C I T O L O G I E

A N I M A L
01.10.2013 18.11.2013
Conf. dr. Marina Nechifor
CITOLOGIE ANIMAL
Celula animal
1 oct. 18 noiembrie 2013
CITOLOGIE VEGETAL
Celula vegetal
19 noiembrie 2013 21 ianuarie 2014
BIBLIOGRAFIE
Alberts B., J ohnson A., Lewis J ., Raff M., Roberts K., Walter P.
(2008) MOLECULAR BIOLOGY OF THE CELL, ediia a V-a, Editura
Garland Science (New York & London).
Lodish H., Berk A., Kaiser C.A., Krieger M., Scott M., Bretscher A.,
Ploegh H., Matsudaira P. (2007) MOLECULAR CELL BIOLOGY,
ediia a VI-a, Editura W.H. Freeman & Company (New York).

Alberts B., Bray D., Lewis J ., Raff M., Roberts K., Watson J .D.
(1994) MOLECULAR BIOLOGY OF THE CELL, ediia a III-a, Editura
Garland Science (New York & London).
Lodish H., Berk A., Zipursky S.L., Matsudaira P., Baltimore D.,
Darnell J . (2000) MOLECULAR CELL BIOLOGY, editia a IV-a,
Editura W.H. Freeman & Co (New York).
Cruce M. (1999) BIOLOGIE CELULAR I MOLECULAR, Editura
AIUS (Craiova), Colecia Hipocrate.
Nechifor M.T. (2002) BIOLOGIE I PATOLOGIE CELULAR (Vol.1)
Editura Ars Docendi, Bucureti.

Alberts B., J ohnson A., Lewis J .,
Raff M., Roberts K., Walter P.
(2008) MOLECULAR BIOLOGY
OF THE CELL, ediia a V-a,
Editura Garland Science
(New York & London).

Teoria Celular
Toate organismele vii sunt alctuite din celule
Celula reprezint unitatea morfologic i
funcional a lumii vii.
Celulele se formeaz prin diviziunea unor celule
preexistente; generarea spontan a celulelor nu
este posibil.
Celulele pstreaz informaia ereditar; acesta
este transmis celulelor fiice ce se formeaz n
urma diviziunii celulare.
ORIGINEA I EVOLUIA CELULELOR

n prezent este unanim acceptat ideea c unitatea morfologic i
funcional a lumii vii este celula. Dar cum a aprut prima celul
i cum se poate explica diversitatea celulelor actuale, evoluate ?
Se presupune c toate tipurile de celule ale organismelor vii au evoluat dintr-un
strmo comun cu organizare precelular.
Primele organisme vii au aprut n urm cu 3,5-3,8 miliarde de ani
(aproximativ dup 1 miliard de ani de la formarea Pmntului).

Evenimentele majore
ale apariiei i evoluiei
celulelor
ETAPA PRECELULAR

Atmosfera Pmntului primitiv a oferit condiii pentru formarea
spontan a moleculelor organice (aminoacizi, glucide simple, uree,
acizi grai i alte molecule cu importan biologic), ce au reprezentat
materialul de baz pentru formarea organismelor vii.

Etapa urmtoare a evoluiei a constituit-o formarea macromoleculelor,
prin asamblarea spontan, n condiii prebiotice, a unitilor de baz
reprezentate de aminoacizi, nucleotide, glucide.

Aminoacizi Lanuri polipeptidice (PROTEINE)
Nucleotide Lanuri polinucleotidice (ACIZI NUCLEICI)










Secven polinucleotidic
dublu catenar (ADN)
Secvene polipeptidice
(proteine)
Originea vieii: Formarea spontan a moleculelor organice
1920 Aleksander Oparin i John Haldane
1953 Stanley Miller i Harold Urey: sinteza de compui organici
din precursori anorganici
Instalaia utilizat
pentru experimentul
lui Stanley i Urey
Diagrama instalaiei folosite de Stanley i Urey
Formarea macromoleculelor
Lumea ARN-ului
Un moment hotrtor n apariia sistemelor vii l-a reprezentat apariia
nsuirii de autoreproducere. Numai macromoleculele capabile de a-i
dirija propria sintez, care s duc la formarea mai multor molecule de
acelai tip au avut importan pentru evoluia ulterioar.

Dintre macromoleculele existente n mediul prebiotic (acizi nucleici i
proteine) doar acizii nucleici, respectiv doar acidul ribonucleic (ARN),
a avut capacitatea s-i dirijeze propria replicare.

