Gliclise

Prof. Ms Caio Victor Coutinho de Oliveira

Objetivos
Entender a importncia da Gliclise para os seres vivos
Analisar as principais etapas metablicas da gliclise Analisar as principais etapas metablicas da gliclise

Conceitos
Metabolismo: processo geral no qual os sistemas vivos adquirem e utilizam energia livre para realizarem funes Catabolismo ou degradao: processo pelo qual os nutrientes e os constituintes celulares so degradados para o aproveitamento de seus componentes e/ou para gerao de energia

Anabolismo ou biossntese: processo pelo qual as biomolculas so sintetizadas a partir de componentes mais simples

Mas como que os organismos obtm essas fontes de nutrientes para obteno de energia?

Conceitos
Autotrficos: organismos que podem sintetizar os seus constituintes celulares a partir de molculas simples como CO2 e H2O.

Conceitos
Heterotrficos: organismos que obtm a energia livre atravs da oxidao de compostos orgnicos, sendo ento dependentes dos organismos autotrficos para tal.

Energia
ATP (Adenosina trifosfato): Moeda energtica da clula. Composto por: 1 Adenosina (adenina + ribose) 2- Trs grupamentos fosfato (-PO-23 )

Energia
ATP ADP AMP

Energia
Glicose: nica fonte energtica de especializadas e a principal pelo crebro. clulas Importncia da garantia do suprimento contnuo de glicose. Defeitos no metabolismo da Glicose obesidade e diabetes que leva a hipertenso, aterosclerose e doenas vasculares.

Origem
Quebra de polissacardeos
1) Glicognio heptico e muscular

Origem
2) Dieta

Origem
3) Sntese a partir de precursores no glicdicos

Neoglicognese

Transportadores
Intestino: SGLT Eritrcitos: GLUT-1 Crebro: GLUT-3 insulinaindependente Cls musculares e tecido adiposo: GLUT-4 insulinadependente Hepatcitos: GLUT-2 insulinaindependente

Pauli et al., 2009

Transportadores

Destinos

Gliclise

Por que iniciar o estudo do metabolismo dos compostos combustveis pela gliclise?

Gliclise
Via metablica universal (passos idnticos nas nossas clulas

cerebrais e nas bactrias anaerbicas) para metabolizar a

glicose e produzir energia Permite introduzir os mecanismos de regulao das vias metablicas por pequenos efetores lotricos, por

modificaes qumicas reversveis de enzimas e pelo controle da expresso genica.

Gliclise
Primeira via metablica a ser elucidada e, provavelmente, a melhor compreendida Ocorre no citoplasma Primeiro estgio do catabolismo de carboidratos

Acares simples so metabolizados a piruvato

Processo anaerbico no necessita de oxignio

Gliclise

100m 42 km

Gliclise
Principal via metablica para produo de energia (grego, glycus, doce + lysis, romper). Sequncia de 10 reaes enzimticas, que ocorre no citosol, nas quais uma molcula de glicose convertida em duas molculas de 3 carbonos (piruvato), com produo lquida de 2 molculas de ATP

Glicose
Principal carboidrato combustvel; forma de carboidrato circulante no sangue Finamente regulado: manuteno de uma concentrao normal de 5 mmol/L e essencial para sobrevivncia < 2,5 mmol/L coma hipoglicmico
> 7 mmol/L diabetes e riscos de doenas renais, vasculares e oculares.

Gliclise
1 glicose (6C)
ADP ATP

NAD

NADH 2 piruvatos (3C)

Gliclise
Gliclise Aerbica:
Glicose 2 piruvato + ATP

Gliclise Anaerbica:
Glicose

2 Acetil-coA + 2 CO2
Ciclo de Krebs Cadeia respiratria Fosforilao oxidativa (ATP) CO2 e H2O Total de ATP = 38

2 piruvato + ATP

Fermentao ltica alcolica (Lactato)

Fermentao
(Etanol)

Total de ATP = 2

Fases
1 Fase de investimento: fosforilao da glicose e quebra em triose fosfato

Investimento
Aumenta o contedo intermedirios de energia livre dos Requer o investimento de duas molculas de ATP e resulta na clivagem da cadeia de hexose em duas trioses fosfato Ocorrem duas reaes de fosforilao, pois os compostos fosforilados (como o so todos os intermedirios da gliclise) no atravessam as membranas livremente

Fases
2 Fase de produo de energia: converso oxidativa de gliceraldedo-3-P a piruvato com formao acoplada de ATP e NADH

Produo
Produo de 4 molculas de ATP (ganho lquido de 2 ATP) Recuperao do investimento tem mais de 60% de eficincia

Ocorrem duas reaes de fosforilao em nvel de substrato, assim denominadas porque a reao transfere no s energia livre ao ADP, mas tambm o prprio fosfato necessrio sntese de 1ATP

Produo
importante notar que apenas 5,2% da energia de oxidao da glicose foram liberados ao fim da gliclise, permanecendo todo o restante na forma de piruvato

So formados dois NADH

1) Fosforilao da glicose

2) Converso de Glicose6-fosfato a Frutose-6fosfato

3) Converso de Frutose6-P a Frutose-1,6-bifosfato

4) Clivagem da Frutose-1,6-bifosfato

5) Inter converso da Triose fosfato

6) Oxidao da Gliceraldedo-3-fosfato a 1,3-Bifosfoglicerato

7) Transferncia de um grupamento fosfato do 1,3-Bifosfoglicerato para o ADP

Fosforilao em nvel de substrato

8) Converso do 3Fosfoglicerato a 2Fosfoglicerato

9) Desidratao do 2Fosfoglicerato a Fosfoenolpiruvato

10) Transferncia de um grupamento fosfato do Fosfoenolpiruvato para o ADP

Fosforilao em nvel de substrato

Equao geral

Produtos da Gliclise
1 - ATP: Fase de investimento com a utilizao de 2 ATP e fase
de produo com formao de 4 ATP Saldo lquido 2 ATP/glicose.

