Regulacin (recproca) de la polarizacin Th1 y Th2 Clulas Th3 y Tr1 en el GALT: generacin de tolerancia Clulas T CD4+ reguladoras (Treg): tipos, subtipos, caractersticas diferenciales y modo de accin Linfocitos T cooperadores: generalidades Los linfocitos T CD4, o T cooperadores (Th), son una pieza central en el control y la regulacin de la respuesta Inmune frente a la agresin por un patgeno. Adems de por su estado funcional (vrgenes o de memoria), los linfocitos Th se subdividen en al menos 2 grupos atendiendo a las citocinas que secretan.
Generalmente, las clulas Th1 promueven respuestas celulares, en tanto que las Th2 promueven respuestas mediadas por anticuerpos. Normalmente, frente a un determinado patgeno, las respuestas no suelen ser puras Th1 Th2, aunque suele predominar uno de los tipos. Autocontrol y control cruzado Citoquinas implicadas en la regulacin cruzada Th1-Th2 (o reciproca) Th1 son: IL-2, IFN- y TNF-. (mayoritariamente) Th2 producen: IL-4, -5, -10,-13 y TGF-. IL-2: es el factor estimulante de linfocitos T ms importante. Se activan y proliferan tanto los linfocitos Th (Th1 y Th2) como los linfocitos Tc (citotxicos).
IFN-: Activa a los macrfagos para mejorar la presentacin de antgeno, activa a los linfocitos NK para que ejerzan su accin citotxica sobre clulas infectadas. Promueve, en linfocitos B, el cambio de inmunoglobulinas a IgG1, 2 y 3.
TNF-: Recluta ms macrfagos en lazona infectada y regula su accin, eliminado (es una toxina) los que no son competentes.
IL-4 en solitario: Promueve, en linfocitos B, el cambio de clase a IgE (y en menor grado a IgG4). La IgE sintetizada promover la degranulacin de mastocitos.
IL-4 e IL-13: Promueven, en linfocitos B, el mantenimiento de la clase IgM. La IgM es buena activadora del sistema de complemento.
IL-5: Atrae eosinfilos a la zona y los activa
IL-10 y TGF-: Esta ltima promueve, en linfocitos B, el cambio de clase a IgA. Adems, ambas citocinas han sido implicadas en diferentes procesos de regulacin/supresin de la respuesta inmune. T-regs T-regulatorias constituyen un grupo esencial de linfocitos T encargados del mantenimiento de la tolerancia perifrica, la prevencin de enfermedades autoinmunes y la limitacin de enfermedades inflamatorias crnicas. Teniendo en cuenta la importancia de la tolerancia perifrica, las clulas T-regulatorias seran componentes cruciales en el escenario fisiopatolgico de los procesos autoinmunes.
"clulas T reguladoras" se refiere a clulas que activan o suprimen la funcin de otras clulas. Aparentemente, controlan el desarrollo de enfermedades autoinmunitarias (lupus, tiroiditis, diabetes tipo I y enfermedad inflamatoria intestinal entre otras) Los linfocitos T reguladores pueden desarrollarse tanto en el timo como en la periferia. De sta manera, los linfocitos pueden agruparse en 2 subgrupos:
Qu es CD25? Qu es foxP3?
T-regs naturales ( LT CD4+ CD25+) 5 a 10 % Mecanismo de supresin directo: se lleva a cabo por contacto clula-clula, y est relacionado con el aumento de molculas CTLA-4. Los linfocitos Treg tienen una alta expresin de CTLA-4 las cuales proporcionan seales inhibitorias que derivan en la inactivacin de clulas efectoras. T-regs inducidos (LT CD4+ CD25- ) variable Mecanismo de supresin indirecto: por secrecin de citoquinas inmunosupresoras
-. Con dos poblaciones distintas a) TH3 b) TR1 Otros mecanismos: T-reg pueden secretar perforinas y granzimas e inducir la apoptosis de los linfocitos efectores. Adems, los linfocitos Treg secretan galectina-1 la cual tiene la capacidad de inducir apoptosis en linfocitos T (En relacin a esto, se han identificado sub-poblaciones de T-regs que expresan granzimas)
Fenotipo de clulas T reguladoras (Treg) Aproximadamente del 5 al 10% de las clulas T CD4+ perifricas expresan constitutivamente CD25+. CD25 no parece ser un marcador exclusivo de las clulas Treg, ms bien refleja una absoluta dependencia de la IL-2 para su funcin y mantenimiento perifrico, debido a que no proliferan en presencia de antgenos o anticuerpos contra CD3. En ausencia de la IL-2 exgena, las clulas TCD25+ estimuladas suprimen la proliferacin tanto de las clulas T CD4+ como de clulas T CD8+ por una reaccin dependiente de secrecin de IL-10 y TGF-. En ste sentido,son clulas que inhiben la respuesta inmune al modular la actividad de otros tipos celulares, como: linfocitos T CD4+ y CD8+, clulas presentadoras de antgenos (APCs), macrfagos y clulas NK. Importantes: marcadores de membrana