Acidul ribonucleic a constituit macromolecula esenial pentru formarea
primelor celule. Acest stadiu al evoluiei celulare a fost numit lumea
ARN-ului (concept elaborat de Walter Gilbert n 1986).

ARN-ul a precedat ADN-ul pe parcursul evoluiei.

CELULA PRIMITIV

Prin asamblarea spontan a lipidelor din mediul apos s-au format
sisteme membranare capabil s delimiteze ARN-ul cu proprieti
de autoreplicare i o serie de molecule asociate, rezultnd celula
primitiv.







Pe msura evoluiei, funciile ndeplinite de ARN au fost preluate de
ADN (informaia genetic este mai bine stocat i stabilizat n
moleculele de ADN dublu catenare). Ulterior proteinele au devenit
catalizatorii cei mai importani, iar ARN-ul funcioneaz n prezent ca
element de legtur ntre ADN i proteine
ADN ARN Proteine

CELULA ACTUAL
n prezent este acceptat ideea ca celulele actuale au evoluat
dintr-o celul ancestral comun numit PROGENOT (entitate
cvasi-celular).

n cursul evoluiei s-au difereniat trei linii celulare distincte:
ARCHAEBACTERII, EUBACTERII i EUCARIOTE.

Aceste trei linii celulare au fost ncadrate n dou tipuri
principale de celule:

Procariote (PK) - pro=nainte, karyon=miez, nucleu; limba greac
Eucariote (EK) - eu=adevrat, karyon=miez, smbure; limba greac

Celula ancestral (progenot) i diferenierea celor trei linii
celulare: archaebacterii, eubacterii i eucariote.
Diferenierea celor trei linii celulare: archaebacterii, eubacterii i
eucariote. Arhaebacteriiile i eucariotele sunt grupuri nrudite filogenetic.
ntre celulele procariote i eucariote exist deosebiri eseniale n ceea ce
privete organizarea lor morfologic i funcional, dar exist i o serie de
asemnri care atest evoluia lor din aceeai celul ancestral.

Toate cele trei linii celulare au avut un strmo comun, i prin urmare
celulele procariote nu sunt strmoi ai celulelor eucariote.

PROCARIOTELE sunt cele mai simple forme celulare de organizare a
vieii. Din aceast categorie fac parte archaebacteriile i eubacteriile.
Procariotele nu au nucleu delimitat de sisteme membranare, ci un
corp nucleoid reprezentat de ADN, neconjugat cu proteine bazice i care
este ataat de membrana celular.
Citoplasma este lipsit de organite delimitate de endomembrane, dar
prezint ribosomi liberi.
Membrana plasmatic este dublat la exterior de o membran
protectoare.
Principalele caracteristici ale procariotelor sunt capacitatea de a
prolifera rapid i de a se adapta relativ uor la variaiile condiiilor de
mediu.
Reprezentarea schematic a celulei procariote.
PROCARIOTE:
Archaebacteriile sunt reprezentate de bacterii ce triesc n
condiii de mediu extreme (de ex. n ape termale, zona arctic).
Din acest grup fac parte bacteriile sulfuroase, bacteriile halofile i
bacteriile metanogene.
Condiiile de mediu extreme sunt neobinuite n zilele noastre, dar
ele au fost specifice momentului apariiei vieii pe Pmnt.
Un exemplu de archaebacterii l reprezint bacteriile termoacidofile
care triesc n izvoare sulfuroase calde cu temperaturi de peste 80
o
C
i cu valori ale pH-ului extrem de acide (<2).
Eubacteriile (bacteriile adevrate) sunt reprezentate de forme
comune ale bacteriilor actuale. Ele sunt foarte numeroase i triesc
ntr-o mare diversitate de medii: ap, aer, sol, alte organisme (de
exemplu bacteriile patogene). Bacteriile au fost mprite n 2 grupe
n funcie de structura peretelui celular i coloraia Gram.
Coloraia Gram
Bacterii Gram-pozitive
Staphylococcus aureus
Bacterii Gram-negative
Escherichia coli
Christian Gram
(1853-1938)
Majoritatea celulelor bacteriene au form sferic, de
bastona sau de spiral.
Ca model de structur pentru celulele procariote poate fi prezentat
Escherichia coli, bacterie ntlnit n tractusul intestinal uman.
Escherichia coli este o celul n form de bastona cu o lungime de 2 m i
diametrul de 1 m.
Asemntor majoritii procariotelor, E.coli este nconjurat de un perete
celular rigid alctuit din polizaharide i peptide.
Sub peretele celular se afl membrana plasmatic reprezentat de un bistrat
lipidic n care sunt integrate proteinele membranare.
Citoplasma conine genomul celular (ADN circular condensat sub form de
nucleoid), ribozomi i diferite incluziuni.
Procariotele pot avea ADN extracromozomal (elemente denumite plasmide)
EUCARIOTELE au o organizare celular complex: prezint un
nucleu adevrat, numeroase organite citoplasmatice i citoschelet.
Eucariotele au aprut n urm cu 2 miliarde de ani. Celulele eucariote
sunt caracteristice plantelor i animalelor. In cadrul eucariotelor sunt
incluse i o serie de organisme unicelulare: alge, protozoare, ciuperci,
drojdii.
Figura 3. Reprezentarea schematic a celulei eucariote:
1 nucleol, 2 nucleu, 3 ribosom, 4 vezicul, 5 reticul endoplasmic rugos,
6 aparat Golgi, 7 citoschelet, 8 reticul endoplasmic neted, 9- mitocondrii,
10 vacuol, 11 citosol, 12 lizozom, 13 centrioli.
Organizarea structural a celulei EK
Celulele eucariote sunt nconjurate de membrana plasmatic.
Spre deosebire de procariote, celulele eucariote prezint numeroase
membrane intracelulare (endomembrane) ce formeaz structuri
specializate denumite organite celulare: nucleu, mitocondrii, aparat
Golgi, reticul endoplasmic, lizosomi, peroxizomi, cloroplaste (la plante).
Cel mai mare organit al celulelor eucariote este nucleul, cu un
diametru de aproximativ 5 m.
Compartimentalizarea mediului intracelular prin endomembrane
permite celulelor eucariote s funcioneze mult mai eficient comparativ
cu procariotele. De exemplu, mitocondriile i cloroplastele joac un
rol fundamental n cadrul metabolismului energetic al celulei.
Dac se ndeprteaz membrana plasmatic i organitele, din celul
rmne citosolul. Citosolul are consistena unui gel i reprezint locul
de desfurare a numeroase reacii metabolice.
Asemnri privind organizarea structural a PK i EK




