CULTIVO DE MUESTRAS CLINICAS

Docentes:
- Carlos Abanto Daz. Microbilogo
- Max Siaden Ortega. Microbilogo
- Juan Giles Saavedra. Mdico

OBJETIVOS
1. Conocer el procedimiento para el cultivo de una
muestra clnica

2. Identificar los microorganismos ms frecuentes
causantes de patologas clnicas

3. Conocer las condiciones para una adecuada
toma de muestra para el cultivo de muestras
clnicas
Periodo
de
incubacin
Periodo
prodrmico
Periodo de
estado
Convales-
cencia
Proceso
Infeccioso
General
HISTORIA NATURAL DE LA
ENFERMEDAD INFECCIOSA
HISTORIA CLINICA:
ANAMNESIS
EXAMEN FISICO
- DX PRESUNTIVO
- EX. AUXILIARES
- TTO EMPIRICO
- INF. FINAL EX AUX
- DX ETIOLOGICO
- TTO DEFINITIVO

INFECCIN URINARIA
Vas urinarias altas
Riones
Urteres
Vas urinarias bajas
Vejiga
Uretra
Pielonefritis
Fiebre
Dolor lumbar
Disuria (ardor al orinar).
Polaquiuria (ir mucho al
bao).
Tenesmo (dificultada para
orinar).
Cistitis
Disuria
Dolor
ETIOLOGIA DE LAS INFECCIONES DE
VIAS URINARIAS
Agentes causantes Gram Negativas
1. Escherichia Coli (80% al 90% de los casos)
2. Klebsiella sp
En pacientes sometidos a instrumentacin , portadores
de catteres urinarios
1. Proteus sp
2. Pseudonoma auruginosa
3. Enterobacter sp.
Agentes Gram Positivos
1. Staphylococcus epidermidis y Enterococcus spp
El diagnstico definitivo se
hace de una ITU se hace
mediante el
UROCULTIVO
Objetivo del urocultivo es
ESTIMACIN CUANTITATIVA DE LAS
COLONIAS
La siembra en las placas se realiza por estra cruzada con
asas calibradas de 4 mm de dimetro y 0.01 ml de
capacidad.





*Hay casos de pielonefritis en los que el nmero de
bacterias es menor de 100 000 en un mililitro de orina. Esos
casos se presentan cuando un volumen de orina es muy
grande y por lo tanto disminuye la concentracin de
bacterias en la unidad de volumen.

Criterio Colonias por ml.
Contaminacin
<10 000
Sospecha de infeccin 10 000 - 100 000
Infeccin >100 000
INFECCIN DEL APARATO
GASTROINTESTINAL
Cuadro Clnico: Diarrea aguda
* Etiologa: Bacteriana, viral, parasitaria.
* Transmisin:
- Fecal oral
- Transmisin por alimentos
*Identificar la causa del cuadro NO es prioridad
si no hay sntomas constitucionales.
BACTERIAS
CAUSANTES DE
DIARREAS
Bacterias asociadas
frecuentemente a cuadros
diarreicos : Salmonella , Shigella y
Escherichia coli (enteropatgena
Bacterias asociadas a cuadros
diarreicos : Campylobater sp,
Yersinia enterocolitica, Vibrio
cholerae, Staphylococcus aureus
y Clostridium difficille
MUESTRA DE HECES
Seleccionar la muestra con moco o sangre
Si la muestra es slida, antes de sembrarla, diluirla en solucin salina
isotnica (SSI)
Sembrar la muestra inmediatamente despus de su recoleccin, en
caso contrario, utilizar medio de transporte
No debe usarse papel higinico: Sustancias Inhibidoras
Las muestras contaminadas con orina deben descartarse
Muestras mltiples recibidas en un mismo da no son tiles
MUESTRA
SIEMBRA DIRECTA
ENRIQUECIMIENTO
Medio SS
BIOQUIMICAS
SEROTIPIFICACION
MEDIOS DIFERENCIALES
MEDIOS SELECTIVOS
L(+) o L (-)
EXAMEN DIRECTO
Observacin
Microscpica (PMN)
COPROCULTIVO
INTERPRETACIN
* Grmenes de fcil aislamiento: Enterobacterias
patgenas.
* Epidemiologa local.

