FUNCIA DE APRARE A SNGELUI

LEUCOCITE

Sunt celule complete Au nucleu i toate celelalte organite

Sunt 5000 pn la 9000/mm3 la om

Au capacitate de a face micri ameboide Se gsesc n saliv, secreiile tubului digestiv i excretor

 n funcie de prezena sau absena n citoplasm a granulaiilor vizibile n microscopia optic: Leucocite granulare = Granulocite a) neutrofile b) eozinofile c) bazofile Leucocite agranulare = Agranulocite a) limfocite b) monocite Leucocitele sunt implicate n mecanismele de aprare celular i imunitar cea mai mare parte a acestor aciuni sunt realizate n afara torentului circulator

GRANULOCITE
Neutrofile aprox. 65% din toate leucocitele 9-12 micrometri; polimorfonucleare = nuclei cu 2-5 lobi interconectai prin benzi fine (cu ct numrul de lobi este mai mic, cu att celula este mai tnr) Granule fine abundente n citoplasm, care nu se coloreaz preferenial nici cu colorani acizi, nici bazici O citoplasma slab violet Circul n snge perioade scurte (9-10 ore)

 Eozinofile cca. 3% din toate leucocitele

10-14 micrometri; Nucleu de obicei bilobat

citoplasma cu granule acidofile mari, ce se coloreaz n rou cu eozin Acidofilie = asocierea de substane bazice din lizozomi cu colorani acizi Eozinofilele au roluri imunologice = fagociteaz complexe antigen-anticorp formate n timpul rspunsului imun
prezente n numr mare n reaciile alergice fagociteaz i distrug stadiile larvare ale viermilor parazii

 Bazofile - 1% din toate leucocitele

8-10 micrometri; Nucleul are de obicei 2 lobi, deseori n form de "S"; Citoplasma prezint granule bazofile albastru-nchis, ce conin heparin i histamin Bazofilia = asocierea substanelor acide din celul cu colorani bazici

Nu au micri ameboide active Activitate fagocitar redus Rspunsul caracteristic este degranularea
Eliberarea de histamin i heparin mediatori inflamatori i anticoagulani

 Monocite Cca. 6% din toate leucocitele Cea mai mare, cu un diametru de 12-15 micrometri; Forma nucleului poate fi reniform pn la potcoav Colorarea e mai uoar dect la limfocite citoplasma fr granule i colorat n albastru cenuiu-pal Monocitele sunt fagocite; Cnd prsesc fluxul sanguin se transform n macrofage tisulare

AGRANULOCITE

AGRANULOCITE
Limfocite cca. 35% la om n snge pot fi observate n trei dimensiuni:
Mici = nuclei deni cu heterocromatin, foarte puin citoplasm Intermediare = nucleu similar, citoplasm mai mult Mari = mai mult citoplasm, eucromatin vezicular mai palid colorat n nucleu, rareori gsite n snge mai ales n ggl. Limfatici

Citoplasma este uor bazofil i nu are granule Exist dou tipuri:

Limfocite B = se difereniaz n mduva spinrii Limfocite T = se difereniaz n timus B - produc anticorpi T autorecunotere, hipersensibilizare, stimularea limfocitelor B

Ambele au mare reactivitate imunologic

Teorii ale Hemopoiezei

Teoria monofiletic (majoritar) = toate elementele figurate ale sngelui evolueaz dintr-o singur celul stem (hemocitoblast) Teoria difiletic = limfocitele i monocitele deriv dintr-o celul stem (limfoblast), granulocitele i hematiile din alt celul stem (mieloblast) Teoria polifiletic = o celul stem separat exist pentru fiecare element figurat

esuturi de origine ale elementelor figurate

ASPECTE COMPARATIVE ALE ESUTURILOR HEMOPOIETICE Organele hemopoietice la vertebrate includ:
Splina Bursa Fabricius (psri) diverticul ce se extinde dorsal de cloaca; produces limfocite B Tiflosolul (peti) Gonadele Ficatul - amfibieni, reptile Rinichi

Mduva osoas apare iniial la anure (amfibieni fr coad broate), implicat numai n producerea de leucocite) De la amniote devine implicat i n producerea de hematii

 Hemocitoblastul = Celula Stem Pluripotenial are capacitatea de a da natere la mai multe linii celulare
Nucleul este nedifereniat (celula arat ca un limfocit mare) cu acumulri dense de cromatin;
Citoplasma este bazofil datorit prezenei ribozomilor; Capabil de proliferare intens prin mitoz Surs de celule sanguine de-a lungul ntregii vei

