UNIVERSIDAD PRIVADA DE TACNA FACULTAD DE INGENIERA ESCUELA PROFESIONAL Tacna-Per 2014 CURSO AGROINDUSTRIA Y CIENCIA DE LOS ALIMENTOS INTRODUCCION La finalidad de un buen alimento es de mantener el estado de buena salud del ser humano (animales cuando se habla de piensos). La composicin del ser humano da una idea de las necesidades nutritivas. El papel de los alimentos consiste en reponer el desgaste de estos alimentos, as como de proveer la energa necesaria para el normal desarrollo de procesos mecnicos y bioqumicos de cuerpo. DEFINICION DE ALIMENTO Alimento es cualquier sustancia natural o sinttica que contenga uno o varios de los principios que la qumica a catalogado, como hidratos de carbono, grasas, protenas, vitaminas y sales orgnicas. Se define como alimento a cualquier sustancia que introducida en la sangre, nutre, repara el desgaste y da energa y calor al organismo, sin perjudicarlo ni provocarle perdida de su actividad funcional. IMPORTANCIA DE LA CIENCIA Y TECNOLOGIA DE ALIMENTOS El que est nutrido a medias, slo a medias vive (FAO, 1966). Una boca que se alimenta significa poder disponer de dos brazos, cuyo trabajo, si es intenso y eficaz, logra alimentar 4 bocas ms (Baade, 1964). Los grandes progresos que ha experimentado la Tecnologa en todos los campos habran sido imposibles sin los avances simultneos de la Ciencia actual. La enseanza de la Ciencia de los Alimentos es fundamental como nexo entre la Bioqumica y la Nutricin, pues aporta el concepto de que los alimentos son fuentes de todos los elementos indispensables a la vida celular.
FUNCIONES DE LOS ALIMENTOS
Energticos: carbohidratos y grasas. Plsticos o estructural: protenas Reguladores: minerales y vitaminas Reserva: grasas. PRINCIPALES NUTRIENTES DE LOS ALIMENTOS Los principales nutrientes son: 1. Agua 2. Protenas 3. Grasas 4. Hidratos de carbono (incluyendo fibra) 5. Minerales( cenizas) Por tal la determinacin de la calidad de un alimento pasa por la caracterizacin exacta de un alimento. EL AGUA, ACTIVIDAD DE AGUA Y CALOR DE COMBUSTION-CALORIAS Lcteos: nutrientes cada 100 gramos Leches Cal/100 g Carbohidrat os Proteinas Grasas Leche descr. en polvo 35.3 5.1 3.5 0.1 Leche entera 57 4.5 3 3 DETERMINACIONES FISICOQUMICAS EN LOS ALIMENTOS 80 a 95% de agua 50 a 80% de agua TEORIA DE LA INSPECION POR MUESTREO Para asegurar la calidad, es necesario incorporar la calidad prevista en cada una de las etapas, desde el diseo del producto hasta la produccin a nivel industrial. Adems es necesario inspeccionar tanto materias primas, productos intermedios y productos terminados para confirmar si su nivel de calidad cumple o no el objetivo especificado, y separar los defectuosos si los tuviera. La inspeccin por tanto, puede aplicarse en las diferentes etapas del proceso; pero cuando el propsito de la inspeccin es la aceptacin o el rechazo de un producto, con respecto a estndares predefinidos, el tipo de inspeccin se conoce como muestreo para aceptacin. ASEGURAMIENTO = PREVENCIN + DETECCIN La Norma ISO 9000 define la inspeccin como: Accin de medir, examinar, ensayar, verificar una o ms caractersticas de un producto o servicio, y de compararlas con los requisitos especificados con el fin de determinar su conformidad. DEFINICIONES a. Lote.- Conjunto de unidades de producto, del que se extrae una muestra para inspeccin, con objeto de determinar su conformidad con los criterios de aceptabilidad.
b. Unidad de muestra..- Se compone de una o ms unidades de producto extradas al azar de un lote, sin tener en cuenta su calidad.