ANTIBIOGRAMA
* Importante para establecer la susceptibilidad
antibitica

Cundo debemos tomar hemocultivos?
Muestra de eleccin en:
Endocarditis,endarteritis,tromboflebitis
sptica,Infecciones relacionadas al catter
Fiebre de origen desconocido.Infecciones que
cursan con hemocultivos +:epiglotitis meningitis.
Muestra de apoyo en:
Meningitis, infecciones osteoarticulares,
neumona, celulitis periorbitaria, infecciones
abdominopelvianas,Pielonefritis,Abcesos de
rganos profundos.

INFECCIONES SISTEMICAS:
BACTERIEMIAS
Fuentes de bacteremia
SISTEMA GENITOURINARIO 25%
TRACTO RESPIRATORIO 20%
ABSCESOS 10%
HERIDAS QUIRURGICAS 5%
OTROS SITIOS CONOCIDOS 10%
SITIOS DESCONOCIDOS 25%
Correlacin entre infeccin sistmica y %
de Hemocultivos Positivos:
Meningitis 50-80%
Neumonas en nios.. 15%
Neumonas en adultos.. 30%
Osteoartritis 30-50%
Osteomielitis.. 50%
Peritonitis expontnea. 60%
Abcesos intraabdominales.. 20%
FACTORES PREDISPONENTES PARA TENER
HEMOCULTIVOS POSITIVOS:
Maniobras invasivas: cirugas, sondas,
catteres.
Alteracin de las defensas del husped :
cncer, diabetes, cirrosis, HIV, quemados,
tratamiento inmunosupresor.
Neonatos
Drogadictos endovenosos.
Toma de muestras:
En lo posible, 3 (tres) muestras.
CADA PUNCIN ES UNA MUESTRA:
Volmen: 10 ml por puncin en adulto
1-2 ml en neonato, hasta 5 ml en nios mayores de 5
aos.
Antes del tratamiento antibitico
2 a 3 muestras separadas en perodos de 20 a 30
minutos( depende de la gravedad)
hemocultivos: para mtodos
convencionales
Procesamiento de las muestras:

Mtodos convencionales: Incubar 6 a 24 horas:
observacin macroscpica: presencia de gas,
turbidez: si es negativo: coloracin de GRAM. Si
persisite negativo al 7mo da: subcultivo a ciegas.
Si es +: Coloracin de GRAM. subcultivos a medios
adecuados, ATBgrama presuntivo. Cultivo en
anaerobiosis.
Incubacin 7 das total: 95% de los gmenes
habituales crecern. Ms de 7 das: para hongos,
leptospira, Brucella, Micobacterias, endocarditis, ATB
previa.
INTERPRETACIN
Indican bacteriemias verdaderas:
Aislamiento en ms de una muestra
Aislamiento temprano
Aislamiento en alto inculo
Aislamiento concomitante en otro material
estril
Clnica compatible