n ciuda diferenelor marcante privind organizarea structural,
toate celulele, att cele PK ct i cele EK prezint o serie de
asemnri.
Membrana plasmatic este o structur comun, ce ndeplinete
roluri similare pentru ambele tipuri de celule.

Membrana plasmatic:
- separ mediul intern intracelular de mediul extracelular,
- regleaz schimburile de substane (molecule i ioni) ale celulei cu mediul
extracelular (permebilitate selectiv)
- menine potenialul electric al celulei.
Materialul genetic (ereditar). Toate celulele, att cele PK ct si cele EK, posed
ADN ca material ereditar, i diferite tipuri de ARN utilizate pentru sinteza
proteinelor.
Comparaie privind organizarea structural i
funcional a celulelor procariote i eucariote
Proprieti caracteristice PROCARIOTE EUCARIOTE
Tipuri de organisme Eubacterii
Archaebacterii
-Protiste (EK unicelulare): alge,
protozoare, drojdii
-Fungi
-Plante
-Animale
Dimensiunea celulei Mic, circa 0,2-2 m Mare, de obicei 10-100 m
Metabolism Divers, anaerob i aerob Aerob (cu excepia celulelor fr
mitocondrii)
Organite Nu au organite delimitate de
membrane
Numeroase organite: nucleu,
mitocondrii, lizosomi, peroxisomi,
cloroplaste
Acid deoxiribonucleic (ADN) ADN circular, necomplexat cu
proteine
ADN de dimensiuni mari, organizat
la nivelul nucleului, complexat cu
histone
Cromozomii O singur molecul de ADN circular Numeroase molecule de ADN liniar
Acid ribonucleic (ARN) i
proteine
ARN-ul i proteinele sunt sintetizate
n acelai compartiment intracelular
ARN sintetizat (transcris) i
prelucrat n nucleu
Proteinele sintetizate n citoplasm
Ribosomi 70S 80S
70S n mitocondrii i cloroplaste
Proprieti caracteristice PROCARIOTE EUCARIOTE
Citoschelet Absent Reea complex alctuit din
microtubuli, microfilamente i
filamente intermediare
Perete celular Peptidoglican Absent la animale
Celuloz (plante) sau chitin (insecte)
Diviziunea celular Prin fisiune (diviziune binar) Prin mitoz
Reproducerea Prin fisiune binar, nmugurire Fisiune i nmugurire la EK inferioare
Sexuat, cicluri de meioz-fertilizare la
animale i plante superioare
Organizarea Unicelular Multe pluricelulare, cu diferenieri n
numeroase tipuri de celule
Tolerana la mediu Proliferare rapid i
adaptabile la variaii mari ale
factorilor de mediu
Suport variaii limitate ale factorilor de
mediu
Pe baza similitudinilor dintre PK i unele organite din celulele EK,
biologul american Lynn Margulis a lansat n anul 1967 ideea c o
serie de organite au rezultat prin asocierea endosimbiotic dintre
celule diferite.
Teoria endosimbiotic este susinut n special de cercetrile asupra
mitocondriilor i cloroplastelor.