Celulele Progenitor Restricionate = soarta celulelor progenitoare devine din ce n ce mai restricionat Aceste celule sunt nc relativ nedifereniate i nu prezint caracteristici microscopice care s permit identificarea Proliferarea i diferenierea se afl sub controlul factorilor de reglare specifici fiecrei linii celulare ntr-un sfrit, celulele devin recognoscibile optic i atunci se vor numi precursori

GRANULOPOIEZA
Formarea leucocitelor granulare 1) reducerea n dimensiuni a precursorilor 2) ntunecarea i lobarea nucleului 3) acumularea de granule specifice Diferenierea i maturarea granulocitelor necesit 14 zile sau mai mult

Stadiile granulopoiezei:
1. Mieloblast = relativ mare - 15-21 micrometri; nucleu albastru-rocat palid, 2 nucleoli, citoplasma fr granule 2. Promielocit = mai mare dect mieloblastul (18-30 um; nucleu oval, cromatina condensat; citoplasma albstruie, cu cteva granule azurofile 3. Mielocit = 12-15 um; nucleu oval sau turtid pe o parte, cromatina n grupuri rou nchis 4. Metamielocit =12-15 um; nucleul reniform, cromatina agregat; granule specifice 5. Forma Band = nucleus n form de U; 6. Granulocit matur = celul adult funcional

Dezvoltarea elementelor limfoide

Are loc n esuturile limfoide (timus, ganglionii limfatici, splin) Limfocitele sunt derivate din limfoblati:
Hemocitoblast Limfoblast Prolimfocit Limfocit

Maturarea implic:
1) Condensarea cromatinei 2) Reducerea n dimensiuni

La mamifere, majoritatea limfocitelor apare prin proliferarea pornind de la limfocite deja existente n esutul limfoid

Monocitele
Monocitele se dezvolt de asemeni n mduv
Monoblast Promonocite Monocite

Rmn cteva zile n circulaie apoi trec n esuturi MACROFAGE Se gsesc mai ales n esuturile expuse contaminrii mucoase, epiteliu alveolar, tub digestiv

Limfocitele
Trei tipuri majore de limfocite:
Celulele NK (natural killer ) aparin de sistemul imun nnscut i apr gazda de celulele tumorale i celulele infectate viral. Celulele NK disting celulele infectate i tumorale de cele normale prin alterrile sistemului MHC (major histocompatibility complex) de clasa I. Celulele NK se activeatz ca rspuns la o familie de citokine numite interferoni. Celulele NK activate elibereaz granule citotoxice ce distrug celulele modificate. Au fost numite ucigai naturali datorit faptului c nu necesit o activare preliminar uciderii celulelor cu alterri ale MHC.

 Celulele T i celulele B sunt componenii celulari eseniali ai rspunsului imun adaptativ

Celulele T sunt implicate n imunitatea mediat celular Ca rspuns la agenii patogeni, un subtip de celule T, numite
Celulele T helper produc citokine care direcioneaz rspunsul imun Celulele T citotoxice produc granule toxice care iduc moartea celulelor infectate cu patogeni

Celulele B sunt responsabile pentru imunitatea umoral legat de anticorpi

Celulele B rspund la patogeni prin producerea de mari cantiti de anticorpi, care vor neutraliza obiectele strine denumite generic antigeni Dup activare, celulele B i T las motenire datele asupra antigenilor ntlnii i a anticorpilor care-oi neutralizeaz, dub forma celulelor cu memorie , care sunt responsabile cu fenomenul de imunitate dobndit

Conceptele Aprrii Imunitare

Rezistena Factorii rezistenei sunt prezeni preventiv, naintea infeciei i sunt nespecifici sunt activi n permanen Factorii externi ai rezistenei acioneaz asupra suprafeelor corporale
Fizici
Bariere - piele, mucus, pei nazali Condiii de mediu - uscciune Aciune de splare clipirea pleoapelor, peristaltica, miciunile

Chimici activiti produse de molecule specifice

Sruri - secretate de glandele sudoripare Acizi - pH sczut (HCl din stomac; acid lactic i ali acizi cutanai produi de flora cutanat) Lipide acizii grai secretai de glandele sebacee Enzime lizozimul din secreii, enzime digestive (stomac, intestin subire) Mucus - toxic pentru muli germeni

Celulari activiti realizate de celule

microbiota normal ce intr n competiie cu patogenii pentru siturile de fixare i nutrieni, precum i prin producerea de factori toxici pentru patogeni Fagocitele (macrofagele; leucocitele polimorfonucleare sau or PMN) - fagocitoza

