COLETA, TRANSPORTE E ARMAZENAMENTO

DE AMOSTRAS BIOLGICAS NO
LABORATRIO DE
MICROBIOLOGIA
Gildevane Vieira do Nascimento
Supervisora de Microbiologia Lacen
Especialista em microbiologia
Mestranda em Farmacologia Clnica






Sempre que possvel, antes da antibioticoterapia, ou
imediatamente antes da prxima dose

Instrues ao paciente sobre o procedimento.

Sempre buscar o local da leso Coleta Microbiolgica

Verificar sempre o pedido do exame que deve conter as
informaes bsicas descritas para cada procedimento.

Coleta Microbiolgica
Amostras obtidas ao longo de 24 horas esto
sujeitas contaminao, portanto no devem ser
utilizadas para o exame microbiolgico
A quantidade de material obtida deve ser suficiente
para a execuo das tcnicas de cultivo solicitadas,
evitando resultados falso-negativos;
A amostra deve sempre estar em quantidade
suficiente para realizar todos os procedimentos
solicitados
Coleta Microbiolgica
CONSIDERAES GERAIS:

Transportar as amostras imediatamente ao laboratrio de
microbiologia.
Assegurar a sobrevivncia e o isolamento do micro-
organismo (viabilidade).
O menor tempo de envio da amostra ao Laboratrio
aumentar as chances de recuperao do patgeno,
ajudando na escolha da terapia adequada, beneficiando o
paciente





Coleta Microbiolgica
Coleta Microbiolgica
Sempre que possvel no usar swabs desprovidos de
meios de transporte para coleta pois os mesmos
ressecam rapidamente.

Observar sempre o tempo de coleta e o de envio da
amostra clnica ao laboratrio.
Coleta Microbiolgica


.
Nome completo do paciente e solicitao mdica.
Leito, doena de base e antibioticoterapia em uso
(QA).
Protocolo de atendimento do paciente junto ao
laboratrio.
Data e hora da coleta.
Nome do mdico assistente.
Informaes bsicas que deve conter na
identificao da amostra encaminhada ao L.M.C.
1. QUAL O TEMPO MXIMO PERMITIDO ENTRE A COLETA
E O PROCESSAMENTO INICIAL DE MATERIAIS COLETADOS
PARA EXAMES MICROBIOLGICOS?
Tempo mximo sugerido entre coleta e processamento das
amostras
Amostras Coletado em Transporte
Lquidos
pleural,peritoneal,asctico,
sinovial,e outros fludos
corporais
Tubo seco
estril,seringa sem
agulha
Ideal:< 2h,TA
Fragmento de
bipsia,tecidos,ossos
Tubo seco com soluo
fisiolgica
Ideal:< 2h,TA

Secrees em
geral:oral,nasal,
nasofaringe,
orofaringe,
orelha,conjuntival,vaginal,
retal,leso genital,feridas
superficiais
Swab com meio de
transporte Stuart
Ideal:< 2h,TA

Tempo mximo sugerido entre coleta e
processamento das amostras

Amostras Coletado em Transporte
Urina de jato
mdio,1 jato
Frasco estril
Ideal:< 2h,
refrigerada

Fezes in natura

Frasco estril
Ideal:< 2h,TA

Hemocultura Frascos
apropriados para
hemocultura
Ideal:< 2h,TA
2. Quais importncia
da refrigerao de materiais clnicos
aps a coleta?

INTRODUO
Temperatura ambiente (TA) para o transporte e
armazenamento de amostras de 25C. Reavaliar conceito de
TA, pois no Brasil, na maior parte do ano, a TA pode ultrapassar
esse valor.
Estudos recentes mostram que a viabilidade de bactrias
fastidiosas transportadas em swabs com meio de transporte,
foi melhor quando os swabs foram armazenados refrigerados.
A refrigerao da amostra tem como finalidade manter a
viabilidade do agente a ser pesquisado e no permitir a
multiplicao de bactrias que fazem parte da microbiota do
stio de onde a amostra foi coletada.
Excees : lquor



Importante
INTRODUO
3. O uso de swabs com meio de transporte para
coleta de materiais clnicos pode ser utilizado
em que situaes?

