Cours de 1e anne rsidanat Toxicologie 2013-2014 Khaoula KOULOUGHLI 1 Plan : I. Introduction ; II. Cancerogense ; 1. Dfinition ; 2. Caractristiques des cellules cancereuses ; 3. Mcanisme molculaire des cancerogne ; 4. Etapes de la cancrogense ; 5. Principaux cancrognes ; III. Evaluation ; VI. Conclusion. 2 I. Introduction : Cancer est un terme gnral appliqu un grand groupe de maladies qui peuvent toucher n'importe quelle partie de l'organisme. L'une de ses caractristiques est la prolifration rapide de cellules anormales qui peuvent essaimer dans d'autres organes, formant ce qu'on appelle des mtastases (1). 3 I. Introduction : Des archologues ont dcouvert au Soudan le squelette d'un homme ayant souffert d'un cancer mtastatique il y a plus de 3 200 ans, le plus ancien jamais trouv en rapport avec une maladie gnralement associe au mode de vie contemporain (2).
4 I. Introduction : Le cancer est une cause majeure de dcs dans le monde lorigine de 8,2 millions de dcs en 2012.
Les types de cancer les plus frquents ne sont pas les mmes chez les hommes et chez les femmes. Les principaux types de cancer sont les suivants: 1. Cancer du poumon (1,59 million de dcs) ; 2. Cancer du foie (745 000 dcs) ; 3. Cancer de lestomac (723 000 dcs) ; 4. Cancer colorectal (694 000 dcs) ; 5. Cancer du sein (521 000 dcs) ; 6. Cancer de l'sophage (400 000 dcs) (1).
5 I. Introduction :
Actuellement, environ 30% des dcs par cancer sont dus aux cinq principaux facteurs de risque comportementaux et alimentaires: un indice lev de masse corporelle, une faible consommation de fruits et lgumes, le manque dexercice physique, le tabagisme et la consommation dalcool (1). 6 I. Introduction : 7 1. Dfinition II. Cancerogense
8 9 II. Cancrogense 1. Dfinition II. Cancerogense
Ensemble de phnomnes pathologiques conduisant la transformation dune cellule normale en cellule cancreuse (13).
Deux sortes de gnes, les proto-oncognes et les gnes suppresseurs de tumeurs, ont un rle fondamental dans lapparition du cancer. 10 2. Caractristique dune cellule cancreuse II. Cancrogense 1. Les caractres nuclo cytoplasmiques:
Anisocytose : irrgularit de taille des cellules avec gigantisme cellulaire. du rapport nuclo cytoplasmique, du volume du noyau. Anisocaryose : irrgularit de taille des noyaux des cellules.. Rpartition ingale de la chromatine. Nucloles volumineux, parfois multiples (12). 11 A. Morphologique 2. Caractristique dune cellule cancreuse II. Cancrogense 2. Les anomalies des mitoses :
Mitoses plus nombreuses que dans un tissu normal. Mitoses anormales caractrises par : Une rpartition ingale du matriel chromosomique. Ces critres de malignit sont rarement tous runis, parfois la cellule cancreuse ne possde aucun. 12 A. Morphologique 2. Caractristique dune cellule cancreuse II. Cancrogense
3. Les anomalies chromosomiques des cellules cancreuses : Les plus nombreuses sont des modifications numriques ou de structure qui nont aucun caractre spcifique. Dautres sont spcifiques dun type tumoral particulier, on distingue : A- Les anomalies quantitatives : Le nombre de chromosomes des cellules cancreuses varie considrablement contrairement celui des cellules des tumeurs bnignes dont le nombre est proche de 46. On parle daneuplodie : Les cellules polyplodes (multiple de 46) peu frquentes (12). 13 A. Morphologique 2. Caractristique dune cellule cancreuse II. Cancrogense B. Les anomalies qualitatives : Prsentes dans plus de 20 varits de tumeurs et leucmie. Les principales anomalies qualitatives : Dltion : perte dune partie dun chromosome. Translocation : transfert dun fragment dun chromosome sur un autre. La cytogntique prsente un grand intrt dans le diagnostic de certaines prolifrations tumorales. Exp : Leucmie mylode chronique LMC = anomalie du chromosome 22 appel chromosome Philadelphie t (9, 22) (q34, q11) (12). 14 A. Morphologique 2. Caractristique dune cellule cancreuse II. Cancrogense 4. Modification de la membrane cellulaire : La membrane cytoplasmique et le manteau qui recouvre les cellules cancreuses prsentent diverses modifications des constituants glycolipidiques et glycoprotiques. Des modifications des caractres antigniques des constituants membranaires, apparaissent avec perte des caractres normaux et acquisition dantignes de surface, qui sont susceptibles dinduire des ractions de dfense de la part des macrophages, des lymphocytes cytotoxiques, et des lymphocytes B avec scrtion danticorps (12).
