LOS DIEZ MANDAMIENTOS

DE LA ENZIMOLOGIA
QCO: ROSA TERESA
RAMOS FERNADEZ
I N T E G R A N T E S
P A U L S E N C I A A L A R C O N
E D Y K A T E R I N T U I R O C A M A C H O
L U Z V A L D E Z O C H O A
B E T S A B E Z U I G A S A L L O


A
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U N S A A C
AGRONOMA TROPICAL E
INDUSTRIAS ALIMENTARIAS
CARRERA PROFESIONAL DE INGENIERIA EN
INDUSTRIAS ALIMENTARIAS
UNIVERSIDAD Nacional de San Antonio Abad
del Cusco
FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS TROPICALES

Arthur
Kornberg
(Brooklyn, 1918) Bioqumico estadounidense.
Estudi Qumica y Bioqumica en el
neoyorquino City College y Medicina en
Rochester. Perteneci al Public Health
Service estadounidense, de 1942 a 1951,
trabaj en los National Institutes of Helath de
Bethesda y fue profesor en la Universidad de
Washington de St. Louis y de Bacteriologa
en la de Stanford. Se dedic principalmente al
estudio de los enzimas, campo en el que
realiz un descubrimiento de importancia
crucial. Se trataba de la purificacin de la
enzima E. Coli, denominada en la actualidad
ADN polimerasa I, a partir de la molculas de
nucletidos, en ausencia de clulas vivas. En
1959 fue galardonado con el Premio Nobel
de Fisiologa y Medicina, junto a Severo
Ochoa, por sus descubrimientos relativos a la
naturaleza de la vida y de sus procesos de
desarrollo.
PADRE DE LA
BIOQUIMICA

1.Cuenta con la enzimologa para resolver y reconstituir eventos biolgicos

2.Confa en la universalidad de la bioqumica y el poder de la microbiologa

3.No creas nada slo porque puedas explicarlo

4.No mal gastes pensamientos limpios en enzimas sucias

5.No mal gastes enzimas limpias en sustratos sucios

6.Usa la gentica y la genmica

7.Ten presente que las clulas estn molecularmente apretadas

8.Depende en los virus para abrir ventanas

9.Permanece atento al poder de los rastreadores radioactivos

10.Emplea enzimas como reactivos nicos


Con la dependencia cada vez mayor en la genmica y la protemica,
las enzimas no estn aisladas, o incluso ensay la actividad, sino ms bien,
infiere de la secuencia (Una violacin de Mandamiento III).
Las observaciones repetidas lo largo del siglo pasado han apoyado una
dogma que todas las reacciones de una clula son catalizadas y dirigida
por
enzimas. La actividad de una enzima puede ser analizan con precisin,
incluso en un extracto crudo y sus masa determinada en su aislamiento.
Esta fundamental cuantificacin de la medida es a menudo falta en los
ensayos de actividades biolgicas.




La creciente facilidad y la oleada de genoma microbiano
la secuenciacin ha confirmado la extraordinaria
revelacin de que las funciones metablicas bsicas
estn conservadas entre las bacterias y los seres
humanos. Muchas protenas y los mecanismos de
replicacin de Escherichia coli DNA han demostrado
homloga en secuencia y estructura de los en los
sistemas eucariticos
III. No creer en algo slo
porque lo puedo explicar


Este mandamiento Se ha dicho que
"la suerte favorece a la mente
preparada ", pero hay muchos
ejemplos en los que la mente puede
estar muy bien preparados lo que
result ser importante .La sntesis de
ARN y su producto, el ARNm,
muchos aos antes de ser
descubiertos por otros.
Cuando E. coli DNA polimerasa fue
aislado por primera vez, su pureza
fue puesta en duda debido a la
preparacin an contena anmala
actividad DNasa que podra
eliminar los nucletidos al final de
la cadena en crecimiento. Una y
otra vez, un mecanismo que
surgieron ms complejo y
fascinante que el que pareca que
lo explica todo.
El aislamiento y caracterizacin de la ADN
polimerasa dependa del descubrimiento de
los cuatro desoxinuclesidos di-y tri-fosfatos
y seis nuevas enzimas (timidina quinasa, las
quinasas desoxinuclesidos cuatro
monofosfato y exonucleasa III). Adems, el
descubrimiento y aislamiento de la
polimerasa de ADN depende de cuatro
funciones
suministrada por el ADN que se aadi a la
incubacin mezcla.
IV. No pierda el pensamiento limpio en las enzimas
sucia

para explorar las relaciones estructura-
funcin, el la reconstitucin molecular
de un evento biolgico, la posibilidad
de identificacin de los componentes
de los eventos relacionados (Por
ejemplo, la replicacin, reparacin y
recombinacin), un medio para
mutagnesis dirigida, y el uso de este
singular
reactivo en una amplia gama de
bsicos estudios y tecnologas.
El ADN actu como:
una fuente de la accin nucleasa de los
cuatro desoxinucletidos,
como la plantilla para dirigir la asamblea de
los deoxinucletidos en la correcta
secuencia,
el primer fin de extensin de las cadenas,
y como una piscina para proteger y atrapar a
los productos sintticos
frente a la abrumadora actividad de nucleasa
en el extracto crudo.