c. Inspeccin.- Accin de medir, examinar, ensayar, verificar una o mas caractersticas de un producto o servicio, de acuerdo con los requisitos especificados, con el fin de determinar su composicin. 1.-ACIDIMETRIA Y PH-METRIA La acidez puede ser un factor bsico en la preservacin, como en el caso de algunos alimentos fermentados tales como el yogur, la coliflor fermentada o los pepinillos en vinagre, o tener un papel auxiliar, cuyo efecto se combina con el de otros factores tales como conservadores qumicos, calor o actividad de agua.
La definicin de pH representa la concentracin de iones de hidrgeno.
Es decir, el pH es el logaritmo negativo de la concentracin de protones o iones hidrgeno. En alimentos, las sustancias cidas que interesan son casi siempre cidos dbiles (HA) que se disocian dando lugar a H + y A - . En equilibrio, la relacin entre [H + ] [A - ] y [HA] es una constante (Ka), siendo Ka = [H + ] [A - ] / [HA]. Lo que tambin se puede expresar como [H + ] = Ka [HA]/[A - ] y obteniendo el logaritmo negativo de ambos trminos de la ecuacin, -log H+ = -log Ka -log[HA] + log [A-] pH = pKa + log [A-]/[HA]
PREPARACION DE MUESTRAS PARA DETERMINAR EL PH Y LA ACIDEZ TITULABLE Alimentos Lquidos Jugos de frutas, leche, otras soluciones, etc. Si es necesario extraer el jugo de la fruta. Utilizar el extracto. Si la muestra proviene de soluciones de cubierta como los productos enlatados, realizar un mezclado previo y luego filtrar. Alimentos Slidos Carne, queso, papas, etc. pesar aproximadamente 10g de muestra, aadir 100mL de agua destilada. Para queso la proporcin es de 1:3, licuar, decantar el sobrenadante y filtrar. Utilizar el filtrado para realizar las determinaciones.
PREPARACION DE MUESTRAS PARA DETERMINAR EL PH Y LA ACIDEZ TITULABLE Alimentos de consistencia pegajosa Jarabes, mermeladas, compotas, jugos concentrados forman parte de este tipo de muestras, deben ser desintegradas previamente utilizando un bao mara. Harinas Se debe pesar 10g de harina y disolver en aproximadamente 100mL de agua destilada previamente hervida y libre de CO 2 agitar por espacio de media hora
DETERMINACIN DEL pH EMPLEANDO CINTAS DE PAPEL Tomar una cantidad de aproximadamente 25mL de muestra en un vaso de precipitacin de 50mL previamente preparada de acuerdo a las indicaciones mencionadas anteriormente Introducir directamente en el lquido problema una cinta de papel pH Determinar el pH por comparacin con los estndares de pH indicados en la respectiva caja de las cintas de papel.
DETERMINACIN DEL pH EMPLEANDO EL POTENCIMETRO Tomar mas o menos 25mL de muestra en un vaso de precipitacin de 50mL Introducir directamente el electrodo en la solucin problema y leer el pH Seguir las instrucciones de manejo indicadas por el profesor
DETERMINACIN DE ACIDEZ TITULABLE TOTAL Una vez que las muestras han sido homogenizadas Seguidamente se procede al filtrado utilizando papel filtro watman N
2. A continuacin colocar el filtrado (sobrenadante) en una fiola de 200mL y enrasar Finalmente tomar una cantidad de 25mL aproximadamente y titular con solucin de hidrxido de sodio 0,1 N, usando 2 3 gotas de solucin de fenolftalena.