15 A. Morphologique 2. Caractristique dune cellule cancreuse II. Cancrogense 1. Immortalit : Les cellules transformes peuvent tre cultives indfiniment. Dans la plupart des cellules tumorales (90%) on observe un maintien des tlomres au cours des rplications successives. Ceci est d la surexpression des tlomrases, qui sont capables dajouter des squences rptes lextrmit des chromosomes. 2. Perte de ladhsivit : Elle est lie dune part la forte augmentation de la charge ngative de la membrane cytoplasmique secondaire la prsence de rsidus dacide N-actyl neuraminique dans les glycoprotines de surface base du traitement de certains cancers par la neuraminidase. Dautre part le dfaut de synthse de la fibronectine par les cellules cancreuses. 16 B. Fonctionnelle: 2. Caractristique dune cellule cancreuse II. Cancrogense 3. Perte de linhibition de contact : Dans les cultures des cellules normales, le contact entre 2 cellules voisines stoppe les mitoses. Dans les cultures des cellules cancreuses, les cellules en contact continuent se multiplier et se recouvrent les unes des autres, ce fait explique le potentiel invasif des cellules cancreuses. Dans la cellule cancreuse il existe des troubles de l'adhrence cellulaire in vitro : Perte d'adhrence des cellules vis vis du tissu conjonctif, joue un rle dans la dissmination du cancer. 17 B. Fonctionnelle: 2. Caractristique dune cellule cancreuse II. Cancrogense 4. Linsensibilit aux inhibiteurs physiologiques de la croissance cellulaire : Par exemple : la perte du contrle de la prolifration cellulaire par inactivation de p53. 5. Lchappement lapoptose : Par exemple par lhyper expression dinhibiteurs physiologiques de lapoptose. 6. Perte du "point de restriction: Quand on supprime aux cellules normales certains facteurs de croissance, celles-ci arrtent leur cycle cellulaire en phase G1 (point de restriction), les cellules transformes continuent, elles, leur division.
18 B. Fonctionnelle: 2. Caractristique dune cellule cancreuse II. Cancrogense 7. Perte de la ncessit dancrage : Pour leurs croissances les cellules pithliales ont besoin dun ancrage sur un support. Les cellules transformes peuvent, elles, pousser en milieu semi liquide. 8. Tumorignicit : Injectes des animaux immunotolrants (souris athymiques), les cellules malignes sont capables de donner des tumeurs. 9. La capacit dinduire une neo-angiogense Par modification entre activateurs et inhibiteurs de langiogense. 10. Les capacits dinvasion et de mtastases. 19 B. Fonctionnelle: 2. Caractristique dune cellule cancreuse II. Cancrogense
20 21 3. Mcanismes molculaires de la cancrogense 1. Dfinition II. Cancrogense 22 3. Mcanismes molculaires de la cancrogense Tout gne cellulaire appel proto- oncogne est susceptible de devenir, par suite dune modification qualitative ou quantitative, un oncogne. cd un gne capable de confrer le phnotype cancreux une cellule normale eucaryote (18). Ils commandent la synthse d'oncoprotines (protines stimulant la division) et dclenchent une prolifration dsordonne des cellule. 23 Oncogne 3. Mcanismes molculaires de la cancrogense Rle des oncognes :
Lactivit des oncognes est normalement rgule de faon ce que ces oncognes se limitent un rle dactivateurs du cycle cellulaire dans un tissu donn et un moment prcis de la diffrenciation ou du dveloppement.
24 Oncogne 3. Mcanismes molculaires de la cancrogense Rle dans la gense tumorale : Laltration dun allle est suffisante pour entraner une activation anormale du proto- oncogne, le mode daction dominant permet dexpliquer labsence ce jour de mutation germinale au niveau des proto- oncognes ltale pour le ftus. Les oncoprotines font partie intgrante de la signalisation de la cellule. On peut ainsi distinguer plusieurs classes doncoprotines en suivant lordre logique de la signalisation cellulaire.