 Factorii interni ai rezistenei - cei care acioneaz n interiorul esuturilor

fizici bariere precum esutul conjunctiv, bariera hematoencefalic chimici activiti produse prin intermediul moleculelor specifice
enzime - lizozime i alte entime sanguine i din alte lichide corporale complementul sistem enzimatic proteic plasmatic activat nespecific de ctre lipopolizaharidele fungice i bacteriene
Declaneaz inflamaia i crete fagocitoza (opsonizare) prin stimularea cuplrii particulelor la fagocite prin intermediul receptorilor Complexul de atac membranar (MAC) distruge virusurile capsidate i aunele bacterii

Factori celulari activiti realizate de ctre celule inflamaia- sistemul de alerta rapid" cu semnele cardinale Fagocitoza procesul de nglobare i distrugere a microbilor adeziune (ataare) - fagocitul i patogenul se cupleaz ingestia (nglobarea) pseudopodele nconjur patogenul, apoi fuzioneaz pentru a forma o vacuol numit fagozom Ucidere i digestie are loc n interiorul fagolizozomilor, care apar prin fuziunea lizozomilor cu fagozomii: Peroxidul de oxigen este folosit pentru distrugerea microbilor Enzimele diger microbii egestia eliminarea de material nedigerabil

Imunitatea
Rspunsul imun este declanat n timpul infeciei de ctre substane sau forme de via strine ce se numesc antigeni, i este specific numai pentru acele tipuri de substane ce l-au generat Imunitatea mediat prin anticorpi (AMI) Rspunsuri anticorpice Anticorpii sunt produi de celulele B activate plasmocite
Fagocitele numite celule prezentatoare de antigens (APC) nglobeaz, proceseaz i prezint moleculele de antigen Limfocitele numite T helper (Th) recunsc (folosind receptori), apoi prolifereaz i se difereniaz pentru a forma o mare populaie de celule TH productoare de citokine Limfocitele numite celule B cupleaz antigenii i citokinele, apoi prolifereaz si se difereniaz pentru a forma o mare populaie de celule productoare de anticorpi - plasmocite Anticorpii se cupleaz specific la antigenii care le-au indus apariia

Funcionarea anticorpilor (AMI) neutralizarea inhibarea toxinelor, infectivitii virale, a caacitii de ataare a microbilor datorit cuplrii pe suprafa a anticorpilor Liza mediat de anticorpi/complement formarea MAC complexul de atac membranar opsonizarea anticorpii i complementul produc agregarea patogenilor Precipitarea complexelor antigenanticorp

 Imunitatea mediat celular (CMI)

Limfocitele T citotoxice (CTLs) sunt activate de celulele T helper n prezena antigenilor virali sau a celulelor infectate de virusuri Fagocitele numite celule prezentatoare de antigeni (APCs) nglobeaz, proceseaz i "prezint moleculele de antigeni pe suprafaa lor Celulele T helper (Th) recunosc antigenii, apoi produc citokine de activare Celulele Tc (precursori CTL) cupleaz antigenii i cupleaz citokinele produse de celulele Th i apoi prolifereaz i formeaz o mare populaie de CTL

i macrofagele sunt activate de celulele T helper

celulele prezentatoare de antigeni (APCs) nglobeaz, proceseaz i "prezint moleculele de antigeni pe suprafaa lor Celulele T helper (Th) recunosc antigenii, apoi produc citokine de activare Macrofagele cupleaz citokinele i se difereniaz pentru a forma macrofage activate

Mecanisme de aciune ale CMI

CTL ucid celulele int prin distrugerea membranelor (necroz) sau prin inducerea apoptozei Macrofagele activate fagociteaz bacteriile i fungii mult mai eficient dect PMN, prin fenomene de starvare

Celula potrivit la locul potrivit

Generarea unui rspuns imun eficient necesit activarea sistemelor imune Procesele trebuie s aib loc la nivelul leziunii i nu n alt parte Activarea limfocitelor are loc n ganglionii limfatici Limfocitele activate trebuie s migreze la locul infeciei Pentru ca celulele imune s treac din sngele circulant n esuturi
Ggl. Limfatic, esut normal sau inflamat Trebuie s treac prin bariera endotelial Fenomenul se numete migrare transendotelial

Migrarea celulelor prin endoteliu este numit migraie transendotelial. Acesta este un proces cu mai multe etape:-

- rulare-ancorare - declanare - cuplare ferm - extravazare

Diapedeza
1. Cuplarea reversibil a leucocitelor pe endoteliul vascular
a. b. Se face prin intermediul selectinelor endoteliale ce se prind de polizaharidele de pe leucocite Interaciunea nu e suficient de puternic, astfel c se produce rularea Duce la activarea integrinelor, care fixeaz leucocitele Leucocitele acoper o zon a peretelui vascular, fenomen numit pavimentare

2.