Importante


1. A coleta apropriada e um sistema de transporte eficiente
so as etapas mais crticas da fase pr-analtica do exame
microbiolgico.
2. Vrios trabalhos mostram que a coleta de materiais clnicos
atravs de swabs menos adequada do que aquela por
aspirao .
3. Swab com meio de transporte pode ser utilizado para:
secrees do trato genital, trato respiratrio superior
(orofaringe, nasofaringe), secreo ocular e do trato
digestrio (nus e reto).
4. No deve ser utilizado para secrees de feridas.
Importante
INTRODUO
Quais as causas mais comuns de
rejeio de amostras
clnicas no laboratrio de microbiologia?


Importante
O recebimento criterioso das amostras clnicas
pelo laboratrio de microbiologia garante uma
melhor correlao clnico/laboratorial.
O menor tempo de envio da amostra ao
Laboratrio aumentar as chances de
recuperao do patgeno, ajudando na
escolha da terapia adequada, beneficiando o
paciente
CRITRIOS DE REJEIO PARA AMOSTRAS CLNICAS

Amostras que foram coletadas ou transportadas sem as condies adequadas
no devem ser aceitas, pois a qualidade do resultado pode ser prejudicada.

Hemocultura



Uma coleta correta da amostra ,sem contaminao, fundamental para
fornecer resultados de hemoculturas exatos e fidedignos.

Frascos dentro da validade
O sangue deve ser extrado das veias e no das artrias
Evitar coleta a partir de um cateter
Desinfetar a pele antes da coleta
Enviar imediatamente ao laboratrio
Colocar a hora da coleta
No trocar a agulha entre a coleta e a inoculao da amostra
no frasco de hemocultura.
Como devem ser realizadas as coletas de hemocultura?


PROCEDIMENTOS PARA INOCULAO


Identificar com o nome do paciente, data e hora da coleta e
nmero da amostra. Limpar a tampa com lcool a 70% e deixar
secar;
Escolher o local de puno, proceder rigorosa antisspsia do
local com lcool 70% de forma circular de dentro para fora.
Colher a amostra com seringa e agulha descartveis e transferir
para o frasco ou tubo apropriado, sem trocar a agulha;
Homogeneizar os frascos por inverso;

Como devem ser realizadas as coletas de hemocultura?
Hemocultura
Qual o volume de sangue?
1. Adulto: em cada puno, indicada a
coleta de 8 a 10ml de sangue em frasco
aerbio.
2. Criana (1ano at 6 anos de idade):
coletar de 1 a 3 ml de sangue em frascos
peditricos, de acordo com o volume
indicado pelo fabricante.

Como devem ser realizadas as coletas de hemocultura?
Hemocultura
1 sintomas clnicos
Antes da antibioticoterapia ou imediatamente antes da
prxima dose
2 a 3 punes
As coletas durante um breve perodo(1h) de stios
diferentes
IMPORTANTE: No utilize o mesmo acesso venoso para mais
de um frasco, pois se aquele acesso estiver contaminado a
probabilidade do mdico tratar indevidamente o paciente
aumenta muito.
No incio da febre evitar o pico febril
Tempo de coleta das hemoculturas
NUNCA deve ser coletado apenas 01 hemocultura de pacientes
adultos volume inadequado de sangue a ser cultivado.
Resultados de uma nica hemocultura so mais complicados de
interpretar.
Aps coleta transportar ao Laboratrio em no mximo 02h pois o
atraso promove o impedimento na recuperao dos micro-
organismos.
Jamais refrigerar ou congelar os frascos de hemoculturas coletados
(baixas temperaturas inviabilizam alguns micro-organismos)
Ideal: realizar o transporte TA

Como devem ser realizadas as coletas de hemocultura?

NO recomendado a tcnica de coleta atravs de cateteres ou
cnulas quando se podem utilizar punes venosas.

Punes arteriais no trazem benefcios na recuperao dos micro-
organismos quando comparadas com punes venosas.

NO recomendado a troca de agulhas entre a puno de coleta e
distribuio do sangue nos frascos de hemocultura.