25 Oncogne 3. Mcanismes molculaires de la cancrogense 1. Les facteurs de croissance : (assurent une boucle de rgulation autocrine) : Ex : proto-oncognes codant pour les protines de la famille FGF (fibroblast growth factor). Les facteurs de croissance des fibroblastes (FGF) : Ces facteurs sont gnralement scrts par des fibroblastes. Ce sont des protines qui activent la migration et la multiplication de cellule cibles. Le rle le plus important des fibroblastes, est de maintenir la matrice extracellulaire des tissus conjonctifs, et de rparer les lsions dues un traumatisme. Ils servent aussi rguler l'organisation et la diffrenciation des cellules des tissus environnants. 26 Oncogne 3. Mcanismes molculaires de la cancrogense 2. Les rcepteurs transmembranaires des facteurs de croissance : Permettent normalement aux facteurs de croissance de se fixer sur les cellules et, par l, d'agir. Lorsque ces gnes subissent certaines mutations, l'activit du rcepteur s'en trouve exacerbe, mme en l'absence de facteur de croissance. Ex : le proto-oncogne ErB 2 code pour le rcepteur lEGF (epidermal growth factor). ErbB2 code pour une protine transmembranaire ayant la structure dun rcepteur de la surface cellulaire, dont la partie intracellulaire a une activit tyrosine kinase. L'activation de cet oncogne est pratiquement toujours le rsultat de lamplification du gne normal. La surexpression dErbB2 entrane lactivation constitutive du signal de phosphorylation de la tyrosine favorisant la croissance. Amplifi dans environ 27 % des cancers du sein avancs.
27 Oncogne 3. Mcanismes molculaires de la cancrogense 3. Les protines G ou protines membranaires liant le GTP : Exemple : proto-oncognes de la famille ras. La famille des proto-oncognes RAS comprend trois gnes bien caractriss HRAS, NRAS et KRAS. Les protines issues de ces gnes ont un poids molculaire de 21 000 daltons, do leurs noms p21. Elles sont localises la face interne de la membrane cytoplasmique. Leur activation est dclenche par lintermdiaire de rcepteurs membranaires dont lEGFR (17). 28 Oncogne 3. Mcanismes molculaires de la cancrogense 29 Oncogne 3. Mcanismes molculaires de la cancrogense 3. Les protines G ou protines membranaires liant le GTP : Les protines RAS jouent un rle dinterrupteur au sein des voies de signalisation et oscillent entre deux tats : Un tat actif o elles sont lies au GTP, ce qui permet transitoirement linteraction de RAS avec dautres molcules intracellulaires effectrices et lactivation de diffrentes voies de signalisation. Un tat inactif o elles sont lies au GDP (17). 30 Oncogne 3. Mcanismes molculaires de la cancrogense 4. Les tyrosines protines kinases membranaires : Ex : BCl2. Initialement identifi comme un gne situ dans un point de cassure chromosomique dans certaines formes de leucmies, BCL2 s'est avr coder pour une protine capable de rallonger la dure de vie d'une cellule en empchant lapoptose.
31 Oncogne 3. Mcanismes molculaires de la cancrogense 4. Les tyrosines protines kinases membranaires : BCL2 BCL2 code pour un rgulateur de la permabilit de la membrane mitochondriale. Les lsions mitochondriales et lcoulement des composants mitochondriaux dans le cytoplasme reprsentent l'un des principaux signaux qui conduisent une cellule lapoptose. En aidant maintenir ferms les mga canaux mitochondriaux, et empche cet coulement et permet ainsi la survie des cellules qui auraient t autrement limines par un processus physiologique. 5. Les protines kinases cytosoliques.
32 Oncogne 3. Mcanismes molculaires de la cancrogense 6. Les protines activit nuclaire : Contrlent la transcription de gnes cibles en interagissant avec lADN. Ex : proto-oncogne ErbA codant pour le rcepteur aux hormones thyrodiennes, les proto-oncognes fos, jun et c- myc MYC : MYC code pour un facteur de transduction qui est rapidement activ aprs la stimulation de la croissance et qui est ncessaire pour que la cellule entre dans le cycle. Myc transactive un certain nombre d'autres gnes cellulaires et a une large gamme d'effets molculaires (un phnomne qui peut expliquer lactivation de Myc dans diffrents types de cellules cancreuses).
33 Oncogne 3. Mcanismes molculaires de la cancrogense
1. Mutation ponctuelle ou dltion ; 2. Remaniement chromosomique. 3. Amplification gnique ; 4. Autres : Intgration virale. 34 Mcanismes dactivation des proto-oncognes Oncogne
35 3. Mcanismes molculaires de la cancrogense 1. Mutation ponctuelle ou dletion : Dans une squence codante pour un proto-oncogne aboutissant une modification fonctionnelle de loncoprotine. Faux-sens entranant la substitution dun acide amin par un autre, sont capables dactiver des proto-oncognes en oncognes, en touchant par exemple un site catalytique ou en entranant une activation substitutive de la protine. Ex : mutation faux-sens et activation de la famille ras aboutissant un blocage en conformation active, lie au GTP.
36 Mcanismes dactivation des oncognes Oncogne 3. Mcanismes molculaires de la cancrogense Dltion :Les dltions, qui aboutissent le plus souvent une perte de fonction, peuvent parfois entraner une activation anormale si elles touchent une rgion rgulatrice.