Amorsarea leucocitelor chemokinele se cupleaz pe receptorii de leucocite

a. b.

3.

Dup adeziune celulele migreaz prin endoteliu extravazare

Chemokinele sunt un grup de citokine chemotactice implicate ntr-o mulime de procese fiziologice . Chemokinele se leag la receptori specifici, de tip serpentin, cuplai cu proteine G

Inflamaia i Reparaia
Inflamaia acut = durat scurt, minute pn la ore, predomin neutrofilele, prezint exsudat proteic. Inflamaia cronic = durat de ani, infiltrat mai ales limfocitic i macrofagic, mai puine neutrofile. Procesele inflamatorii acute duc la : vasodilataie (roea - rubor) Creterea metabolismului local duce la cldura local calor permeabilitate vascular crescut (edem-tumor) Stimularea terminaiilor nervoase libere de ctre mediatorii inflamatori (durere-dolor) Impotena funcional (functio laesa) depinde de dimensiunile i durata inflamaiei.

 Vasodilataia apare precoce i este considerat a fi primul rspuns produce roea i cldur local. Modificarea presiunii hidrostatice normale duce la apariia transsudatului, ce va produce edemul. Principalii mediatori sunt histamina i leucotrienele. Celulele endoteliale se contract pentru a permite extravazarea leucocitelor, apare numai la nivelul venulelor.

Retracia joncional mrete fenestrele capilare n rspuns la citokine, ncepe la 4-6 ore dup leziune i dureaz mai mult de 24 de ore. Creterea transcitozei se datoreaz creterii numlului de canale i transportori la nivelul celulelor endoteliale i apare ca rspuns la VEGF.

Cytokinele: mediatori chimici produi de limfocitele activate i de macrofagele cu aciune local IL-1 produs de macrofagele activate ca rspuns la leziuni; activeaz celulele endoteliale, producnd apariia de receptori pe suprafa. mpreun cu IL-6 produce fbra i starea de ru. IFN (interferon), produs de celulele T, produce semne sistemice de febr i stare de ru. IFN-gamma activeaz macrofagele. TNF (tumor necrosis factor) este produs de macrofagele activate (alpha) i celulele T (beta). Activeaz CE i duce la febr, beutrofilie i sintez de NO. Induce proliferarea fibroblastelor. TGF-beta (transforming growth factor) produs de macrofage, celule T, endoteliu i acioneaz ca inhibitor al creterii celulelor epiteliale. Stimuleaz producia de colagen i este mai important n inflamaia cronic nsoit de fibroz.

MEDIATORII INFLAMAIEI
Principii generale : mediatorii solubili se gsesc n plasm sub form de precursori, care se vor activa. Mediatorii celulari se gsesc n granule i sunt eliberai de obicei de mastocite, plachete, neutrofile sau monocite. Histamina: produce dilataie arteriolar i crete permeabilitatea vascular prin receptorii H1. Serotonina: are efecte similare cu histamina, eliberat de plachete; stimuleaz receptorii pentru durere. Prostaglandinele: Sintetizated din acid arahidonic pe calea ciclooxigenazei n leucocite, plachete i celule endoteliale
PGI2 inhibitor a agregrii plachetare i vasodilatator. TXA2 are efecte contrare lui PGI2, promoveaz agregarea i vasoconstricia. PGD2, PGE2 i PGF2 sunt vasodilatatori.

 Leucotrienele: sunt sintetizate din acid arahidonic n leucocite pe calea lipo-oxygenazei. LTB4 pentru chemotaxia neutrofilelor. LTC4, LTD4, i LTE4 produc vasoconstricie, bronhospasm i cresc permeabilitatea. Lipoxinele sunt noi descoperiri n domeniul produilor derivai din AA. Oxidul Nitric (NO): Sintetizat de macrofage i celulele endoteliale, are via foarte scurt, este neuromediator i vasodilatator Factorul de Activare Plachetar - Platelet Activating Factor (PAF) este produs de majoritatea celulelor inflamatorii
Produce vasoconstricie i bronhoconstricie Fumul de tutun induce PAF i astfel cauzeaz inflamaia cilor aeriene.

Bradikinina produce durere, vasodilataie i crete permeabilitatea vascular. Kallikreina enzim eliberatoare a tuturor factorilor din sistemul kininergic proinflamator.