CON DILUCION: LIQUIDOS OSCUROS Y SOLIDOS SIN DILUCION: LIQUIDOS CLAROS 2.- DENSIDAD Y REFRACTOMETRIA DENSIDAD Las determinaciones densimtricas son simples y de ejecucin rpida, generalmente aplicables a los alimentos lquidos en solucin. Esta determinacin est basada en el principio de Arqumedes Un cuerpo sumergido total parcialmente en el seno de un fluido sufre un empuje de abajo hacia arriba por una fuerza neta desplazando una cantidad de fluido igual al peso del cuerpo Este peso es la fuerza de flotacin total. Algunas veces la gravedad especifica es referida como densidad relativa. La relacin d 4 20 indica medicin de un material a 20C con respecto al agua a 4C.
REFRACTOMETRIA Cuando un rayo de luz pasa de un medio a otro de diferente densidad, el rayo sufre un cambio en su direccin, es decir ste es desviado refractado. El ngulo que forma el rayo incidente con la perpendicular en el punto de incidencia, se denomina ngulo de incidencia (i), mientras que el ngulo entre la perpendicular y el rayo refractado, se denomina ngulo de refraccin (r). La relacin entre el seno del ngulo de incidencia y el seno del ngulo de refraccin, se denomina ndice de refraccin (n). Esta relacin es siempre una cantidad constante para dos medidas dadas, bajo condiciones de luz de la misma longitud de onda y a la misma temperatura de lectura.
3.-HUMEDAD Representa el contenido de agua de un alimento. Se obtiene como la diferencia en peso despus de una deshidratacin en condiciones pautadas. Se expresa en porcentaje de peso perdido.
Para determinarlo, se procede a una desecacin en estufa (opcional de vacio) a 105 C, que se prolonga durante el tiempo necesario para alcanzar la pesada constante. De sta forma se asegura la completa eliminacin del agua evitando la perdida de voltiles o prdida adicional de peso por degradacin de compuestos termolbiles. Existen actualmente diferentes instrumentos para determinar la humedad de una muestra: 1. Determinacin de humedad con horno de microondas 280watts 2. Determinacin de humedad o voltiles en estufa 105 C: 3. Agentes desecantes 4. Destilacin directa(tolueno o xileno) DESECADOR Procedimiento prctico MATERIALES: Harina de trigo. Placas petri. Vasos de precipitados. Estufa regulada a 105 C Microondas Balanza analtica. Esptula Desecadores. PROCEDIMIENTO: Determinacin de humedad o voltiles en estufa 105 C Pesar cerca de cinco gramos de muestra en recipientes previamente tarados e identificado (tres repeticiones en placas petri) Llevar a la estufa a 105 C y luego de aproximadamente tres a cinco horas (peso constante) transferir para el desecador. Enfriar y pesar. Determine la humedad en base hmeda y seca del alimento. 4.-CENIZAS Representa el contenido en sales minerales, aunque sin especificar el cuanto de c/u de ellas. Su germinacin se basa en el uso de un horno mufla a 550 -700C. La muestra pesada se pone en un crisol de platino o de porcelana y se incinera hasta un peso constante. Se recomienda hacer un una pre-evaluacin para determinar el tiempo de pesado optimo. Durante el proceso, la materia orgnica se seca y luego se carboniza y luego se va oxidando desprendiendo: C02, H20,N20,N0,SO2 Los minerales encontrados como cenizas blancas, pueden dividirse en dos clases: ALCALINOS: Provenientes de carbonatos o cidos orgnicos que durante la calcinacin se convierten en xidos alcalinos. Se pueden cuantificar sobre la mezcla de cenizas por valoracin con un cido. NO ALCALINOS: Los provenientes de cloruros, sulfatos , fosfatos que permanecen inalterados durante la incineracin.