Ex : lactivation du proto-oncogne erb B qui code pour le rcepteur lEGF peut rsulter de la dltion de la partie extra-membranaire et le domaine kinase intra cytoplasmique est alors actif de faon constitutive.
37 Mcanismes dactivation des oncognes Oncogne 3. Mcanismes molculaires de la cancrogense 2. Remaniement chromosomique : Des altrations chromosomiques (translocations, inversions) peuvent avoir pour consquence molculaire la formation dun gne hybride gnr par la fusion de rgions codantes entranant la synthse de protines chimriques non fonctionnelles.
Ex : Les translocations sont constamment observes dans les rhabdomyosarcomes alvolaires. 38 Mcanismes dactivation des oncognes Oncogne 3. Mcanismes molculaires de la cancrogense 3. Amplification gnique : Le nombre de copies du proto- oncogne sont fortement augmentes provoquant la sur expression de loncoprotine, elle touche surtout les gnes de la famille MYC souvent amplifis dans les tumeurs solides. Ex : * Carcinome petites cellules du poumon 20 c- myc * Rtinoblastome 20-75 n- myc (18). 39 Mcanismes dactivation des oncognes Oncogne 3. Mcanismes molculaires de la cancrogense Intgration virale :
Un virus sinsre dans ou proximit dun proto- oncogne activant son expression ou formant une protine hybride. Ex : Virus de lhpatite B dans lhpatocarcinome (18). 40 Mcanismes dactivation des oncognes Oncogne 3. Mcanismes molculaires de la cancrogense Consquence de lactivation des oncogne : Effet acquis : * stimulation de la prolifration ; * de la synthse du facteur de croissance (PDGF) ; * de la synthse du rcepteur du facteur de croissance ; * de la synthse des protines transductrices ; * de la synthse du facteur de transcription.
41 Mcanismes dactivation des oncognes Oncogne 3. Mcanismes molculaires de la cancrogense Fonction des gnes suppresseurs : Ces gnes sont des rgulateurs ngatifs de la croissance cellulaire, leur altration peut contribuer au processus tumorigne. Ces gnes ont la capacit dinduire lapoptose. Laction cellulaire rcessive : une altration des deux allles est ncessaire lobtention dune perte dactivit. Diffrentes familles de gne suppresseurs : DCC, WT1, Rb1,p53.
42 Suppresseurs 3. Mcanismes molculaires de la cancrogense Rle dans la gense tumorale :
Deux tapes sont ncessaires : * 1 e tape, somatique (cancer sporadique) ou germinale : cancer hrditaire prsence de facteurs de prdisposition. * 2 e tape : somatique : atteinte du second allle aboutit lmergence dun clone de cellule transformes qui pourra donner naissance une tumeur (18). 43 Suppresseurs 3. Mcanismes molculaires de la cancrogense Il peut sagir de mutation, de dltions, dinsertion, danomalie de mthylation des promoteurs inhibant la transcription.
La voie biologique contrlant la transition G1/S et passant par les gnes suppresseurs P53, P16, et RB est la voie la plus frquemment altre dans les cancers (18).
44 Mcanisme dinactivation du gne suppresseur Suppresseurs 3. Mcanismes molculaires de la cancrogense 1. Les mutations de gnes : RB1 : sa mutation entrane le rtinoblastome si elle touche deux allles. On distingue deux formes : Rtinoblastome hrditaire, les deux yeux sont touchs avec dautres Tumeurs (ostosarcome). Il ya une prdisposition car le sujet nat avec une dltion 13q14 qui entrane la perte de RB1. Le rtinoblastome non hrditaire, concidence de deux mutations et perte de 2RB1. Chez ladulte, les mutations du RB sont observes dans les cancers du sein ou du poumon petite cellules. P53 : il arrte temporairement le cycle de la cellule et stimule la rparation en cas daltration de lADN, sa perte est dcrite dans de nombreuses Tm solides : sein, poumon, colon. 2. Les dltions : Entranent la perte du gne suppresseur. Ex : p53 localis en 17p. 45 Mcanisme dinactivation du gne suppresseur Suppresseurs II. Cancrogense 46 3. Mcanismes molculaires de la cancrogense 1. Systme de rparation des msappariements (mismatch repair) : Intervient lorsque les mutations de lADN rsultent derreurs de la rplication (drapage de lADN polymrase ou DNA polymerase slippage) Il comprend les gnes hMSH2, hMLH1, hPMS1, hPMS2, hMSH6 Implication clinique : laltration constitutionnelle de ces gnes est lorigine du cancer colorectal familial non associ une polypose colique, ou syndrome HNPCC (Hereditary non Polyposis Colorectal Cancer), ou syndrome de Lynch qui reprsente une des premires cause de cancer colorectal hrditaire touchant exclusivement ladulte.