-. FoxP3 (factor de transcripcin nuclear) y LAG-3 (gen 3 de activacin linfocitaria). Una caracterstica importante que ha sido evaluada en estas clulas es la accin de los corticoides, haciendo referencia al receptor de la neuropilina-1 como un receptor importante en la angiognesis (formacion de vasos sanguneos) y activacin de clulas T- reg. . CTLA-4 (Antgeno-4 asociado al Linfocito T Citotxico): es una molcula expresada en la superficie de la mayora de los linfocitos T activados para estrategias teraputicas (frmacos)
Citoquinas importantes
IL-2 secretada por clulas T, con alta actividad proliferativa, con accin autocrinaparacrina. Acta como factor de crecimiento de los linfocitos T, induce todos los tipos de subpoblaciones de linfocitos y activa la proliferacin de linfocitos B. La IL-2 es fundamental para los linfocitos Th2 y para la proliferacin y diferenciacin de las clulas Treg, cuyo receptor conocido como CD25, se puede encontrar tanto en las clulas T efectoras, como en las clulas Treg de memoria. La IL-2 tambin interviene en la reaccin inflamatoria estimulando la sntesis de interfern, induce la liberacin de IL-1, TNF-alfa y TNF-Beta. IL-2 es necesario para el establecimiento de la memoria inmunitaria celular, as como para el reconocimiento de autoantgenos y antgenos forneos. IL-10 (anticitoquina) No siempre es necesario el estimulo de IL-10 para que las clulas Treg sean activadas, ya que para ello fueron clasificadas en clulas Treg naturales y Treg inducibles . Los efectos supresores de las clulas Treg son dados por el contacto clula-clula en un proceso dependiente de la sealizacin del CTLA-4 o por citoquinas tales como el TGF- (Proceso puede ser bloqueado por IL-6) La IL-10 es una citocina fundamental asociada con la generacin de respuestas inflamatorias fuertes (Th1), capaces de eliminar ciertos agentes patgenos, previniendo as inmunopatologa y mortalidad. liberada principalmente en Th1 vigorizadas es liberada por celulas de la inmunidad innata en ves de linfocitos Treg CD4+CD25+ FOXP3+
TGF- pertenece a una superfamilia de factores de crecimiento. Es una protena homodimrica, producida por una gran variedad de clulas, como plaquetas, clulas endoteliales, linfocitos y macrfagos. Se sintetiza como un precursor inactivo, que debe ser activado proteolticamente para generar la protena activa, se une a dos receptores celulares (tipo I y II) con actividad serina-treonina kinasa, y desencadena la fosforilacin de factores citoplsmicos denominados Smads, de los que existen diferentes formas.
Los Smads fosforilados se unen a Smad-4 para formar heterodmeros que entran en el ncleo y se asocian a otras protenas de unin a ADN para activar o inhibir la transcripcin de genes especficos. TGF- tiene actividad pleiotrpica, a veces opuesta en funcin del tipo de tejido afectado y el tipo de dao. En la mayora de las clulas epiteliales, TGF- es un inhibidor del crecimiento, ya que promueve la expresin de inhibidores del ciclo celular de las familias Cip/Kip e INK4/ARF. En cuanto a las clulas del mesnquima, el efecto de TGF- depende del entorno, pero puede promover la invasin y la metstasis durante el crecimiento de un tumor. A menudo, durante el desarrollo de un tumor se pierde TGF-, lo que proporciona una ventaja adaptativa a las clulas tumorales. TGF- tiene una fuerte accin antiinflamatoria, pero puede amplificar algunas funciones inmunes. Los ratones knock-out para TGF-1 presentan defectos en los linfocitos T reguladores, lo que genera una inflamacin extensa con abundante proliferacin de linfocitos T y diferenciacin de CD4+ en linfocitos "helper" Th1 y Th2. Tipos y subtipos de clulas T CD4 reguladoras Ihibicion de la cascada inflamatoria L Th Las clulas T-reg inician su funcin efectora en el momento en que la clula presentadora de antgeno (CPA), se une al linfocito T regulador mediante la expresin de CD80 (B7 1), CD86 (B7 2) y CTLA-4, CD28, respectivamente. Despus del contacto, los linfocitos T-reg sintetizan el gen Foxp3, el cual compite con el factor nuclear de clulas T activadas (NFAT) en la porcin 5', en la regin promotora de genes que codifican para la IL-2, IL-4, TNF y GM-CSF, conllevando a la inhibicin de la activacin de la cascada inflamatoria asociada al reclutamiento y proliferacin de los linfocitos Th. Poblaciones de clulas reguladoras
Clulas T CD4+ productoras de factores solubles TGF-1 (Th3), capaces de inhibir el desarrollo de algunas enfermedades autoinmunes.