Esta relacin es de vital importancia y es caracterstico de muchos alimentos, usado para detectar fraudes.(calcio de la leche etc.). 5.-DETERMINACIN DE GRASAS Son por definicin, la fraccin de los alimentos solubles en disolventes orgnicos. DETERMINACION DE GRASAS
comp. do tejido adipose junt con CH0 y Protein
constituy la parte de los comp estructural de celulas en alim. poden estar en forma visible Repr at 99% los lpid de origen veg e animal bsicamente son esteres de glicerol y de A.G. separad de su fuente original, como: mantequ, tocino, grasas de reposteria, ac.pensal o ser costituyent de alimentos bsico (carne, queso,leche) comp. Solub. solvent orgnicos, no H 2 0 funciones Fuente mas importante de energa de alimentos 9kcal/g En su forma de Trigliceridos Fosfolpidos Colesterol Esteres de colesterol
Fuentes de depsito de energa vehculo de transporte de contribuyen s caract. sensoriais part no aislamiento trmico do organis semillas frutas y animales gusto, palatabilidad sensacin saciedad vitaminas liposolbles contribuye tamben config. do corpo usado en confitera precubr decorativ mono y digliceridos son emulsificantes mo y diglic. Confier fragilidad pasteles no permiten que se hagan duros Extraccion por: 1.- SOXHLET La extraccin se lleva acabo en caliente mediante reflujo del disolvente y debe prolongarse hasta que no pueda extraerse ms. Luego se evapora el solvente y se evala la grasa extrada por pesada. Es expresada generalmente en base seca. La fraccin grasa as obtenida puede contener una extraordinaria variedad de compuestos.
Aplicaciones Alimentos en general no indicado p/ leche Se obtiene fraccin grasa libre p/ poster caracteriz Metodo 2.- Gerber
- Usados para leche (1 8%), leche cida - uso de butirmetro especial - se usa 11 mL de leche - 1 mL de alcohol isoamilico - adicionar a un tubo que contiene H 2 SO 4 (d = 1,82) - Centrifugar x 10 minutos - Enfriar en agua corriente 63C - determinar cantidad de grasa pela altura do tubo - Mtodo mas simple que el anterior - La carbonizacin evitada por alcohol isoamlico, este facilita la separacin de grasa y reduce el efecto de H 2 SO 4
Caractersticas Mtodo 3.- Colorimtrico El lpido es extrado y tratado con una solucin de cido hidroxiamnico alcalinizada HCl Lpido + cido Hidroxiamnico Compuesto colorido (540 nm) FeCl Mtodo muy utilizado en el caso de leches Mtodo de 4.- Bligh Dyer
La muestra es mezclada con cloroformo y metanol en proporcin adecuada para formar un sistema miscible con el agua Luego se adiciona mas cloroformo y agua, separndose en dos camadas La primera camada de cloroformo contiene todos los lpidos La segunda camada de metanol contiene todos los que no son lpidos Los lpidos son purificados luego y pueden ser caracterizados Este mtodo es especial para pescado Pera de decantacin Mtodo de 5.- Bobcoch (Mtodo oficial en USA - 17,6 ml. de leche - 17,5 ml. de H 2 SO 4 (d = 1,80 a 1,83) - se adiciona la muestra en tubos de centrfuga - centrifugar por 10 minutos - luego enfriar a 63C - grasa medida pela altura de lpido separado
Caracterstic as 6.-PROTEINAS Las protenas son compuestos altamente polimerizados, que estn formados por aminocidos. Tambin se unen a componentes no proteicos. Las protenas se encuentran entre los nutrientes ms importantes, junto con los lpidos y los carbohidratos. Adems de su funcin energtica (1 g de protena proporciona 4,1 Kcal al organismo), Macromolculas complejas con 50% de materia seca de la clula. El peso molecular es aproximadamente de 5000 a mayores de millones de DALTONS (CHONS (fe,Cu,P)) La hidrlisis total produce L-aminocidos. CLASIFICACIN: 1.- HOMOPROTEINAS Cadenas de AA 2.- HETEROPROTEINAS Cadenas de AA+ grupos prosteticos(Nucleoproteinas, lipoproteinas, fosfoproteinas, hemoproteinas, metaloproteinas) Composicion de alimentos otros METODOS Los mtodos para la cuantificacin del contenido proteico en alimentos se basan en distintos principios: a) Mtodo de Kjeldahl (determinacin del contenido en nitrgeno).
b)Mtodos espectrofotomtricos:
Reaccin qumica de determinados aminocidos de la protena y posterior medida en el VIS (p.e. mtodo de Folin-Ciocalteu cido fosfomolbdico y fosfovolframico- en el que reacciona fundamentalmente la tirosina). Reaccin qumica del enlace peptdico y posterior medida en el VIS (p.e. mtodo de Biuret en el que se forma un compuesto azul con cobre en medio bsico).
