Lic. Aricela Subilla de Miller Encargada de la Seccin de Inmunoserologia Policlinica J. J. Vallarino Caja Seguro Social Dengue (Fiebre rompe huesos) Agente etiolgico: Flavivirus - virus de una sola cadena de RNA. Morfologa - esfrica. Envoltura - pleomrfica. Hay 4 tipos inmunolgicos 1, 2, 3, 4. Es endmico en China, Vietnam, Asia, Africa, Amrica Latina: Caribe, Amrica Central, Mxico, Venezuela, Brasil, etc. Es ms frecuente en tiempos de lluvia, en aguas limpias ,temperaturas altas ,baja altitud y alta humedad. Artrpodo transmisor: Aedes aegypty - urbana, Aedes albopictus - rural Mapa de regiones con Dengue y Dengue Hemorrgico. Los puntos amarillos indican epidemias recientes.(datos de OMS)
Dengue (Fiebre rompe huesos) Mapa con la distribucin de Aedes aegypti Dengue Aedes: es una especie hematfaga diurna .con un km de radio de accin.[ altitud 1300mts y 25 a 40 grados C ] Pica 2 horas antes del amanecer y antes de que oscurezca. Mosquito se vuelve infectante 8 a 12 das despus de alimentarse de sangre infectada. Dengue clsico: Perodo de incubacin 4 a 10 das. Enfermedad febril aguda. de 2 a 7 das Sabor herrumbroso en la boca Cefalea intensa, anorexia. Mialgias, artralgias. Dolor retroorbital, erupcin y eritema facial Vmitos, alteraciones gastrointestinales. Husped - seres humanos, primates, mosquitos. Dengue Clsico Linfadenopatas. Leucopenia con linfocitosis. Trombocitopenia (menos de 100.000 pl/mm3). TSGO y TSGP - ligeramente altas. Diagnstico diferencial: Sarampin, rubola, influenza, leptospira. Diagnstico del laboratorio:, Serologa - inhibicin de hemoaglutinacin F de C. ELISA.[ 4 das IgM alto y 5 dia el Ac Ig G empieza a subir ] PCR [ viremia 5 a 6 das antes de los sntomas ]. Neutralizacin para detectar el serotipo. Aislamiento del virus: Aislamiento de sangre en cultivo de tejido, celular o en mosquito. Inculo ratn (parlisis flcida). Dengue Hemorrgico Forma clnica con sangrado: Aumento de permeabilidad vascular. Trombocitopenia - petequias - equimosis - gingivorragia. Hipovolemia. Elevacin del hematocrito. Vmitos, dolor abdominal, hemorragia gastrointestinal. Derrame serosas. Shock y muerte. Dengue Hemorrgico Hemorragia es el resultado de varios factores plaquetarios vasculares y coagulopticos. Slo se produce coagulacin intravascular diseminada en un nmero reducido de pacientes ms en nios. Otros hallazgos de laboratorio: Hiponatremia., hipoproteinemia Fibrinogeno alto Albuminuria TSGO y TSGP ligeramente elevados. Complemento.disminuido Linfocitos atpicos Tiempo de protombina elevado. Dengue Hemorrgico - Mecanismo Monocito Clula blanco + Paciente Ac contra algn serotipo Infeccin por otro serotipo Los Ac anteriores favorecen penetracin celular y replicacin viral INMUNO AMPLIFICACION Liberacin de MEDIADO RES Permeabilidad vascular
Solucin Stop. Materiales Provistos para el ELISA de Captura del Dengue Ig G
Microplatos con anticuerpos anti-human IgG.
Viales liofilizados de antgenos virales 1,2,3,4 de Dengue.
Concentrado de Buffer de lavado.
Diluente de Suero.
Buffer reconstituyente para el Antgeno.
HRP Conjugado Anticuerpo Monoclonal Tracer.
Tetrametilbenzidina TMB.
Suero Control Ig G Positivo.
Suero Calibrador Ig G.
Suero Control Ig G Negativo.
Solucin Stop. Materiales Adicionales Requeridos y no provistos por el Kitt.
Micropipetas ajustable de (5 1000 l de capacidad).
Agua destilada.
Sistema de lavado de microplatos.
Lector de microplatos con longitud de onda de 450nm.
Reloj.
Probeta.
Tubos de plstico para pre dilucin de los sueros.
Tubos de plstico o vial para pre dilucin del antgeno.
Tubos con Suero de los pacientes a evaluar. Metodologa
Toma de muestra; recomendaciones de la seccin de Virologia del Instituto Conmemorativo Gorgas.