Clulas Treg CD4+ tipo 1 (Tr1), productoras de altos niveles de IL-10 que inhiben respuesta de clulas Th1.
Clulas CD8+CD28- con actividad supresora, clulas T asesinas naturales cuya actividad depende del contacto fas/fasL (NKT).
Clulas T , con una importante actividad reguladora. (tolerancia)
Clulas Treg CD4+, caracterizadas por una alta expresin de CD25+ (receptor de IL-2 cadena ) llamados Treg CD4+CD25+, que se encuentran tanto en timo como en sangre perifrica y estn involucradas en los mecanismos activos de tolerancia perifrica de clulas T autorreactivas, las que han escapado de la seleccin tmica. Clulas dendrticas tolerognicas estimuladas con Galectina-1 son capaces de actuar como 'proyectiles silenciadores' cuando son administradas teraputicamente.
T-regs Profecionales se desarrollan en el timo, y son el resultado de la maduracin de clulas T especficas de antgeno. Una caracterstica importante es que son de larga vida, especializadas en la prevencin de reacciones autoinmunes. Las clulas Treg naturales, por su parte, se desarrollan en el timo durante los estados tempranos de desarrollo fetal. La segunda subpoblacin denominada clulas T reguladoras inducibles o adaptativas (Tr1, Th3 y otras clulas,) se desarrollan como consecuencia de la activacin de clulas T maduras bajo condiciones particulares de exposicin subptima de antgenos o coestimulacin T-regs naturales ( LT CD4+ CD25+ foxP3+) 5 a 10 % de la poblacin de LT CD4+ expresa CD25 Se autorregulan contra los ppticos propios
Mecanismo de supresin directo: se lleva a cabo por contacto clula- clula, y est relacionado con el aumento de molculas CTLA-4. Los linfocitos Treg tienen una alta expresin de CTLA-4 las cuales proporcionan seales inhibitorias que derivan en la inactivacin de clulas efectoras.
T-reg inducibles Son inducidas en la sangre perifrica por la conversin de clulas T inmaduras CD4+ CD25- en presencia de un microambiente particular. Generadas por estimulacin antignica bajo condiciones especiales en la periferia, las clulas Treg inducibles, denominadas tambin clulas reguladoras adaptativas, expresan el CD25 durante el curso de una respuesta inmunolgica normal, pero de manera variable. Esta subpoblacin celular incluye dos subconjuntos similares, estas son las clulas Th3 y Tr1, las cuales difieren en la secrecin del factor de crecimiento transformante beta (TGF-) e IL-10, respectivamente. A diferencia de los clones celulares Tr1, las clulas TCD4+CD25+ inducibles expresan significativamente altos niveles de CD25, no proliferan en respuesta a citocinas Clulas Th3: Participan en la inmunidad de las mucosas deprimiendo o controlando las respuestas inmunitarias. La carencia de clulas Th3 est vinculada con enfermedad autoinmune intestinal. Las clulas Th3 producen IL-4, IL-10 y TGF-. (Th3 asociada a tolerancia oral (mecanismo para inducir tolerancia) asociado a la administracin oral del antgeno ha permitido en muchos casos prevenir el desarrollo de artritis, anafilaxia, diabetes y encefalitis autoinmunes en diversos modelos experimentales )
La IL-10 suprime las respuestas de clulas T directamente al reducir la produccin de IL-2, TNF-, e IL-5 por las clulas T, y de manera indirecta al inhibir la presentacin antignica reduciendo la expresin de molculas MHC y molculas coestimuladoras por las clulas presentadoras de antgeno
El TGF- (factor de crecimiento transformante beta) bloquea la produccin de citocinas por las clulas T, la divisin celular y la capacidad citoltica.
Produce factor transformante de crecimiento (TGF-) prioritariamente en tubo digestivo. (Tambien algo de IL-10). Son dependientes de TGF-
Clulas TR1: A diferencia de las clulas Th3, su produccin de citoquinas se encuentra limitada al factor de crecimiento transformante beta, lo cual permite diferenciarlas de las clulas anteriormente mencionadas.
Es importante destacar que el desarrollo de linfocitos T reguladores naturales se favorece cuando existe una abundancia relativa en el medio de TGF-, en cambio, en el caso de los linfocitos T reguladores adaptativos( clulas TR1 y Th3) su desarrollo se ve favorecido por una abundancia relativa de IL-10
Los linfocitos Treg son capaces de impedir la activacin y proliferacin de linfocitos TCD4 colaboradores, TCD8 citotxicos y de linfocitos B, por tanto constituyen un elemento fundamental dentro de la regulacin del sistema inmunolgico CD4+ CD25+ FoxP3+ Naturales o inducibles por citoquinas: (Actan por contacto clula-clula pero tambin dependen de la produccin de citoquinas como IL-10 y TGF-)