SNCHEZ CARMONA ARI ADNA ABI GAI L Produccin de Hongos Macromicetos Instituto Tecnolgico de Veracruz Ingeniera Bioqumica
Tecnologas Clsicas y Emergentes de Fermentaciones/Farmacutica
Los macromicetos Un macromiceto est formado por largas hifas ramificados que se renen en cordones rizomorfos y cuerpos de reproduccin (ascomas, basidiomas) visibles y medibles en centmetros.
Son organismos saprobios que absorben la materia orgnica muerta de los residuos donde crecen, o son parsitos de rboles, o viven en simbiosis con plantas formando ectomicorrizas. Hongos ascomicetos Las trufas (Tuber) son hipgeas o subterrneas, con ascomas cerrados, ms o menos globosos, cuyo himenio no est expuesto al exterior sino que recubre una serie de compartimentos internos Hongos basidiomicticos Las setas, bejines y otros basidiomas estn constitudos por hifas dicariticas que suelen presentar fibulas.
Este micelio puede crecer durante aos en el suelo o la madera hasta que bajo la influencia de diversas condiciones ambientes forma los basidiomas. Produccin Industrial de hongos macroscpicos Ventajas Desventajas Materias primas baratas que no requieren esterilizacin (insumos de energa relativamente bajos) La eliminacin de desechos es comparativamente ms sencilla
Proceso lento y limitado por la eleccin de organismos capaces de tolerar los bajos a w
Dificil de monitorear, controlar y escalar Limitado a procesos que no requieren contencin
Fermentacin en Estado Slido (SSF) Ventajas Desventajas Menos problemtica intrinsecamente: Las transferencias msicas de oxgeno y calor son mucho mejores y La homogeneidad del cultivo es generalmente mejor Ms confiable y reproducible Ms facil de de monitorear y controlar parmetros operacionales claves, y Ms flexibles
Los hongos macroscpicos crecren ms lentamenter que las bacterias, y otros hongos filamentosos, haciendo la optimizacin y control un reto.
Fermentacin en sumergido (SmF) Efectos de las variables de procesos sobre el crecimiento y la formacin de productos Fisicos Quimicos o Biolgicos.
Las condiciones ptimas de cultivo dependen de: Naturaleza del producto (biomasa o metabolito) Cepa de hongo Medio ambiente Funcionamiento 26-36 C Amplio rango Aer. estrictos -> O 2
-> Pellets Ejemplo: SmF de Pleurotus ostreatus en cultivo por lote en un Biorreactor de tanque agitado Papaspyridi, et al., 2012 Productos del cultivo de hongos macroscpicos 1. Setas comestibles 2. Produccin de biomasa 3. Produccin de polisacridos: - glucanos 4. Produccin de productos con potencial teraputico 1. Polictidos 2. Terpenodides A 3. cidos grasos 5. Enzimas fngicas Cultivo de hongos comestibles Dentro de las ms conocidas se encuentran Agaricus bisporus, Lentinula edoles, Pleurotus spp., y Flammulina velutipes Prcticamente todas introducidas de pases como China y Japn Aceptacin: Agradable sabor y excelente textura Genero Agaricus Agaricus bisporus (champion) es el macromiceto comestible ms cultivado a nivel mundial mediante tcnicas tradicionales de sustratos compostados.
