Na+V). Sintomas: ataques imprevisveis de paralisia, intermitentes tremores musculares manifestados por contraes e fraqueza muscular localizada ou at mesmo generalizada.

Canais de Ca2+
Ativao de diversos processos metablicos (atividade cardaca,

coagulao do sangue, manuteno das membranas celulares, adeso celular, transmisso de sinais s cl. nervosas, contrao muscular, etc.) e a regulao de funes musculares e nervosas.

Canais de Ca2+
Presente em membranas celulares plasmticas e em membranas de

organelas, como RE e RS estes de cl. musculares. O Ca um sinalizador intracelular, como a liberao de mediador qumico na terminao pr-sinptica, contrao muscular, etc.

Canais de Ca2+ dependentes de voltagem (Ca2+v)

Potenciais de ao Comportamentos distintos de ativao, dividem-no em 2 grandes

grupos: 1. Canais ativados por despolarizao grandes a voltagens prximas a zero. HVA (high voltage-activated). Canais do tipo L (large) vrios tipos celulares. Canais do tipo N SNC, SNP Canais do tipo P/Q de neurnios motores, rim, crebro

Canais de Ca2+ dependentes de voltagem (Ca2+v)

Comportamentos distintos de ativao, dividem-no em 2 grandes

grupos: 2. Canais ativados em valores mais negativos dos potenciais de membrana. LVA (low voltage-activated). Canal do tipo T (tiny) - nas clulas do marcapasso cardaco, no n sinusal, crebro.

Canais de Ca2+ dependentes de receptores de membrana (RIR-Ca2+C)

Receptores rianodnicos (RyRs) - trs tipos de RyRs: RYR1, RYR2 e RYR3
Receptores do IP3 (inositol-1,4,5-trifosfato) Retculo endoplasmtico de

clulas nervosas. Atuam na libertao de clcio das reservas intracelulares Ca2+ (para fora ou sequestrado do RE ou RS ) Ca2+ (citoplasma da clula)

Canais de Ca2+ dependentes de ligandos

Canais de Ca2+ dependentes de nucleotdeos cclicos (CNGs) Canais de Ca2+ dependentes do Ca2+ - ATPases transportadoras de

Ca2+ . ATP2A1, ATP2A2 (2 isoformas), ATP2B1 e ATP2B2.

Trocador Na+-Ca2+ - regulada pelos substratos: PIP2 (fosfatidil-

inositol-4,5-bifosfato) e por fosforilao. Presente no msculo cardaco.

Fisiopatologia dos Canais de Ca2+

Tipo de canal de Ca2+ envolvido Tipo L Tipo P Tipo T Doena resultante paralisia peridica hipocalmica ataxia episdica corrente de Ca2+ em certos neurnios

RyR
ATPase transportadora

hipertermia maligna
miopatia de Brody

Hipertermia Maligna uma doena autossmica dominante com penetrncia incompleta, resultante de uma mutao no cromossoma 19, no gene que codifica o RRy. caracterizada por um estado hipermetablico desacelerado por drogas neurolpticas, lcool, infeces, agentes neuromusculares despolarizantes (succinilcolina, por exemplo) e agentes anestsicos halogenados.

 Epilepsia pode ser oriunda de mutaes em canais inicos: canais de

Na+ (despolarizaes prolongadas e hiperexcitabilidade) e canais de K+ (reduo da repolarizao e prolongamento da despolarizao); Hipersensibilidade dos canais de Ca2+(correntes tipo T); Hiperatividade glutaminrgica (ex. encefalite de Rasmussen); Leso neuronal do hipocampo

Canais de Cl Mais importante nion do meio extracelular Potencial de equilbrio do Cl- prximo da ddp de membrana

Interferem no pH intracelular
Canais poucos seletivos aos nions e so permeveis a vrios,

como NO3-, Br-, I-, HCO3- e Cl-

Representao esquemtica dos canais de Cl-

Canais de Cl- do tipo Cl-(Ca2+)

Sensveis a despolarizao. Em neurnios estabilidade do potencial de membrana. Em epitlios, como a glndula salivar via de secreo do anion

para a luz da glndula.