V. No malgastes enzima limpias en
sustratos sucios
Este mandamiento se basa en mi larga lucha para
encontrar el mecanismo que faltan para el inicio de una
cadena de ADN, algo que la polimerasa de ADN puro,
no poda hacer. La problema era que el sustrato de
ADN necesarios para dirigir el principio fue
irremediablemente sucios, la fuente de ADN, si
microbiana o eucariotas, estaba deshilachada,
fragmentada, gapped y heterogneo. Un problema
importante es la heterogeneidad y la falta de
especificidad de los sustratos de las enzimas. Por
ejemplo, muchas de las protenas quinasas son
analizadas por su capacidad para fosforilar casena,
pero en casi todos los casos, la sustrato fisiolgico es
desconocido
VI. Utilizar la gentica y la
genmica
Esta seleccin puede ser fortalecidos por la promesa
de la transcriptmica, la protemica y la otras
micas. Adems, la misma facilidad con que los
datos se recopilan y sofisticada ha interpretado
desalent el enfoque lento y pesado de la resolucin
de y la reconstitucin de un sistema complejo
enzimtico. ADN matrices, que miden la transcripcin
de la mayora de los genes en un genoma, ni revelar la
abundancia, ni ninguno de los rostros de las enzimas
que codifican. A medida que el clarividente F.G.
Hopkins dijo que en 1931 "(La palabra del bioqumico)
puede No sea el ltimo en la descripcin de la vida,
pero sin su ayuda, la ltima palabra nunca se dijo.

VII. Tenga en cuenta que las clulas
son molecularmente llenas.
La mitad del peso seco de la clula se compone de protenas envasadas
en comunidades altamente organizadas. Las clulas son geles! Tras la
interrupcin de las clulas, hay una dilucin enorme, 20 veces o ms, de los
componentes celulares. Con respecto a las macromolculas, el factor de
dilucin puede ser superada por la adicin de una alta concentracin
de un polmero, tal como el polietilenglicol. Estos polmeros abarcan en
un gran volumen, que excluye las enzimas y otras macromolculas.

La concentracin tambin puede ser obtenida por precipitacin de sales
de las protenas en el extracto y disolver el precipitado en un volumen
reducido.

Tal fue el caso en los ensayos de replicacin en el origen del genoma de E.
coli. , la resolucin y la reconstitucin de eventos celulares en un sistema
libre de clulas .

VIII. Dependen de los virus de abrir las
ventanas
Anteriormente, el estudio de los fagos proporcionan
informacin clave en muchos de los elementos bsicos
de la replicacin del husped cromosoma:
helicasas,topoisomerasas, de unin al ADN
protenas, ARN y cebado de las modificaciones del
ADN. Ahora los avances tecnolgicos que permiten la
introduccin de ADN de los plsmidos o el ADN, incluso
sin recubrimiento se ha reducido la dependencia de los
vectores virales. Sin embargo, los mecanismos
moleculares la reconstitucin de un ciclo de vida viral
que contribuyen al problema mdico de encontrar los
medicamentos y las vacunas necesarias para hacer
frente a los virus.


IX. Ser consciente del poder de
trazadores radiactivos
Esta tecnologa ha sido , de gran valor en las vas de la
cartografa y los mecanismos en todos los sectores de
bioqumica. El mandamiento de uso radiactivos marcadores no se
haba incluido anteriormente, pero ahora hace la lista debido a
que el uso de trazadores radiactivos se ha cado de la moda. Una
de las razones es el temor exagerado de el peligro para la salud,
no slo por las agencias reguladoras que se han aprovechado de
este temor, sino tambin por los cientficos tambin. Los istopos
14C y 3H no plantean ningn peligro imaginable (De 'salida' de
signos en un pasillo contiene diez Curie de 3H), y los otros
istopos se utilizan generalmente en la sub-microcuries los
niveles. Otra razn de la disminucin en el uso de trazadores
radiactivos es que las etiquetas fluorescentes sensibles y
luminiscencia lleg a estar disponible.
para el rastreo de elementos bioactivos en una inequvoca
manera que se puede utilizar tanto in vitro como in vivo.
X. Emplear las enzimas como reactivos
nicos
El uso de enzimas en procesos industriales y como componentes
de los kits para, por ejemplo, el diagnstico clnico, medicina
forense, la apoptosis y la PCR (reaccin en cadena de la
polimerasa) est bien establecido. Pero no hay enzimas
disponibles para identificar y medir la los niveles de compuestos
nuevos en las vas inexploradas de
biosntesis y el metabolismo. Ejemplo la (Poli P) es un polmero
de cientos de fosfato residuos unidos por enlaces anhdrido.
A pesar de su presencia en todas las clulas (bacterias, hongos,
plantas y animales), se considerado, por falta de funciones, como
un "fsil molecular". La mayora de los investigadores que
abordan el problema de P poli toma de mutantes con niveles
alterados de (poli P). Pero hay no eran los fenotipos para guiar la
seleccin de mutantes y las pruebas disponibles eran engorrosos,
insensible y ambiguo. El descubrimiento y purificacin de enzimas
que hacen y de consumo simultneo P abri el camino a la
identificacin de los genes que codifican.
Las lecciones que aprend de 40 aos de
trabajo en la enzimologa del ADN
replicacin y diez ms en el polifosfato
inorgnico han venido de los esfuerzos de
los colegas demasiado numerosos para
mencionarlos. Pero todos nosotros
debemos nuestra gratitud a los Institutos
Nacionales de Salud, para su apoyo y de
nuestros conciudadanos, que pag los
impuestos por ello.

THANKS YOU