Agaricus blazei o Agaricus brasiliensis (seta del sol) es la especie ms utilizada para la produccin de polisacridos y otros compuestos con acciones biolgicas y posible uso farmacolgico Genero Pleurotus, hongo ostra, gorgolas u orellanas Es la segunda seta producida a nivel mundial Produccin de polisacridos inmunoestimuladores y estatnas naturales (hipocolesterolmicas) Estudiado ampliamente para la biorremedacin de diferentes efluentes Algunos bioactivos de Pleurotus spp. cultivados por SmF ya se producen a escala industrial Gnero de seta Fuentes de carbono y nitrgeno empleadas Tem. incubacin pH del medio de cultivo Agitacin Agaricus Caldo papa dextrosa Jugo de caa Licor de maz Malta Azcares reductores, (glucosa) Protena de soya Extracto de levadura Peptona 25-45 C(promedio de 27C) 2-7 (promedio de 6) 120-200 Flammulina Caldo extracto de malta Extracto de levadura Asparginina Azcares reductores (Glc) Gluten de trigo Peptona
24-28C - Estticos, 150-750 Pleurotus Caldo de papa dextrosa Aminocidos Licor de maz Extracto de malta Azcares reductores (Glucosa y Xilosa) Hidrolizado de casena Torta de soya Extracto de lavadura Peptona 25-30 C 4-6 Estticos, 100- 160 Produccin de championes orgnicos en Puebla Curso de cultivo del 'Hongo Ostra' Produccin de Biomasa: Inculo para ectomicorriza Legumbres han sido inoculadas con cepas apropiadas de Rhizobium o Bradyrhizobium para asegurar la formacin de ndulos de races. La infeccin deliberada de estos rboles podran permitir la produccin y cosecha de sus correspondientes hongos comestibles. El rpido crecimiento de estos rboles depende de su asociacin simbitica. Especificidad del Husped 10 000 hongos
Basidiomicetos Ectomicorrizica Ascomicetos
Los datos moleculares obtenidos hasta ahora sugieren que la comunidad ectomicorrizica pueden ser complejas y tener diferentes especies que pueden infectar las races de un rbol. Mtodos para la preparacin del inculo Usando suelo removido de las races de rboles infectados. Ascoporos, basidiosporos o esporocarpos homogenizados. Cultivos puros de hongo ectomicorrizico Aplicaciones del inculo Tras la cosecha y homogenizacin del micelio: Empacado en bolsas estriles de polipropileno. Matriz de gel de calcio-alginato
para colonizar granos de cereal. Produccin de polisacridos: -glucanos Basidiomicetos y ascomicetos contienen -glucanos y otros polisacridos.
Los micelios correspondientes pueden producir en ocasiones estos polisacridos en grandes cantidades de forma extracelular.
Frutos de hongos macroscopicos -glucanos de cultivos micelares La produccin a gran escala bajo condiciones controladas otorga un producto de mayor confianza. Provee una oportunidad de optimizar el rendimiento del proceso. Manipulacin de propiedades fsicoqumicas de los polisacridos para mejorar su bioactividad. Aplicaciones de los -glucanos Inmunomoduladores:
Estimulan el sistema inmunolgico reconociendo molculas de -glucanos como extraos al organismo. Metabolitos fngicos con potencial teraputico Metabolito Funciones Fuente Polictidos Antibiotico, antifngico, citosttico, antiparasitario, insecticida Pleorotus Agaricus Terpenoides Antiandrognicos, antivirales y antibacteriales. Pleorotus mutilis Clitopilus passeckerianus cidos grasos insaturados Nutracuticos Surez A.,C. Nieto I.J., 2013 3. Hongos macroscpicos como fuente de enzimas Hongos: Notable habilidad para sintetizar y segregar enzimas Capaces de degradar complejos polmeros a productos de bajo peso molecular Pueden ser asmilados y servir de alimento Juegan un papel vital en el Ciclo del carbono Contiene miembros Ascomycota y principalmente de Basidiomycota Blanquean la madera que colonizan degradando la lignina del material lignocelulsico presente