47 Gnes de maintien de lintgrit 3. Mcanismes molculaires de la cancrogense 2. Systme de rparation NER (Nucleotide Excision Repair) : Il sagit dun systme de rparation de mutations induites par des carcinognes environnementaux (UV, carcinognes chimiques). Implication clinique : laltration constitutionnelle des gnes du systme excision resynthse prdispose des maladies caractrises par une hypersensibilit aux rayonnements UV tel le Xeroderma Pigmentosum. 48 Gnes de maintien de lintgrit 3. Mcanismes molculaires de la cancrogense Tlomre : Complexes de DNA et de protines constituants lextrmit des chr et les protgeant de la dgradation et des fusions termino- terminales rgulateurs du nbr de rplications programmes pour une cellule. La tlomrase est une enzyme qui, lors de la rplication de lADN chez les eucaryotes, permet de conserver la longueur du chromosome en ajoutant une structure spcifique chaque extrmit : le tlomre. les tlomres se raccourcissent progressivement de division cellulaire en 1 autre, phnomne li lincapacit des DNA-polymrases rpliquer les extrmits ADN linaires des Chr eucaryotes.
Les tlomrases sont responsables du pouvoir prolifratif indfini des cellules tumorales. Une activit tlomrase est retrouve dans 85 % des cancers humains. 49 Tlomrase 3. Mcanismes molculaires de la cancrogense Le cancer rsulte dun dfaut de mort cellulaire des cellules transformes par inhibition (chapement) de lapoptose phnomne fondamental et prcoce de carcinognse. Ex : Dans 25 % des cancers du sein une rsistance lapoptose induite par le TNF est observe. Survie de cellules anormales ; Absence de suicide cellulaire.
50 APOPTOSE 51 5. Etapes de la cancrogense 1. Initiation ; 2. Promotion ; 3. Progression.
52 5. Etapes de la cancrogense :
Dfinition : Atteinte de lADN par un cancrogne gnotoxique dit initiateur , cest un phnomne irrversible.
53 Initiation 5. Etapes de la cancrogense : Dfinition : Processus pignitique (non gnotoxique) induit par un promoteur entranant la stimulation de la slection des cellules inities. Cest un phnomne rversible. Mcanismes : Slection positive : stimulation directe des cellules inities (promoteurs mitognes). Slection ngative : destruction des cellules normales (promoteurs cytotoxiques) et meilleure croissance des cellules inities.
54 Promotion 5. Etapes de la cancrogense : Les promoteurs mitognes : Endognes : Hormones stimulant la prolifration cellulaire : Oestrognes (cancer du sein, foie) Prolactine (Sein) H. Thyrodiennes (Cancer thyrode). Exognes : Composs stimulant la prolifration cellulaire : Esters de Phorbol Phnobarbital (cancer du foie). Les promoteurs cytotoxiques : Tetrachlorure de Carbone (Cancer du foie).
55 Promotion 5. Etapes de la cancrogense :
Phase clinique : tape finale dans le dveloppement du cancer. La noplasie est cliniquement dtectable Survenue de mtastases.
56 Progression 57 6. Principaux cancrogne 1. Agents chimiques; 2. Agents physiques ; 3. Agents biologiques. A. Cancrogne gnotoxique: La tumeur est initie en provoquant des lsions de lADN. B. Cancrogne pigntique: Ces substances naltrent pas lADN mais favorisent la croissance des tumeurs induitespar un cancrognes gnotoxiques (promotion) selon diffrents mcanismes. 58 6. Principaux cancrogne Agents Chimiques 1. Mutagnes : Cancrognes gnotoxiques = initiateurs ; Dtectables par les tudes de mutagense ; Atteinte du patrimoine gntique ; Avec ou sans seuil (selon le mcanisme). 2. Non Mutagnes : Cancrognes pigntiques = promoteurs Non dtectables par les tudes de mutagense ; Pas datteinte du patrimoine gntique ; Altration de la croissance cellulaire, de lexpression des gnes avec seuil (13). 59 6. Principaux cancrogne Agents Chimiques 1. Cancrognes gnotoxiques:
60 6. Principaux cancrogne Agents Chimiques Cancrogne action directe (cancrogne ultime) Pr-cancrogne Sont des lectrophiles et peuvent se lier lADN et dautres macromolcules. Ncessitent une bio activation pour devenir des cancrognes ultimes, soit directement, soit/la formation de cancrognes intermdiaires Ex : les poxydes dalkyle et daryle, les lactones, les ester sulfates. Ex : les HAP bio transformation/ Cyt P450 benzo [a] pyrnese fixe sur le rsidu guanine transversion de type G-T. A. Cancrognes gnotoxiques: Activation des pr-cancrignes : 1. Formation dpoxyde : Benzo [a] pyrne : 61 6. Principaux cancrogne Agents Chimiques A. Cancrognes gnotoxiques: Activation des pr-cancrignes : 1. Formation dpoxyde : Aflatoxine B1 :
63 6. Principaux cancrogne Agents Chimiques A. Cancrognes gnotoxiques: Produits organiques : Goudron : dibenz [a-h] antracne : cancer de la peau. Amines aromatiques : aminoazotolune (teinture), N- glucuronides. N- hydroxyarylamine / N-hydroxylamin (2-naphtylamine ) cancers de la vessie. Nitroso :NNK( 4Methyl nitrosamino-)-1-(3-pyridyl)-1butanone : cigarette. Produits inorganique :
64 6. Principaux cancrogne Agents Chimiques As Cancer du poumon Cd Cancer du poumon / prostate Ni Carcinome nasolaryng, pulmonaire gastrique,rnal Be Cancer du poumon Fibres damainte msothliome (cancer de la plvre ) cancer broncho-pulmonaire primitif A. Cancrognes gnotoxiques: Lsions de lADN : Effets des lectrophiles sur lADN : Liaison covalente avec les atomes nuclophiles de lADN; ce qui produira deux types daltrations. Formations dadduits sur N7 guanine. Alkylations (mthyl, thyl) sur O6, N7 guanine. Effets des radicaux libres et ERO sur lADN : Lsions multiples (pantage, cassure de brin, oxydation de bases) => mutation. 65 6. Principaux cancrogne Agents Chimiques 2. Cancrognes pigntiques :
66 6. Principaux cancrogne Agents Chimiques Co-Cancrogne Les promoteurs
Aggravent les effets des cancrognes gnotoxique en cas dadministration simultane: Augmentation de la concentration de linitiateur ; Augmentation de labsorption, de la bioactivation, diminution dlimination. Pertirbation de la fidlit de la rparation de lADN.
Potentialise les effets des initiateurs. Stimulation de la prolifration cellulaire : phnobarbital, thio- ure. Cytotoxicit : CCl4. Inhibition des communication intercellulaire. Immunosuppression. Loxyde ferrique ou lamiante favorise la recapture cellulaire des cancrognes. Alcool : modification de la permabilit des membranes cellulaires ce qui facilitera le passage des cancrognes. Modification du statut nutritionnel : suceptibilit au cancer (perte de la capacit antioxydante).
La cible de ces cancrogenses est lADN soit :
Directement par altration des bases, destruction du dsoxyribose, ruptures des brins dADN.
Ou indirectement par radiolyse de leau.
67 6. Principaux cancrogne Agents Physiques
Les altrations gntiques des cellules peuvent tre secondaires l'incorporation (intgration) du gnome viral dans le gnome cellulaire. Ex : Papillomavirus.
68 6. Principaux cancrogne Agents Biologiques
Le lien de causalit directe entre une substance dsigne comme cancrogne et la production dun cancer avr est extrmement difficle tablir en raison des facteurs suivant: 69 1. Temps de latence : la tumorigense demande une dure de 20 40 ans, alors que linitiation est un phnomne prcoce. Cad le cancer est considr comme une pathologie diffre point de dpart prcoce lexception des tumeurs nonatales. 2. Incertitudes sur un seuil daction cancrogne : manque de connaissance des effets des trs faibles doses rptes et limportance du fractionnement des doses peut faire aujourdhui douter de la ralit dun seuil. 3. Effets alatoire des initiateurs : seuls quelques gnes critiques (oncogne, gnes suppresseurs, gnes anti- apoptotiques) paraissent vritablement la base de la cancrogense. La majorit des gne altrs par les initiateurs ne reprsenteraient quun piphnomne.