Teoria endosimbiotic
Dr. Lynn Margulis (1938-2011)
iniiatoarea teoriei endosimbiotice
Dei iniial a fost contestat, n prezent teoria
endosimbiotic este unanim acceptat i se
apreciaz c mitocondriile provin din
bacterii aerobe, iar cloroplastele din
bacterii fotosintetizante.
Originea endosimbiotic a organitelor
Iniial atmosfera Pmntului era lipsit de oxigen molecular.
Etapa evolutiv urmtoare a fost marcat de procesul de
fotosintez, ce a permis celulelor s foloseasc energia solar.
n acest proces celulele folosesc apa ca donor de electroni i
hidrogen pentru transformarea CO
2
n molecule organice.
Procesul de fotosintez este nsoit de eliberarea de oxigen
molecular. Prin acest mecanism, n urm cu aproximativ 2
miliarde de ani n atmosfera Pmntului s-a produs oxigen
molecular din abunden. Dup apariia oxigenului, celulele s-au
diversificat, iar o parte din celule au adoptat o cale alternativ de
supravieuire bazat pe un metabolism oxidativ. Se presupune
c metabolismul oxidativ a furnizat un avantaj acestor celule
comparativ cu cele cu metabolism anaerob. Prin asocierea
simbiotic dintre o celul anaerob cu o celul aerob, i celula
anaerob a obinut capacitatea de a susine un metabolism
aerob.

Celula gazd (celul eucariot ancestral) a nglobat prin endocitoz o
bacterie aerob (precursorul mitocondriei) iniiind o relaie de simbioz.
Formarea cloroplastelor - endosimbioza serial
Argumente in favoarea teoriei endosimbiotice:
Mitocondriile i cloroplastele sunt asemntoare cu
bacteriile n ceea ce privete dimensiunea.
Mitocondriile i cloroplastele au propriul lor sistem genetic
(sunt purttoare de informaie genetic) care este separat de
genomul nuclear al celulei.
Ribozomii din mitocondrii i cloroplaste i ARN-ul ribozomal
sunt strns nrudite cu omologii lor de la bacterii.
Trebuie menionat ns c, pe parcursul evoluiei o mare
parte din genomul bacteriei a fost ncorporat n genomul
nuclear al celulei, astfel nct numai o parte dintre
componentele mitocondriilor i cloroplastelor sunt
codificate la eucariotele actuale de ADN-ul localizat n
mitocondrii, respectiv n cloroplaste.
Organismele multicelulare
n cursul evoluiei ulterioare a celulei eucariote s-a realizat
specializarea i diversificarea celular, fenomene ce au
contribuit la formarea i evoluia organismelor multicelulare.
Organismele pluricelulare au evoluat din EK unicelulare cu
aproximativ un miliard de ani n urm.
O serie de eucariote unicelulare, de exemplu alga verde Volvox,
formeaz agregate multicelulare (colonii) care par s reprezinte
punctul de tranziie evolutiv de la o singur celul la organismele
pluricelulare.
Volvox aureus
Celulele individuale comunic
ntre ele prin intermediul unor
cordoane fine de citoplasm,
astfel nct ntreaga colonie se
poate deplasa ntr-o manier
coordonat, ca entitate unic.
Organismele multicelulare primitive sunt formate din dou
tipuri de celule ce ndeplinesc funcii diferite. Unele celule sunt
mici i mai numeroase i sunt de obicei specializate pentru
micare i mor dup un numr limitat de diviziuni celulare. A
doua categorie este reprezentat de celule mari ce sunt
specializate pentru reproducere i care au o capacitate de
proliferare nelimitat.
Organismele multicelulare mai evoluate prezint un grad mare
de complexitate n ceea ce privete organizarea celular. n
cadrul unui organism multicelular unele celule alctuiesc corpul
(soma) i se numesc celule somatice, iar altele servesc ca
precursori pentru o nou generaie. La plantele superioare i la
animale aceste celule prezint particulariti speciale i se
numesc celule germinale. Din celulele germinale se vor forma
toate tipurile de celule dintr-un organism multicelular. Celulele
germinale sunt necesare pentru reproducerea sexuat prin care
se realizeaz posibiliti multiple de recombinare a genelor unei
specii, proces ce a stat la baza variabilitii organismelor.

