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c
Fotn = Paquete de energa
Una radiacin electromagntica de frecuencia
determinada () no puede adquirir ni ceder la energa
que transporta ms que en cantidades discontinuas,
que son mltiplos de una cantidad elemental E (cuanto
o fotn).
Se cumple que:
E = h . (h = 4,1356.10
-15
eV.s)
Un fotn es un paquete de energa equivalente a una partcula de
energa cintica h..
h = constante de Planck
Espectro electromagntico
MIL MILLONES UN BILLON
10 eV
1 keV
100 keV
10 MeV
1.000 MeV
ESPECTROSCOPA
ABSORCIN MOLECULAR
ESPECTROFOTOMETRA
El movimiento de los electrones de un
nivel a otro est acompaado de una
absorcin y emisin de energa hasta
regresar a su estado basal.
ENERGA DE UV - VISIBLE
MOV. ELECTRNICO
ULTRAVIOLETA - VISIBLE
La espectroscopia de absorcin UV-Vis involucra la
absorcin de luz UV/visible por parte de una molcula
promoviendo el paso de un electrn desde un orbital
molecular fundamental a un orbital excitado.
La separacin energtica entre estos orbitales
moleculares corresponde a las longitudes de onda del
visible.
ESQUEMA GENERAL DEL EQUIPO
HAZ SIMPLE
Lmpara
Mecla de
Monocromador
separa la luz
Colimador
selecciona radiacin
Prisma
muestra
Fotomultiplicador
Seal
elctrica
ESQUEMA GENERAL DEL EQUIPO
DOBLE HAZ
Wolframio:Visible
Deuterio: UV
Seal
elctrica
blanco
muestra
El espectrmetro UV-Vis registra las longitudes de onda
donde ocurre la absorcin y la cuantifica
luz UV
DETECTOR
cubeta
muestra (en solucin)
El espectro se registra
Absorbancia (A) vs.
longitud de onda ()
CURVA ESPECTRAL
CURVAS
ESPECTRALES
ANLISIS CROMATOGRAFICO
Alcaloides
Compuestos
fenlicos
Compuestos
fenlicos
Compuestos
fenlicos
Revelador: FeCl
3
Revelador: Reactivo
Dragendorff
Ejemplo
Extracto de
hojas de S.I.
CROMATOGRAFA A ESCALA
PREPARATIVA
CURVA ESPECTRAL
Figura 1. M5. 5, 7- dihidroxi- 6- metoxi flavona
M5: : 270, 310 nm
CROMFOROS:
Es una molcula orgnica que introducida en
una sustancia incolora, le transmite color.
ESPECIES ABSORBENTES
MOLCULA INCOLORA + CROMFORO CROMGENO
TABLA ABSORBANCIA CROMFOROS MS COMUNES
AUXCROMOS:
ESPECIES ABSORBENTES
CROMGENO + AUXCROMO COLORANTE
CLASES:
-OH
-NH
2
COLORANTE: Es toda molcula qumica que tiene
la propiedad de teir o entintar a estructuras
qumicas naturales o artificiales.
- COOH
- SO3H
- Br
2
- Cl
2
INTENSIDAD Y POSICIN EN LAS BANDAS DE
ABSORCIN
A mayor conjugacin de sistemas aromticos la absorcin se
desplaza al visible
Este
compuesto es
de color
anaranjado
Desplazamiento
batocrmico
CURVA DE CALIBRACIN
A
B
S
O
R
B
A
N
C
I
A
CONCENTRACIN
Y
X 0.0
0.5
1.0
1.5
2.0
Sustancia Estndar.
Logitud de Onda Optima.
Solvente Adecuando.
Instrumento Calibrado.
Y = aX + b
a = pendiente.
b = punto de corte.(0)
r = regresin lneal(1)
CURVA DE CALIBRACIN
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a
Concentracin
A
CURVA DE CALIBRACIN DEL ETANOL
0
0.05
0.1
0.15
0.5 1 1.5 2 2.5 3
CONCENTRACIONES (mg/mL)
A
B
S
O
R
B
A
N
C
I
A
S
(
n
m
)
Y = 0,0398X + 0,0012
B = 0,218
1.9
GRACIAS