70 4. Implication forte de lhridit : le polymorphisme des gnes impliqus dans les biotransformations mtaboliques et dans la rparation de lsions de lADN peut intervenir respectivement dans lhypersensibilit laction des cancrognes et dans la prdisposition au cancer. 5. Implication forte des mcanismes associs acquis: ex : inhibition, induction des enzymes mtaboliques (phase I et II) et des enzymes de dtoxification des expces radicalaires, mcanisme dimmunodpression (notamment les NK), affections associs (HBV, HBC, CMV), et des dpletion en glutathions (1). 71 72 6. Principaux cancrogne Classification des substances cancrognes 73 VI. Etude de la cancrogense VI. Etude de la cancrogense 1. Etudes pidmiologiques : BUT: dterminer le lien de causalit entre lexposition un facteur (facteur risque) et leffet sur la sant (dveloppement dun cancer) chez la population. 2. Etudes exprimentales BUT: identifier le potentiel cancrogne dune substance (cancro et mutagense): in vivo ou in vitro pour en estimer le risque chez lHomme (13). 74 VI. Etude de la cancrogense 1. Epidmiologiques : A. Etudes prospectives : Mesure de lexposition AVANT la survenue de lvnement exposition antrieure ltude Ex: mesure de la consommation journalire de tabac et observation de la survenue de cancer au cours du suivi des sujets. B. Etudes rtrospectives : Mesure de lexposition APRES la survenue de lvnement. Exposition postrieure ltude Ex: demande de la consommation de tabac des 10 dernires annes des sujets ayant dj un cancer (13). 75 VI. Etude de la cancrogense
2. Etudes exprimentales : A. Etude long terme ; B. Tests de dpistage rapide; C. Test de cancrogense limite ; D. Les biomarqueurs ; E. Les marqueurs tumoraux. 76 VI. Etude de la cancrogense 2. Etudes exprimentales : A. Etude long terme : OCDE 451 tude de cancrogense : Principe : La substance dessai est administre quotidiennement diffrents groupes d'animaux, pendant la plus grande partie de leur vie, des doses progressives et habituellement par la voie orale.
Les animaux sont observs attentivement pendant la priode d'administration afin de dceler d'ventuels signes de toxicit et le dveloppement de lsions noplasiques. Les animaux qui meurent ou sont sacrifis en cours d'essai sont autopsis et, au terme de l'essai, les animaux survivants sont sacrifis et autopsis. 77 VI. Etude de la cancrogense 2. Etudes exprimentales : A. Etude long terme : OCDE 451 tude de cancrogense : 1. Espce : rongeurs. 2. Nombre et sexe : au moins 50 de chaque sexe. 3. Groupe de dose : au minimum 3 goupe de dose et un groupe tmoins. 4. Administration : La substance tester est normalement administre par voie orale, soit dans la nourriture ou l'eau de boisson, soit par gavage. Peut aussi se faire par inhalation ou par voie cutane. 5. Dure : administration quotidienne 7/7 (par inhalation 6H/jr 7/7) pendant 24 mois pour le rat, 18 mois pour la souris. 78 VI. Etude de la cancrogense 2. Etudes exprimentales : A. Etude long terme : OCDE 451 tude de cancrogense : 6. Observation : Un examen de la morbidit ou de la mortalit est effectu quotidiennement. Poids corporel, consommation de la nourriture, de leau, et autres mesures. Examens dhmatologie, biochimie clinique, et autres mesures. Examen macroscopique des organes ; Examen histologique. 79 VI. Etude de la cancrogense 2. Etudes exprimentales : B. Test de dpistage rapide : 1. Tests pour cancrogense / mutagense
Mme si les mutagnes ne sont pas tous cancrognes la relation entre les deux est si troite que les tests de mutagense sont effectues frquemment pour le dpistage rapide des potentialits cancrignes des produits.
De nombreux test sont dvelopper pour la recherche : - Des lsions dADN (formation d'adduits, rupture des brins de DNA) ; - Des mutations ; - Des lsions chromatiniennes (aberrations, change, formation de micro noyaux). 80 VI. Etude de la cancrogense 2. Etudes exprimentales : B. Test de dpistage rapide : 1. In vitro : Test sur bactrie (test dames) : Utilise Salmonelle typhi His (-) la suite dune mutation elle devient His (+) => Pousse en milieu sans histidine. Ce test est facile et relativement peu coteux mais il est inutile en cas des substances haute activit bactricide ou bactriostatique. Testes sur les champignons : Tests de mutation gnique avec saccharomyces cervisiae adnine dpendante , en tat normal- champignon blanc) , mutation ; (champignon rouge).
81 VI. Etude de la cancrogense 2. Etudes exprimentales : B. Test de dpistage rapide : In vitro : Test sur cellules de mammifres en culture :
Tests sur lymphoblastes humains ,lymphomes de souris : Exp : cellule de lymphome de souris sont htrozygote au niveau du locus TK+/-, sous laction dun mutagne TK -/-. Tous les deux peuvent se dvelopper dans un milieu de culture normal mais le type TK-/- se dveloppera aussi dans un milieu contenant du 5-bromo-2-deoxyuridine. 82 VI. Etude de la cancrogense 2. Etudes exprimentales : B. Test de dpistage rapide : In vitro : Test des micronucleus : Repose sur lexistence dans certaines cellules rouges des granules de chromatine appels corps de Howell-Jolly. Le test de micronucleus utilise en principe lamplification de ce phnomne par des agents clastognes des chromosomes. On analyser le nombre des rythrocytes polychromatiques.