2 - NADH: Reduo de 2 NAD+ a 2 NADH. Em aerobiose, so

oxidados na cadeia transportadora de eltrons e em anaerobiose so oxidados na fermentao

3 Piruvato: Produo de 2 molculas. Em aerobiose

oxidado a Acetil-CoA e vai para o Ciclo de Krebs. Em anaerobiose, sofre fermentao ltica ou alcolica.

 Importncia dos intermedirios fosforilados: 1- Ionizados em pH 7 carga lquida negativa. A MP impermevel a molculas carregadas, assim os intermedirios no se difundem; 2- Componentes essenciais na conservao da energia metablica (reao enzimtica). Ex: Gli-6-P, 1,3-BPG e PEP Formao da ligao - energia parcialmente conservada na formao de steres.
ATP ADP

Glicose

Hexocinase

Glicose-6-P

Quebra de ligaes produo de intermedirios de alta energia Sntese de ATP.

ADP ATP

PEP

Piruvato cinase

Piruvato + ATP

Destinos do Piruvato

Fermentao Ltica
O piruvato reduzido a lactato, reoxidando uma molcula de NADH em NAD+ Ocorrncia: eritrcitos e em clulas musculares quando h baixa [O2] e alta demanda de ATP

Lactato
LDH Piruvato NADH NAD Lactato
Regenerao do NAD

Para o funcionamento da via glicoltica, necessrio que o NAD esteja na sua forma oxidada (para poder sequestrar ons H+ e doar ao O2 na Cadeia Transportadora de eltrons)

Fermentao Ltica
- Enzima: Lactato desidrogenase (LDH), sendo esta reao altamente reversvel
Lembrando que:

Ausncia ou baixa concentrao de oxignio:

Equao resumida:

Hemcias
Dependem exclusivamente da Gliclise para gerar ATP No possuem mitocndrias Mesmo na presena de oxignio faz fermentao ltica Ausncia de PK No forma piruvato - no faz fermentao ltica (no reoxida o NADH) Ausncia PK e/ou lactato desidrogenase: Gliclise cessa por falta de NAD+ (oxidado) Falta de ATP = MORTE CELULAR

Acidose Lctica
Ex: Gliclise anaerbica no msculo (intensa atividade) Baixa [O2] Gliclise anaerbica cido ltico Clulas contm simporte (sada) para lactato e ons H+ para evitar baixo pH intracelular (defesa) Liberao na corrente sangunea - pH sanguneo Superproduo e/ou subutilizao de lactato: pH sanguneo e na [bicarbonato] oxigenao - ATP, PFK-1 = lactato com da sua utilizao

Fermentao Alcolica
O piruvato convertido a etanol e CO2. Ocorre em leveduras. Produo de pes e bebidas alcolicas.

Fermentao Alcolica
Duas reaes consecutivas: 1- A enzima piruvato-descarboxilase que converte piruvato a acetaldedo; 2- Reduo do acetaldedo a etanol pelo NADH catalisada pela lcool desidrogenase.

Enzimas regulveis da via Glicoltica

Hexocinase (HK) Fosfofrutocinase-1 (PFK-1) Piruvato cinase (PK)
- Hexocinase X Glicocinase (afinidade pelo substrato x funo)
Hexocinase - Alta afinidade a glicose e inibio pela glicose-6fosfato. Glicocinase clulas do parnquima heptico. Baixa afinidade a glicose. Inibida pela frutose-6-fosfato e ativada por frutose-1fosfato.

Fgado tem capacidade de tamponamento dos nveis de glicose sangunea (elevada ou baixa)

Glicoquinase
Equilbrio da glicose no sangue
[glicose] sangue captao pelo fgado (rpido atravs da MP heptica j que [glicose] no fgado = sangunea) na fosforilao de glicose intracelular A glicose fosforilada fica mantida dentro da clula. A glicoquinase tem atividade oposta da glicose-6-P

Glicose-6-fosfatase
- Diminuio da [Glicose] sangue
Pi

No fgado : Glicose-6-P

Glicose-6fosfatase

Glicose + Pi

- Diminui a [Glicose-6-P] intracelular e mantm o pool de Pi na clula - Sada da glicose defosforilada para o sangue

Fosfofrutocinase-1

ATP

ADP

Frutose-6-P
AMP ADP Fru-2,6-BP

Frutose-1,6-BP PFK-1
Citrato ATP pH

- Ponto chave de regulao da Gliclise Reao irreversvel

PFK-1 - Fatores que interferem na velocidade da gliclise:

1) Estado energtico de clula; 2) pH intracelular 3) Disponibilidade de compostos alternativos como cidos graxos e corpos cetnicos 4) Relao sangunea de insulina/glucagon

Formas de regulao enzimtica

1) Concentrao do substrato 2) Alosteria

3) Fosforilao (hormonal)
4) Ativao da expresso gnica

Regulao da gliclise
Hexocinase concentrao do substrato, expresso gnica

PFK-1 concentrao expresso gnica PFK-2 fosforilao

do

substrato,

alosteria,

PK concentrao do substrato, alosteria, fosforilao, expresso gnica

Pergunta desafio:

- A concentrao de glicose no plasma sanguneo humano mantida em torno de 5mM. A concentrao de glicose livre no interior das clulas muito menor. a) Por que a concentrao to baixa no interior da clula? b) O que acontece com a glicose quando esta entra na clula?