A single ~200 micrometer (m) cell, the human
egg, with sperm, which are also single cells.
From the union of an egg and sperm will arise
the 10 trillion cells of a human body.
Celulele procariote i eucariote sunt utilizate ca
modele experimentale
Studiile de biologie celular i molecular folosesc ca modele
experimentale diferite tipuri de celule i organisme.

Escherichia coli a fost folosit pentru investigarea unor mecanisme
fundamentale, cum sunt: replicarea ADN, expresia genelor i sinteza
proteinelor, descifrarea codului genetic. Avantajul acestui model
experimental const n simplitatea sa i n uurina cu care aceast
bacterie se poate reproduce n laborator. Genomul E.coli are dimensiuni
reduse (codific circa 4.000 de proteine, comparativ cu organismul uman
care codific aproximativ 100.000 proteine diferite).

Saccharomyces cerevisiae
Studiile pe drojdii au permis nelegerea
multor procese fundamentale cum sunt:
replicarea ADN, transcrierea i procesarea
ARN, sortarea proteinelor i reglarea
diviziunii celulare.

Genomul E.coli
Dictyostelium discoideum este un EK unicelular simplu. Este o
celul deosebit de mobil i a constituit un model pentru studiul
mecanismelor moleculare ce controleaz micarea celular. n
condiii nefavorabile, n lipsa unei cantiti adecvate de hran,
celulele izolate agreg formnd structuri multicelulare. Acest
organism pare s fie situat la limita dintre organismele unicelulare i
pluricelulare, i a fost utilizat ca model pentru studiile de semnalizare
celular i pentru nelegerea interaciunilor intercelulare.

Caenorhabditis elegans este un nematod utilizat ca model pentru
studiul dezvoltrii i diferenierii celulare; a permis nelegerea
mecanismului morii celulare programate (apoptozei).

Drosophila melanogaster este, la fel
ca i Caenorhabditis elegans, un
model pentru studiul dezvoltrii
embrionare.


Arabidopsis thaliana reprezint
principalul model pentru studiile de
genetic molecular la plante.
Xenopus laevis (amfibian), reprezint
un model important pentru investigarea
stadiilor timpurii ale dezvoltrii
vertebratelor. Oule de Xenopus sunt
celule mari i toate stadiile de
dezvoltare de la ou la mormoloc pot fi
studiate n laborator.


oarecele de laborator (Mus musculus). Analizele
genetice ce au utilizat ca model experimental
oarecele au permis identificarea a numeroase mutaii
ce afecteaz dezvoltarea organismului. n prezent se
folosesc aa-numiii oareci transgenici la care
anumite gene specifice se introduc n interiorul liniei
germinale, astfel nct efectul acestor gene asupra
dezvoltrii sau n legtur cu alte procese s poat fi
studiat pe animalul ntreg. S-a observat c mutaii
ale genelor omoloage la oarece i om determin
defecte asemntoare n dezvoltarea ambelor specii.
Mutaiile genelor omoloage la oarece i om determin defecte asemntoare
n dezvoltarea ambelor specii (n imagine, pata alb este determinat de o mutaie
a genei kit ce controleaz dezvoltarea celulelor pigmentare) .
Culturile de celule umane (normale i tumorale) au permis
nelegerea mecanismelor ce guverneaz diviziunea celular,
transformarea celulelor normale n celule canceroase, studiul
efectelor unor ageni terapeutici.
CONCLUZIE
Evoluia organismelor a determinat la nivel celular o diversitate i o
specializare celular remarcabil. Totui, termenul de celul este folosit
adesea fr a se specifica un anumit tip de celul, deoarece n principiu
organizarea structural i funcional a celulelor este similar la toate
tipurile de celule.
Celule tumorale
umane n cultur
(celule HeLa)