Resumen de mtodos Determinacin de nitrgeno Kjeldahl Reaccin qumica de AA-tirosin. Absorcin Uv de AA aromticos Reaccin qumica del enlace peptidico Fotometriico biuret Folin-ciucalteu 280 nm trip, tir, fen 1.- METODO Kjeldahl REACCIONES BSICAS:
1. Digestin 2. Destilacin 3. Titulacin Materiales: Harina de carne Papel filtro Matraz Kjeldahl Pipetas Bombilla Digestor Kjeldahl Balanza analtica Bureta Soportes Vaso precipitado Reactivos: H2SO4 concentrado Mezcla catalizadora (CuSO4 y K2SO4) H2SO4 0.02N NaOH 50% H3BO3 Indicador (rojo metilo + verde de bromocresol) PROCEDIMIENTO 1. Pesar 1g de muestra (CARNE) contenida de nitrgeno sobre un papel filtro, previamente tarado, envolverlo y colocarlo dentro de un matraz Kjeldahl. (por duplicado). 2. Pesar 0.5g de catalizador (CuSO4 y K2SO4). Y colocarlos dentro del matraz. 3. Agregar 10ml de [H2SO4], colocarlo en el matraz en la campana de gases y someter a digestin, hasta que no haya residuos de carbn y se tenga una solucin transparente(aproximadamente 3 horas). Digestin: R CONH + H2SO4+ CuSO4 (NH4) 2 SO4 + NH4HSO4 + SO2 + CO2 + H2O + CuSO4 + K2SO4
Bisulfato amnico Destilacin: El baln obtenido de la digestin, se agita bien y se traspasa a otro baln. Se aade papel tornasol y se observa que cambia de color ( rojo). Agregar unas gotas de NaOH al 50% y notamos que el papel tornasol cambia a color azul. Luego esta solucin se pasa a una probeta y se enrasa con agua a 130ml. Medir 10ml de cido brico y aadir tres gotas de reactivo mixto. Seguidamente se lleva a destilar. ( se realiza por duplicado). Destilacin:
(NH4)2SO4 + H3BO3 H3BO3 +NH4BO2
Metaborato de amonio Titulacin: Simplemente la solucin se lleva a titular, con HCl al 0.1N Titulacin: NH4BO2 + H2O + HCl NH4CL +
H3BO3 Metaborato de amonio Cloruro de amonio cido trioxobrico (III) CLCULOS: %N = Gastos x N x Peq 10 (muestra) %N = 43.2ml x 0.1 x 14 10 ( 1.0420g) % N = 5.80 % protenas = 6.25 X %N Reemplazando: % protenas = 36.27g. Factores utilizados para la determinacin de protenas. PRODUCTO FACTOR CARNE 6,25 LECHE 6.38 HARINA 5.7 GELATINA 5.55 HUEVOS 6.68 FUENTE: D. PEARSON, 1986. 2.- Mtodo Espectrofotomtrico de Lowry (Folin-Ciocalteau) Por lo general las protenas absorben luz a entre 210 y 280 nm de largo de onda, en el espectro de luz ultravioleta. Como los espectrofotmetros ms comunes en el laboratorio de enseanza miden la luz a partir de 350 nm (espectro de luz visible). Una de las tcnicas ms comnmente usadas es la tincin de Lowery. En esta, se trata la muestra con el tinte Folin- Ciocalteau. Este modifica qumicamente los aminocidos aromticos de forma que absorben luz en el rango de luz visible y pueden ser medidos con el espectrofotmetro comn.
