El mayor grado de fidelidad alcanzado es el resultado de las actividades de la ADN polimerasa,

ayuda a seleccionar la base correcta para la insercin en el nuevo ADN sintetizado. No solo
cataliza la incorporacin de cualquier nucletido de una base despareada, discrimina en contra de
la incorporacin de una base despareada mediante la adaptacin de la conformacin de bases
correcto.
El otro mecanismo principal responsable de la exactitud de la replicacin del ADN es la actividad de
Doble lectura de la ADN polimerasa. La polimerasas replicativas poseen actividad exonucleasa que
puede hidrolizar el ADN en direccin 3 a 5 que opera en direccin contraria a la sntesis de ADN. La
doble lectura es efectiva porque necesita un cebador y no es capaz de llevar a cabo la sntesis de
novo. Cuando el ADN se sintetiza de 5 a 3, la energa necesaria para la polimerizacin se deriva de la
hidrlisis del grupo 5 trifosfato de un dntp ( desoxirribonucletidos trifosfato) libre y es aadido al grupo
3 hidroxilos de la cadena creciente.
La cantidad de ADN que se puede sintetizar a partir de un nico origen de replicacin
se denomina replicn o unidad funcional de replicacin. El genoma bacteriano es un
replicn nico circular. En organismos eucariticos, la replicacin del ADN se inicia en
mltiples orgenes a la vez (hay uno cada 20 kb aproximadamente), es decir, hay
varios replicones.
Los experimentos realizados por Cairns (1963) con bacterias Escherichia coli permitieron
determinar la existencia de ese punto fijo u origen de replicacin a partir del cual el genoma
empezaba a replicarse. Los experimentos consistan en mantener un cultivo de E. coli creciendo en
un medio que contena timidina tritiada (timina marcada con tritio), de forma que el ADN quedara
marcado radiactivamente pudiendo efectuarse una autorradiografa. A continuacin se observaba
al microscopio. Los resultados indicaban que la replicacin en E. coli se iniciaba en un punto
concreto (OriC).
Mediante consumo de ATP en direccin a la horquilla de replicacin, es decir, en direccin 5' 3' en
la hebra rezagada y 3' 5' en la hebra adelantada, la helicasa acta rompiendo los puentes de
hidrgeno que mantienen unida la doble hlice.
El siguiente conjunto de protenas reclutadas son las denominadas protenas SSB (single-stranded
DNA binding proteins, protenas ligantes de ADN monocatenario) encargadas de la estabilizacin
del ADN monocatenario generado por la accin de las helicasas, impidiendo as que el ADN se
renaturalice o forme de nuevo la doble hlice, de manera que pueda servir de molde.
Estas protenas se unen de forma cooperativa, por lo que su unin al DNA conforme avanza la
helicasa es rpida. Por otro lado, conforme las helicasas van avanzando se van generando
superenrollamientos en la doble cadena de ADN por delante de la horquilla y si stos no fueran
eliminados, llegado a un punto el replisoma ya no podra seguir avanzando.
Las topoisomerasas son las enzimas encargadas de eliminar los superenrollamientos cortando
una o las dos cadenas de ADN y pasndolas a travs de la rotura realizada, sellando a
continuacin la brecha.