UNIVERSIDAD DE SONORA

Profesor:


Departamento de Ingeniera Qumica Y Metalurgia

Cultivo Celular

Practica de laboratorio Muestreo Slido y Lquido
Tincin Gram
Muestreo a:
Muestra lquida: Agua de Inodoro;




Muestra Slida: Ratn (Informtica) ;


Introduccin:
Los microorganismos permiten fcilmente el paso de luz a travs
de sus cuerpos, lo que los hace transparentes a la vista, a menos
que contengan pigmentos que permitan su observacin en el
microscopio. Es por ello que debemos teir a los microorganismos
con compuestos que se fijen a sus estructuras y les confieran color,
estos compuestos son los colorantes.
Una vez obtenida una muestra podemos observar los
microorganismos que en ella estn con mayor facilidad y esto
gracias al mtodo de Tincin Gram.
Para teirlo utilizaremos distintos reactivos que le darn la
coloracin a los microorganismos, como se muestra a continuacin:

Equipos, reactivos y materiales:
Tubos con medio inclinado conteniendo tres cepas de la
prctica nmero 2 tubos con caldo nutritivo inoculados con
3 de las diferentes cepas encontradas en la misma prctica;
1 Equipo de la tcnica de Gram. (cristal violeta. lugol,
solucin alcohol-acetona y safranina);
Microscopio;
Porta objetos;
Aceite de inmersin
Mechero;

Equipo de la tcnica de Gram. (cristal violeta. lugol, solucin alcohol-acetona
y safranina)
Procedimiento:
Preparacin del Frotis:
Tincin Gram:

1.- Elaborar preparaciones fijas de las bacterias a observar.
2.- Aadir 1 2 gotas de cristal violeta a la preparacin, hasta que se cubra
por completo. Dejar actuar el colorante durante 1 minuto.
3. -Una vez transcurrido el tiempo, lavar la preparacin con la pzeta sobre el
recipiente de plstico para tinciones.
4.- Agregar 1 2 gotas de solucin lugol a la preparacin, y dejar actuar 1
minuto. Transcurrido el tiempo, lava.
5. - Con cuidado, aadir gota a gota el alcohol-acetona lavando la preparacin
durante 10 segundos.
7. Aadir el colorante de contraste, safranina (1 2 gotas) y dejar actuar
durante 30 segundos. Lavar.
8. Dejar secar al aire y con mechero y observar a microscopio.



Conclusiones:
Es importante sealar que la tincin de Gram es un
procedimiento de laboratorio utilizado para distinguir
entre bacterias gram-positivas y gram-negativas. La
capacidad para diferenciar entre las dos categoras
de bacterias depende de la pared celular, para la retencin o
el escape del colorante.

Podemos resaltar lo siguiente:

La tincin gram permite observar bacterias que son causante
de producir el cuadro.
Evaluar la calidad de la muuestra, es decir si es una muestra
apta para el cultivo bacteriano.