El reactivo de Folin es el cido fosfomolibdico-fosfotungstico, este reacciona de la siguiente manera en la prctica: Protena + Cobre Reactivo de Biuret
Reduccin del reactivo de folin por la protena tratada con cobre, contenido residuos de tirosina, triptfano o fenilalalina. Lectura realizada a 660 nm (estable por 1 hora) NaOH Procedimiento: PREPARACIN DE MUESTRAS: 1. Tomar 50 gramos de frjol y moler una granulometra menor de mesh. Reservar una porcin para determinar de nitrgeno total. 2. Preparar suspensiones de 5%, 10%, 15% y 20% en soluciones de NaCl 0.15M y agitar por 1 hora 3. Centrifugar y medir el volumen del sobrenadante. Retirar una alcuota para determinacin de nitrgeno total (Kjeldahl).
Muestra --- --- 1 5 0,6 = a + bx A = a + b a = 0,1388 b = 1,14
= (A - a ) / b = (0,158232-1,14 ) / 1,8076 = 0,2750 mg A=0.158232 7.-CARBOHIDRATOS Los carbohidratos abarcan uno de los mayores compuestos orgnicos encontrados en la naturaleza, y juntamente con las protenas forman los constituyentes principales en el organismo vivo, adems de ser la mas abundante y constituye la unidad estructural de los polisacridos de mayor importancia. En la mayora de las tablas de composicin de alimentos, los carbohidratos son generalmente determinados como carbohidratos totales y son obtenidos por diferencia. Clasificacin de carbohidratos Monosacridos Glucosa, fructosa, galactosa Disacridos Sacarosa, lactosa, maltosa Polioles Isomaltosa, sorbitol, maltitol Oligosacridos Maltodextrina, fructo-oligosacridos Polisacridos Almidn: Amilosa, amilopectina Sin almidn: Celulosa, pectinas, hidrocoloides. FUNCIONES GENERALES DE LOS CARBOHIDRATOS: Para los seres vivos, los carbohidratos resultan importantes ya que son utilizados como fuente de energa, como reserva energtica o bien, se utilizan en la formacin de estructuras. Entre los carbohidratos que se utilizan como fuente de energa podemos mencionar a la glucosa y a la celulosa; como reserva energtica tenemos al almidn y el glucgeno; en la formacin de estructuras podemos mencionar a la quitina, que participa en la estructura del carapacho o caparazn que cubre a las tortugas y armadillos; en los vegetales, el carbohidrato estructural es la celulosa METODOS DE ANLSIS Entre los mtodos para cuantificar los carbohidratos, est el mtodo FENOL SULFURICO. Cuando los azucares son tratados con cidos fuertes, principalmente cido sulfrico concentrado hay formacin de hidroximetil furfural por deshidratacin que reacciona con una gran variedad de compuestos (fenol) dando un color anaranjado que puede ser cuantificado colorimetricamente. PROCEDIMIENTO MATERIALES: Muestra de alimento (miel de abeja) Balanza analtica Glucosa anhidra Agua destilada Solucin de fenol al 5% (bidestilada) cido sulfrico concentrado Espectrofotmetro PROCEDIMIENTO: Primero se pesa 5g de miel (muestra),luego se disuelve en 100ml de agua, y es llevado a bao mara por 5minutos. Luego se realiza un filtrado y se completa hasta 100ml. el residuo se descarta y al filtrado liquido obtenido se coloca en: RESULTADOS