NO recomendado a troca de agulhas entre a puno de coleta e
distribuio do sangue nos frascos de hemocultura

Observaes Importantes:

Ponta de cateter
Fazer rigorosa assepsia da pele ao redor do
cateter com lcool 70%,
Remover o cateter e, assepticamente, cortar
5cm da parte distal(mais profundamente
introduzida na pele)
Colocar o cateter em frasco seco estril
Ponta de cateter
hemocultura

Coleta de amostras in natura

Orientar paciente a evacuar em recipiente limpo e
seco;
Proceder ou orientar o paciente a selecionar as
pores de fezes com presena de muco e/ou sangue
e/ou pus, colhidos em frasco de boca larga;

coprocultura
COPROCULTURA

Observaes:

No colher fezes em contato com papel toalete, pois
estes contm sais de Brio, que inibidor de crescimento
de algumas bactrias patgenas;
Identificar a amostra e encaminhar ao laboratrio dentro
de 2 horas aps a coleta em TA.
Evitar colher fezes em contato direto com fraldas, papel
higinico e vaso sanitrio;
Coprocultura
COPROCULTURA

Coleta de SWAB retal
Para a coleta de amostras atravs de swab retal , o
swab dever ser umedecido em soluo fisiolgica
,gua destilada ou no prprio meio de cary Blair ou
stuart.Este swab umedecido ser introduzido na
ampola retal do paciente (5 cm), comprimindo-o
com movimentos rotatrios , em seguida introduzir
o swab no meio Cary Blair,ou stuart, e feche bem
tampa rosqueada do tubo e mantenha o tubo na
posio vertical para no derramar e evitar
contaminao.


Coprocultura
COPROCULTURA

O material dever ser transportado
temperatura ambiente;
Coleta de swab fecal
Colocar o swab no frasco contendo fezes e,
realizando movimentos circulares, embeber o
swab com matria fecal;
Colocar o swab em tubo contendo o meio de
transporte cary Blair ou stuart.
Coprocultura


Urocultura - Consideraes

Modelos de Frascos Coletores
UROCULTURA

Orientao para coleta de amostras
1. Colher a 1 urina da manh ou aps transcorridas 3 horas
entre uma mico e outra.
2. MULHERES:
Lavar corretamente as mos com gua e sabo;
Lavagem rigorosa da regio genital, da frente para trs com
gua e sabo e enxaguar completamente com gua ou
salina estril, utilizando uma compressa de gaze estril;

Urocultura
Urocultura
Desprezar o 1 jato da urina no vaso sanitrio,
a fim de eliminar, por arraste, as bactrias da
uretra;
Recolher apenas o jato mdio da urina em um
recipiente estril fornecido pelo Laboratrio
ou adquirido na farmcia. Fechar a tampa de
rosca;

Urocultura
HOMENS:
Lavar corretamente as mos com gua e sabo;
Lavagem da glande com gua e sabo e secar com
gaze;
Com uma das mos manter o prepcio retrado e
com a outra segurar o frasco destampado;

Rejeitar o 1 jato, recolher apenas o jato intermdio
para um frasco esterilizado e voltar a rejeitar a ltima
parte do jato urinrio;

Homens
Urocultura
Evitar encher o frasco, fornecido pelo
Laboratrio ou adquirido na Farmcia. Fechar
a tampa de rosca;
Entregar de imediato no Laboratrio ou
guardar no mximo, uma hora a 2 a 8 C.
Homens
CRIANAS:
O coletor de urina deve ser especfico para cada
sexo, ou seja, se a coleta for de uma criana do sexo
masculino, deve-se utilizar o coletor para o mesmo
sexo, e no caso das crianas do sexo feminino, da
mesma forma;
Deve-se fazer uma assepsia da rea genital;
Expor a parte adesiva do saco coletor e colocar o
coletor com todos os cuidados para evitar
contaminao da amostra a ser coletada (ver
figuras);

Crianas
Crianas

O coletor deve passar no mximo 30 minutos,
devendo ser substitudo por outro coletor
aps este perodo.
Aps a coleta de urina retirar o saco e fechar
colando metade do adesivo na outra metade;

Crianas
Crianas
Crianas
Pacientes com cateter vesical:

Coleta:
Fechar a cnula que leva a urina at a bolsa coletora e
esperar que o paciente urine.
Quando o paciente urinar, proceder desinfeco da cnula
com lcool 70%
Coletar a urina contida no cateter com seringa e agulha
estril
Acondicionar o material coletado em um frasco seco estril
de boca larga
O ideal colher a urina quando o paciente trocar o cateter
porque existem biofilmes que podem resultar em falsos
positivos
Pacientes com cateter vesical
As amostras de urina coletadas da extremidade do
cateter de Foley so imprprias para culturas porque
as pontas do cateter esto invariavelmente
contaminadas com organismos uretrais (biofilmes), e
portanto no devem ser realizadas.
Devido ao alto risco de contaminao ou a
multiplicao excessiva de bactrias comensais de
crescimento rpido, deve-se impedir as coletas de 24
horas dos materiais clnicos para cultura,
principalmente de escarro e urina.