Imunitatea Mediat Celular

Cel de-al doilea bra al rspunsului imun este cel numit Imunitatea Mediat Celular (CMIR - Cell Mediated Immunity). Efectorii sunt diverse tipuri de celule. Funciile includ fagocitoza i distrugerea patogenilor intracelulari
Ucidere celular direct de ctre celulele T citotoxice Ucidere celular direct de ctre celulele NK i K

Rspunsurile de acest tip sunt ndreptate ctre distrugerea bacteriilor intracelulare, a infeciilor virale i a celulelor tumorale (Citotoxicitate Mediat Celular).

Dou celule NK atacnd o celul tumoral

Bacterii intracelulare
n general rspunsul imun mediat umoral (anticorpii) poate fi eficient n eliminarea multor patogeni Totui, bacteriile au evoluat , putnd intra i multiplica n celulele fagocitare
Microorganismele necapsulate sunt uor fagocitate i distruse de neutrofile Microorganismele capsulate necesit anticorpi pentru a fi fagocitate eficient Exist totui o serie de bacterii capsulate care rezist fagocitozei i pn la urm distrug fagocitul i i continu ciclul vital n alt localizare

Pentru a se evita aceast situaie, exist rspunsurile de activare citotoxic ale macrofagelor, celulelor NK i K

Limfocite T Citotoxice (CTL)

Infecia viral sau transformarea tumoral a unor celule modific sistemul MHC al celulei respective Celula devine non-self, i este atacat de CTL, care o programeaz pentru autodistrugere CTL elibereaz o substan numit perforin n spaiul deintre CTL i int n prezena calciului, perforina polimerizeaz, formnd canale n membrana celulei-int, care vor produce liza celulei.

 Celulele NK sunt un grup numit limfocite granulare mari 5-16% din populaia total de limfocite. Spre deosebire de CTL, cu care sunt nrudite ndeaproape, ele atac celulele care nu exprim MHC. Sunt specifice pentru distrugerea celulelor tumorale, infectate cu virusuri, bacterii sau protozoare Uciderea se realizeaz prin mecanisme similare cu CTL perforine Celulele K Sunt celule de tip NK, cu funcii separate Ele coniin receptori pentru Fc i sunt implicate ntr-un proces numit Citotoxicitate mediat Celular dependent de anticorpi (ADCC - Antibody-dependent Cell-mediated Cytotoxicity ).

SISTEMUL COMPLEMENT
Un sistem proteic sintetizat de ficat i circulant n plasm sub form inactiv, crui funcie, pe lng altele, este de a distruge bacteriile, prin oc osmotic Prezint de asemeni i proteine de reglare, care le inhib riscul de activare inadecvat Unele celule prezint recptori pentru complement, care ofer o serie de funcii celulare acestui sistem Exist dou cai de activare a acestui sistem: Calea clasic Calea altern

CALEA CLASSIC:
Molecule de tip IgM sau IgG se leag de suprafaa microorganismelor Proteinele complement recunosc i se cupleaz pe anticorpi (Fc). O serie de proteine se cupleaz pe complexele imune (C1, C2, C4), ducnd la apariia activitii convertazei C3

CALEA ALTERN:
Unele proteine ale sistemului complement pot recunoate i activa direct unele structuri polizaharidice de pe suprafaa unor microorganisme, cu activare direct, fr anticorpi

Formarea complexului de atac membranar (MAC)

Odat ce sunt create convertazele C3 )pe calea clasic sau altern), apr o serie de cascade enzimatice, care duc la apariia Complexului de atac membranar (MAC)
Cuplarea secvenial a proteinelor C'6 (proteina complement 6), C'7 i C'8 la suprafaa celulei strine Acest complex va induce polimerizarea de multiple molecule C9. Aceste proteine se vor auto/asambla ]n membrana plasmatic i vor forma un por Aceti pori vor permite intrarea apei i srurilor n celul , producnd oc osmotic

Sistemul reticuloendotelial (RES)

Este o parte a sistemului imun, alctuit din
Celule fagocitare localizate n esutul conjunctiv reticular Mai ales monocite-macrofage, care se acumuleaz n nodulii limfatici i splin Celulele Kupffer din ficat Histiocitele tisulare

Celulele RES funcioneaz la nivelul organelor limfoide periferice

Nodulii limfatici, splina "MALT" (mucosa-associated lymphoid tissue).

MALT se mparte n
"GALT" (gut-associated lymphoid tissue) "BALT" (bronchus-associated lymphoid tissue).

Celulele dendritice (CD)

Sunt celule prezentatoare de antigen specializate se gsesc n piele, timus i ggl limfatici Form neregulat, multe pseudopode Fagociteaz i proceseaz antigenii Migreaz prin esuturi Interacioneaz cu celulele T, le stimuleaz i le direcioneaz rspunsurile Includ celulele Langerhans (piele), CD derivate din monocite i CD derivate din limfocite