Nmero Padrn H2O Fenol 5% H2SO4 [] Absorv Absorv. Tubos de glucosa (ml) (ml)* (ml)** (ug/ml) (490 nm) (muestra ) 0.27 1 0,1 0,9 1 5 10 0,22 0.28 2 0,2 0,8 1 5 20 0,29 0.45 3 0,3 0,7 1 5 30 0,42 4 0,4 0,6 1 5 40 0,51 5 0,5 0,5 1 5 50 0,55 6 0,6 0,4 1 5 60 0,62 7 0,7 0,3 1 5 70 0,8 8 0,8 0,2 1 5 80 0,86 9 0,9 0,1 1 5 10 1 --- 1 5 Blanco --- 1 1 5 Se resuelve por regresin lineal: a = 0.122857 b = 0.009130952 r = 0.99 Se trabaja con la muestra 2 = 0.2ml y su Absorvancia es 0.28 y = a + bx (0.28) = 0.122857 + 0.009130952 x x = 17.2099 ug. DILUCIONES: 5/100 1/100 12.5/50 0.2 PORCENTAJE DE CARBOHIDRATOS = 68.8% MTODO VOLUMTRICO DE EYNON Y LANE(AZUCAR REDUCTOR) Con respecto a este mtodo a utilizar, el azcar invertido reduce el cobre de la solucin fehling ( azul) a oxido cuproso insoluble (rojo). El contenido de azucares reductores en la muestra de un alimento es estimado determinndose el volumen de una solucin de azcar desconocida requerida para reducir completamente un volumen medido ( 10 a 25 ml) de solucin fehling. % azucares totales = ( C) + (G) sacarosa + agua = Glucosa + fructuosa 342 + 18 180 + 180 342g. sacarosa --------- 360g azcar invertido x g. sacarosa --------- 1g azcar invertido x = 0.9 GRAMOS DE SACAROSA DETERMINACIN DEL TITULO DE FEHLING: 0.25 g. glucosa 50 ml. de agua destilada X 9.6 ml gasto solucin padrn glucosa X = 0.25g x 9.6 ml 50 ml X = 0.048 g. F = 0.048 g para reducir 10 ml solucin de Fehling DETERMINACIN DE AZUCARES REDUCTORES POR EL METODO ESPECTROFOTOMETRICO DE SOMOGYI- NELSON La glucosa u otro azcar reductor reduce el reactivo cprico alcalino, dando el xido cuproso. Este, en presencia del reactivo arsenomolibdico de Nelson, forma un complejo de oxido de molibdeno de color azul estable cuya intensidad puede ser medida en el fotocorimetro , sigue leyes de Lambert y Beer. procedimiento 1. Pesar 5.0078 gr de miel de abeja y enrasar a 250 ml con agua destilada. 2. Agregar a todos los tubos el reactivo SN1 a todos los tubos 2 ml. 3. De la muestra anterior tomar 0,4 ml. de la muestra aforada a 50 ml. de miel de abeja y completar con 0,6 ml. de agua destilada. 4. Llevar a bao mara los doce tubos y tomar el tiempo cuando empieze a hervir. 5. Los tubos deben de virar de color azul celeste a color xido cuproso como se muestra a continuacin: 6. Dejar enfriar en bao de hielo. 7. Agregar 2 ml. del reactivo SN2 (color amarillo) a todos los tubos. 8. Esperar 5 minutos. 9. Agregar agua destilada hasta completar a 25 ml. 10. Darle vuelta a los tubos para homogenizar. 11. Llenar las muestras para leer las absorbancias a 540 nm. Resultados
Nmer o Padrn H2O Reactivo S- N- 1ml Reactivo S- N-2 ml Concent. Absorv Absorv. Tubos de glucosa (ml) mg (540nm) (muestra) ( ml)
y = a + bx 0.29 = 0.021428571+ 3.5 x x = 0.076734654 mg x = 0.0767 mg Muestra 0,5 ml Diluciones: 5.0078/100 50/100 1/100 0.5 0.0767 mg------- 0.5ml x mg ------- 100 ml x = 15.34 mg 15.34 mg --------1 ml x mg-------100ml x = 1534mg
1534 mg --------50 ml x mg -------100 ml x = 3068 mg
3068 mg x 1 g 1000mg x = 3.068 g 3.068 g -------- 5.0078g miel x g azcar -------- 100g miel x = 61.26 % de azucares reductores