Grmenes frecuentes productores de
bacteriemia y sus posibles focos
Staphylococcus aureus Hosp.: endovasculares.
extraH: otros focos
Staphylococus C negativos Catteres,vlvulas protsicas
Enterococcus Endocarditis, infecciones Qx
Streptococcus del grupo
viridans
Endocaditis, abcesos
profundos
Neumococo Meningitis, neumonia, otitis
media aguda
Bacilos gram negativos no
fermentadores
IntraH:catteres, sondas,
extraH: drogadictos ev
Haemophilus influenzae tipo B Epiglotitis, meningitis, celulitis
periorbitaria, inf. seas
Mielocultivo
Aspirado de Medula sea
Infecciones con reservorio
en Mdula sea
Alta sensibilidad y
especificidad
Indicado en
Recada o recidivas de
Brucelosis.
Complicaciones
INFECCIONES DEL APARATO GENITAL
VAGINITIS
Cndidisica: secrecin aspecto leche cortada
80% por C.albicans.Antecedentes: DBT,ATB.
Trichomoniasis: secrecin maloliente gris verdosa,
petequiado vaginal. Por T.vaginalis.
Vaginosis: Vaginitis inespecfca por Gardenerella
vaginalis y anaerobios asocidos (complejo G.A.M)
Secrecin griscea con burbujas, olor a pescado.
Streptococcus del grupo A: en nias.
CERVICITIS: Por N.gonorrhoeae y C.trachomatis.
CELULAS GUIA O CLUE CELL
CRITERIOS DIAGNSTICO DE AMSEL PARA
VAGINOSIS BACTERIANA
Tres de los cuatro criterios deben estar presentes;
Establece el diagnstico exacto de vaginosis bacteriana en
el 90% de las mujeres afectadas.
1. Flujo vaginal homogneo (el color y la cantidad
pueden variar)
2. Olor a aminas (pescado) cuando se agrega solucin de
hidrxido de potasio a las secreciones vaginales,
comnmente llamado prueba de olor
3. Presencia de clulas gua, clave o en clavija (clue
cells), que son clulas epiteliales cubiertas por
cocobacilos en la microcopia*
4. pH vaginal mayor de 4,5

INFECCIONES DE TRANSMISIN
SEXUAL (ITS)
Edad: Cndida, Herpes, Molusco contagioso. Hbitos
sexuales. Promiscuidad.
Perodo de incubacin: 2-5 das Herpes, y
Chancroide, 3 meses: Sfilis.
Residencia y viajes: frica: chancroide, donovaniosis
en amrica del sur
Uso de antibioticos
Enfermedades subyacentes.
Modo de inicio: prdromos: herpes, dolor no
secrecin , fiebre, erupcin en resto del cuerpo.
TOMA DE MUESTRAS
Condiciones previas
Hisopo estril: endocrvix, fondo de saco,
uretra.
Hisopado anal
Primer chorro de orina
Espermocultivo
Hisopado farngeo
URETRITIS
Infeccin uretral por grmenes que se adquieren por
contacto sexual.
No gonocccica (Chlamydia trachomatis,
U.urealyticum y M.hominis) y Gonocccica (Neisseria
gonorrhoeae).
Secrecin purulenta. Disuria. Polaquiuria.
Complicaciones: epididimitis aguda, prostatitis,
estrechez uretral secuelar.
SECRECIN URETRAL
Exmen microscpico (ex. En fresco, Gram)
1.Ms de 5 PMN con diplococos gram
negativos: Cultivo: agar chocolate
MedioThayer Martin.
Diplococos G- oxidasa +:
Neisseria gonorrhoeae: realizar prueba de
betalactamasa

FUNDACION BARCELO FACULTAD DE
MEDICINA
Secrecin uretral por Gonococo.
Examen directo GRAM de exudado uretral
FUNDACION BARCELO FACULTAD DE
MEDICINA
Secrecin Uretral:
2. Ms de 5 PMN sin diplococcos Gram -:
Giemsa: buscar Trichomonas vaginalis, y/o
Cuerpos de inclusin para Chlamydia
trachomatis
Cultivo: en agar chocolate, Agar sangre,Medio
de Diamond
IFD para C. trachomatis
FUNDACION BARCELO FACULTAD DE
MEDICINA
Secrecin Uretral:
3. Menos de 5 PMN sin
diplococos Gram
Negativos:
Cultivo en agar
chocolate y/o Thayer
Martin
FLUJO VAGINAL
MOCO CERVICAL
Realizar exmen microscpico: GRAM GIEMSA.
IFD para Chlamydias
Cultivo: En agar sangre, agar chocolate, Medio
de Thayer Martin.
Cultivo para Chlamydias y Mycoplasma ( no de
rutina)
FUNDACION BARCELO FACULTAD DE
MEDICINA
LESIONES ANALES
Pacientes Homo bisexuales
Proctitis proctocolitis
Bsqueda: Treponema pallidum, Neisseria
gonorrhoeae, HSV, HPV , Chlamydia
trachomatis
VDRL