83 VI. Etude de la cancrogense 2. Etudes exprimentales : B. Test de dpistage rapide : In vivo : La ralit dun effet mutagne qui a apparat dans des testes sur les bactries ou mme sur culture de cellules des mammifres est trs alatoire .Cest qui fait la valeur des testes in vivo. Lanalyse des caryotypes la mtaphase : Consiste traiter les animaux par une substance et aprs un certain temps on examine au microscope les chromosomes dun tissu division active aprs blocage du stade anaphase, parmi les cellules observs les lymphocytes circulants chez le rat.
84 VI. Etude de la cancrogense 2. Etudes exprimentales : C. Test de cancrogense limite:
1. Tumeur de la peau de la souris : La peau de la souris rpond par la formation de carcinomes et des papillomes des applications topiques des produits chimiques dfinis par la prsence des enzymes capables de convertir les molcules en mtabolites actives. 2. Adnome du poumon de la souris de souche A : Des vidences positives de cancrogense peuvent tre obtenues environ 24 semaines avec quelques produits. 3. Foyers hpatiques de rat : On a montr lapparition des foyers distincts avant le dveloppement des hpato carcinomes. Des modifications enzymatiques peuvent tre dtectes chez les rats. Ces foyers peuvent tre observs dans les trois semaines qui suivent lexposition ; et sont frquents aprs 12-16 semaines. 85 VI. Etude de la cancrogense 2. Etudes exprimentales : D. Biomarqueurs : Bio marqueurs dexposition dinitiation : Les adduits dADN peuvent tre mis en vidence et quantifis avec un cancrogne radio marqu. Linitiation peut tre aussi dtermine*. Cette procdure a t applique la dtermination de lexposition laflatoxine B1, au benzo *a+ pyrne et aux nitrosamines. Bio marqueurs de promotion : De nombreux changements biochimiques ont t constats, ces changements comprennent laccumulation de lactivateur du plasminogne et une synthse accrue de prostaglandine. Des activits enzymatiques (G6P et ATP) diminuent, dautres augmentent ( gamma glutamyl transpptidase**).
86 VI. Etude de la cancrogense 2. Etudes exprimentales : E. Marqueur tumoraux : Les marqueurs peuvent tre doss dans le sang ou dans les urines du patient pour aider au diagnostic ou, de prfrence, lors de la surveillance d'une tumeur. Ils peuvent galement tre dtects sur les coupes histologiques dans les tissus tumoraux (grce au dveloppement des techniques d'immunohistochimie), prlevs par biopsie ou lors d'interventions chirurgicales
Exemples de marqueurs tumoraux Cancer de la prostate : PSA ; Cancer testiculaire : a FP ou b HCG ; Cancer du pancras : CA 19-9 ; Cancer sein : CA 15-3 ; Cancer ovarien : CA 125 ; Cancer colo-rectal : ACE et CA 19-9.
87 IV. CONCLUSION : La dcouverte et la comprhension des mcanisme de la cancrogense ouvre la voie pour : La prvention : par soustraction de lexposition un carcinogne exogne chez les sujets risque. Le dpistage : des sujets risque + surveillance adapte en vue dun diagnostic prcoce et meilleur pronostic. Les thrapeutiques et les recherches sont en plein essor pour dbrancher sur de nouvelles stratgies thrapeutiques comme la thrapie gnique. 88 Beaucoup de vaccins et de mdicaments ont t tests, et des milliers d'essais thrapeutiques effectus, partir des cellules prleves sur Henrietta Lacks, une jeune femme noire amricaine morte dans la misre en 1951, l'ge de 31 ans, d'un cancer du col de l'utrus. Ce sont les cellules de ce cancer qui se sont avres immortelles dans les cultures de laboratoire et qui ont permis d'valuer nombre de produits de sant destins l'homme. 89 Bibliographie : (1) OMS. (2) Le Monde du 17.03.2014. (3) Alain viala, Alain Botta, Toxicologie, 2 e dition, 2007. (4) 12. Omar DAHMANI, Dr Amal BELCAID, Dr Ouafa EL AZZOUZI, Dr Hayat EL HAMI, la cellule cancreuse proprits et morphologie.www.chufes.ma (5) 13. Fabrice Nesslany, Etude de cancrogense. Master 2 Toxicologie, universit Paris Descartes. (6) 17. Astrid Livre et al. La voie de signalisation RAS/MAPK. Cancro dig. Vol. 2 N 1 - 2010 - 38-42. (7) 18. Omar DAHMANI, Dr Amal BELCAID, Dr Ouafa EL AZZOUZI, Dr Hayat EL HAMI. Oncognes et gne suppresseurs. www.chufes.ma. (8) 15. R. de Crevoisier, Cancrogense, dveloppement tumoral, classification. Dpartement de Radiothrapie, Centre Eugne Marquis. Fevrier 2010.