Canais de Cl- clulas do msculo esqueltico

A distribuio do Cl- entre citoplasma e meio extracelular a de

equilbrio Estabiliza o potencial de repouso Nos potenciais de ao, a condutncia de Cl- contribui para repolarizao.
Inibidores do canal ClZinco Compostos orgnicos da classe dos aromticos monocarboxlicos pH cido niflmico, por exemplo. baixo

Canais de Cl- e regulao do volume celular

Clulas expostas a solues hipotnicas, sofrem inchao Efluxo Cl-, levando a despolarizao de membrana e aumento do

efluxo de K+, perdendo KCl e reduzindo a osmolaridade do compartimento intracelular.

Canalopatias
Fibrose cstica defeito em canal

de ons cloro de clulas epiteliais que no permite a sada desse on. Sintomas: maior acumulao de muco, conduzindo ao aumento do nmero de bactrias e fungos nas vias, o que vai ser muito prejudicial, podendo levar mesmo a uma infeco crnica nos pulmes.

Canalopatias
Miotonia congnita

Reduo na condutncia da membrana ao Cl, que gera hiperexcitabilidade. Descargas eltricas repetitivas e anormais nos msculos. Sintomas: dificuldade de relaxamento da musculatura aps contrao muscular.

Figura 1. Fenotipo de distrofia miotnica. La debilidad de los msculos faciales confiere una expresin caracterstica (facies), parecida a una mscara. Las mejillas se encuentran hundidas, la sonrisa invertida y se presenta ptosis palpebral (cada del prpado).

Figura 2. (A) Miotona en electromiografa (EMG). Se evidencia la lenta relajacin del msculo despus de una contraccin mxima. (B) La miotona se manifiesta como dificultad al abrir la mano (relajacin) luego de una contraccin voluntaria. Lisette Meza G. et al. (2005)

Canais em sinapses purinrgicas

Canais ativados por purinas, como adenosina e ATP. Seletivos para ctions Sinapses excitatrias

Canais de sinapses qumicas ionotrpicas rpidas

Neurotransmissor se liga a um receptor na prpria protena que forma o

canal inico.

Canais colinrgicos nicotnicos

Sinapses do SNC, sinapses dos ganglios perifricos do SN

neurovegetativo e nas membranas das cl. musculares esquelticas. Neurotransmissor acetilcolina Bloqueadores do canal Canal para ctions D-tubocurarina ou Alcaloide de
curare -bungarotoxina curarizantes origem vegetal Veneno de serpentes

Canais glutamatrgicos
Neurotransmissor predominante o glutamato e, s vezes, o aspartato. Sinapses excitatrias do SNC. 2 tipos de receptores para o glutamato: respodem ao N-metil-D-

aspartato (NMDA) e os que no respondem.

Receptores no-NMDA canal para ctions e no discrimina. Receptores NMDA estes canais so 5 vezes mais permeveis ao Ca2+ que ao Na+ ou

ao K+

Canais em sinapses inibitrias GABArgicos e Glicinrgicos

Sinapses inibitrias ionotrpicas rpidas do SNC Neurotransmissor glicina utilizado na medula espinhal Neurotransmissor gama-aminobutrico (GABA) neurnios inibidores

enceflicos. Tipos de canais Cl- tb no so seletivos, alm do Cl-, I-, SCN-, NO3-, BrReceptores GABAA Inibidores picrotoxina bicuculina Potencializadores lcool Barbitricos Benzodiazepinicos Esterides

Referncias bibliogrficas
SALGUEIRO, L. & FERREIRA, J. F. V. G. Introduo a

biofsica. Lisboa: Fundao Calouste Gulbenkian.1991. 515 p. GARCIA, E. A. C. Biofsica. So Paulo: Sarvier. 2000. 387 p.