A la hora de la realizacin de la prueba en nuestra policlnica se utiliz la tcnica de ELISA de Captura para Dengue Ig M y Dengue Ig G (panbio diagnostics).
Para los lavados se utiliz el lavador Biotek (ELx50)
Para la lectura de las absorbancias se utiliz el lector Biotek (ELx800) el cual tiene programado la prueba de panbio Dengue Ig M e Ig G. RESULTADOS
Muestra de la poblacin atendida en nuestra policlnica (J.J. Vallarino). Fue de 50 pacientes atendidos en el Cuarto de Urgencias y consulta externa.
A los 50 pacientes tomados para realizar este trabajo se les realiz la prueba en bsqueda de los dos tipos de Inmunoglobulinas tanto M como G contra el virus del Dengue; para as poder determinar si la infeccin por Dengue, en el caso de darse resultados positivos, era de tipo primaria o de tipo secundaria, dndose as un estudio analtico descriptivo, de los cuales se obtuvieron los siguientes resultados. Negativo Positivo Total Dengue Ig M 7 3 10 Dengue Ig G 8 2 10 Tabla 1. Pacientes de 1 toma (0-3 das) 0 1 2 3 4 5 6 7 8 Negativo Positivo Dengue Ig M Dengue Ig G Tabla 2. Pacientes de 2 toma (> 8 das) Negativo Positivo Total Dengue Ig M 10 30 40 Dengue Ig G 11 29 40 0 5 10 15 20 25 30 Negativo Positivo Dengue Ig M Dengue Ig G 0% 10% 20% 30% 40% 50% 60% 70% DENGUE PRIMARIO DENGUE SECUNDARIO INFECCIONES NO DENGUE PORCENTAJES POR POBLACIN PORCENTAJES POR POBLACIN Dengue CONCLUSIONES
Para los primeros 10 pacientes a los cuales se les tom la muestra a los 3 das:
3 de estos pacientes presentaban una infeccin de tipo primaria. 2 pacientes presentaban una infeccin de tipo secundaria. 5 pacientes estaban negativos para Ig M e Ig G contra Dengue.
Para los 40 pacientes restantes a los cuales se les tom la muestra a los 8 das o ms:
29 pacientes presentaban una infeccin de tipo secundaria. 1 paciente con infeccin de tipo primaria. 10 pacientes negativos para Ig M e Ig G contra Dengue.
CONCLUSIONES
Esto nos lleva a la conclusin que el 62 % de nuestra poblacin estudiada presenta una infeccin secundaria. El 8 % present una infeccin primaria El 30 % present una infeccin de sintomatologa parecida al Dengue pero de etiologa distinta. Este dato es de vital importancia ya que como vemos es un porcentaje alto de pacientes a los cuales probablemente se les pudo haber tratado como pacientes con dengue lo cual pudo ser un error por parte del mdico ya que la informacin o los resultado de las pruebas slo se utilizan como datos epidemiolgicos y no como diagnstico y los pacientes se merecen un diagnstico diferencial para poder darles el tratamiento correcto hacia su enfermedad. RECOMENDACIONES
Existen por lo menos dos razones para la vigilancia del dengue basado en el laboratorio.
La primera porque se requiere confirmar los casos teniendo en cuenta que existen enfermedades clnicamente semejantes. El Dengue Hemorrgico hay que hacer la diferenciacin de otras infecciones.
La segunda porque se ha demostrado que el riesgo de epidemias de dengue e incremento de casos hemorrgicos puede depender del serotipo del virus que est circulando.
Cuando la vigilancia se realiza con un nico suero el estimativo es impreciso como se ha comprobado en diferentes estudios.
Por las dificultades logsticas, es difcil establecer una vigilancia activa para recoleccin de sueros pareados.
Como consecuencia la muestra recomendada sera el suero colectado despus del sptimo da porque se aumenta la probabilidad de confirmar los casos. Sin embargo, esto tiene los siguientes inconvenientes:
1. La mayora de pacientes reciben asistencia mdica durante la etapa aguda y son pocos con quienes se tiene contacto despus de sta. Por lo cual no retornan para la toma de la segunda muestra.
2. La posibilidad de conocer los virus circulantes disminuye significativamente porque el aislamiento es exitoso del suero de los primeros 3 das de inicio de sntomas.
3. Infecciones recientemente pasadas se podran informar como agudas considerando que la IgM se puede detectar hasta por 3 meses. Vaughn et al. 11
Hola soy el mosquito Aedes aegypti y soy un asesino en potencia crees que puedas detenerme?