Urocultura

Amostras de Escaras e Secrees Profundas

Secrees Superficiais
No recomendada a cultura de leses secas;
Descontaminar as margens e a superfcie da
leso (Fazer a anti-sepsia com soluo fisiolgica
estril, lcool 70%, soluo de iodo 1 a 2% ou PVPI
10%);
Coletar o material em swabs com meio de
transporte e encaminhar imediatamente ao
laboratrio
Coleta de secrees de abcessos ,feridas
operatrias

Leso aberta:

Remover exsudato superficial, limpando com soluo fisiolgica
estril, as margens e a superfcie da leso.

Coletar a amostra na parte mais profunda da leso, utilizando de
preferncia, seringa e agulha. Ou, swab com meio de transporte.




No usar swab .

Fazer anti-sepsia; limpar com soluo fisiolgica estril.
Aspirar o exsudato com agulha e seringa (meio de
transporte para anaerbios).



Abscesso fechado e ndulos:


Quando for solicitada bacterioscopia e cultura
recomendado coletar dois swabs: um para o
esfregao corado pelo Gram e o outro, para a
cultura, que deve ser colocado em meio de
transporte.
Bacilos Gram negativos
Cocos Gram positivos
Secreo de orofaringe
CULTURA EM AGAR SANGUE:
Streptococcus pyogenes

GRAM NO REALIZADO A
PARTIR DO MATERIAL CLNICO
COLETA DE SECREES
SECREES TRATO RESPIRATRIO SUPERIOR
OROFARINGE
A contaminao com saliva, que contm uma flora bacteriana
variada, pode dificultar o isolamento do verdadeiro agente
infeccioso.
Usando abaixador de lngua e swab estril, fazer esfregaos
sobre as amgdalas e faringe posterior, evitando tocar na
lngua e na mucosa bucal.
Procurar o material nas reas com hiperemia prximas aos
pontos de supurao ou remover o pus ou a placa, colhendo o
material abaixo da mucosa.
Cont.
Coletar a amostra exatamente na rea
inflamada, evitando outros stios na cavidade
oral.
Enviar imediatamente ao laboratrio para
evitar a excessiva secagem do material.
orofaringe


Trato respiratrio inferior



Klebsiella pneumoniae

Secreo traqueal
A coleta deste material realizada em pacientes
entubados, atravs de sonda de aspirao.
Os resultados microbiolgicos dessas amostras
podem refletir colonizao local
Para diagnsticos de pneumonias no
recomendado,poder levar a condutas teraputicas
inadequadas.
Acondicionar o material coletado em um frasco seco
estril (tipo coletor)
Secreo Traqueal
Aspirado traqueal

A coleta do material realizada pelo mdico
assistente
Proceder tcnica especfica para a coleta do
material, com rigorosa assepsia.
Acondicionar o material coletado em um
frasco seco estril (tipo coletor)
A Amostra no deve ser refrigerada.
Aspirado Traqueal

Fludos orgnicos estreis
(lquidos:pleural,asctico,sinovial,peritoneal,
bile,pericrdico,lquor , aminitico)
Lquidos cavitrios


1. A coleta do material realizada pelo mdico assistente
2. Proceder tcnica especfica para a coleta do material,
com rigorosa assepsia.
3. Acondicionar o material coletado em um frasco seco
estril (tipo coletor) ou em frasco de hemocultura
(exceo :lquor)

Fludos orgnicos estreis
(lquidos:pleural,asctico,sinovial,peritoneal,
bile,pericrdico,lquor)

Culturas devem ser coletadas antes
do uso de antibiticos, solues ou colrios.
Desprezar a secreo purulenta superficial e, com swab,
coletar o material da parte interna da plpebra inferior.
O swab deve tocar toda a extenso da mucosa.
Recolocar o swab dentro do tubo com meio de transporte
Stuart e introduzi-lo na gelia at o fundo.


SECREO CONJUNTIVAL



Obrigado
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