LMEs (Enzimas modificantes de lignina) Lignina peroxidasa (LiP) Mangano peroxidasa (MnP) Lacasa Hongos de pudricin blanca o La mayora de lo estudios son a escala de laboratorio o Cepas de colecciones o Estudios focados al entendimiento de los factores que afectan el rendimiento o Poca atencin al desarrollo de procesos a gran escala para aplicacin industrial Estudio comparativo de procesos de produccin de lacasa a nivel de biorreactor (2001-2012) Microorganismo Tipo de reactor, capacidad (volmen de trabajo) Condiciones de cultivo: agitacin ; temperatura ; pH,;vvm (pO 2 ); otras Inductor: concentraci n final Total de horas de operacin (h) Actividad mx. Lacasa (U/L) Referencia Irpex l actus Reactor de lecho empacado (27 mL) 1.8 Kasinath, et al. (2003) Panus ti gri nus Reactor de tanque agitado 3 L (2 L) 250 rpm, 28 C; 1.0 vvm OMW 360 4,603 Fenice et al. (2003) Reactor de lecho pulsado 0.5 L 23 C, control pH, dispositivo antiespumante - 230 16000 Font et al. (2003) Reactor impulsado por aire, air-lift (2L) 1 mM Xilidina 960 1,670 Rancao et al. (2003) Pleurotus ostreatus Reactor de lecho empacado (280 mL) pH= 5.5 1.5 mM Cu +2 144 1,403 Prasad et al. (2005) Trametes pubescens Reactor de bucle impulsado por aire, air- lift loop (3.5 L) Flujo inicial de aire 2.2 L/min Efluente fenlico 168 11,800 Ryan et al. (2005) Pleuotus ostreatus Reactor de bucle impulsado por aire, air- lift loop (5 L) 28 C; (pH)0=5; aire saturado a 0.2 L/h OMW 216 1,200 Olivieri et al. (2006) Trametes versicolor Reactor de tanque agitado (1L) 180 rpm; 28 C; pH=5; pO2=100% 30 M Xilidina 216 11,403 Tavares el al. (2006) Trametes versicolor Estudio comparativo de procesos de produccin de lacasa a nivel de biorreactor (2001-2012) Estudio comparativo de procesos de produccin de lacasa a nivel de biorreactor (2001-2012) Microorganismo Tipo de reactor, capacidad (volmen de trabajo) Condiciones de cultivo: agitacin ; temperatura ; pH,;vvm (pO 2 ); otras Inductor: concentraci n final Total de horas de operacin (h) Actividad mx. Lacasa (U/L) Referencia Trametes pubescens MB 89 Reactor impulsado por burbuja, bubble-lift 50 L 28C Agua residual de la destilera de vino 372 12,300 Strong (2007) Coriolopsis rigida Reactor de lecho expandido (200 mL) 30 C; aire 0.5 vvm 2 mM CuSO4; 10 mM xilidina 360 370 Alcntara, Gmez, Pazos & Sanromn (2007) Kluveromyces lactis (Lcc1 de Tranmetes trogii) Reactor de tanque agitado (2.8 L) 300 rpm; 28C; aire 0.2 L/min - 96 121 Ranieri, et al., 2009 Coriolopsis gallicaUAMH 8260 Reactor de tanque agitado (100 L) - 0.8 mM cuSO4 168 32,000 Romn, Torres, Ayala & Vzquez (2010) Trametes pubescens MB89 Reactor de inmersin temporal (200 mL) 25C; aire 60 L/h ; ciclo de inmersin temporal: 1 min inmerso y 60 min no inmerso (frecuencia de inmersin 0.016 s-1) 0.5 mM Cu+2 1,056 7,200 Rodrguez-Couto (2011b) Peniophora cinerea Reactor de tanque agitado 1.6 L (1.0L) 180 rpm; 28 C; pH 5.0; aireacin (pO2 100%) 240 75 Silvrio, et al. (2012) Pycnoporus sp. SYBC-L3 Reactor impulsado por aire, air-lift 65 L (45 L) 30 C; (pH) 0 = 5.0; aireacin 30 L/min - 192 72,000 Liu, et al. (2012) Estudio comparativo de procesos de produccin de lacasa a nivel de biorreactor (2001-2012) Biorremedacin Aplicacin en procesos de biorremedacin Hongos de poudricin blanca metabolizan algunos xenobiticos que representan amenzas serias para el ambiente Detofixicacin de efluentes Pesticidas Bifenilos polcorados Plticos sintticos Colorantes sintticos 1 . Enl a c e me x i c o . Pr o duc c i n de c ha mpi o ne s o r g ni c o s e n M x i c o . Di s po ni bl e e n: ht t p: / / www. yout ube . c om/ wat c h? v=z vwVSdPY4BU 2 . Fa z e nda , M. , Se v i o ur , R. , Mc Ne i l , B. & Ha r v e y , L. , 2008. Subme r g e d Cul t ur e Fe r me nt a t i o n o f " Hi g he r Fung i " : The Ma c r o f ung i . Adv anc e s i n Appl i e d Mi c r o bi ol ogy , Vol ume n 6 3, pp. 3 3 - 9 2 . 3 . Pa pa s py r i di , L. - M. ; Al i g i a nni s , N. ; To pa k a s , E. ; Chr i s t a k o po ul o s , P. ; Sk a l t s o uni s , A. - L. ; Fo k i a l a ki s , N. Subme r g e d Fe r me nt a t i o n o f t he Edi bl e Mus hr o o m Pl e ur o t us o s t r e a t us i n a Ba t c h St i r r e d Ta nk Bi o r e a c t o r a s a Pr o mi s i ng Al t e r na t i v e f o r t he Ef f e c t i v e Pr o duc t i o n o f Bi o a c t i v e Me t a bo l i t e s . Mo l e c ul e s 2 01 2 , 1 7 , 2 7 1 4 - 2 7 2 4. 4 . Su r e z , C. , Ni e t o , I . J . . 2 01 3 . Cul t i v o bi ot e c nol g i c o de ma c r o ho ng o s c o me s t i bl e s : una a l t e r na t i v a e n l a o bt e nc i n de nut r a c ut i c o s . Re v i s t a I be r o ame r i c ana de Mi c o l o g a . Vo l me n 3 0, pp. 1 - 8