Bioqumica clnica especializada

Lquido cefalorraqudeo
Facilitador: Luz Aurora Martnez

Equipo:
Ibarra Hernndez Gerardo David
Trujillo Ordua Marcos Adolfo

Formacin y fisiologa
Se forma en los plexos coroideos a partir del plasma por mecanismos
de filtracin selectiva bajo presin hidrosttica.

Sistema fisiolgico que aporta

nutrientes al tejido nervioso.

Proteger al cerebro y la medula

espinal contra traumatismos.

Elimina productos de
desecho metablico.

Recoleccin y manipulacin de la muestra

Decbito lateral
Suele obtenerse por puncin lumbar entre la
cuarta o quinta vertebra lumbar y requiere.

Determinacin de la presin intracraneal.

Asepsia.

Ya que una presin elevada exige que el lquido

sea retirado con lentitud ya que puede impedir
la recoleccin de un volumen suficiente.

Se suelen recoger 3 muestras estriles que se

marcan 1, 2 y 3 en el orden en que se extraen.

Tubo 1: El tubo para anlisis qumico y serologa se

congelan.

Tubo 2: Pueden
ambiente.

permanecer

Tubo 3: Se refrigeran los tubos.

temperatura

Aspecto
En
condiciones
normales el
LCR es
cristalino sin
cogulos
Presencia de
sangre por
hemorragia
cerebral o
puncin
traumtica

Aumento de
protenas,
lpidos y
presencia de
leucocitos

Turbio u
opalescente
Xantocrmico

Hemolisis

Coloracin
amarillenta
debido a la
presencia de
oxihemoglobina
o aumento de
bilirrubina

Muestras hemolizadas
Para identificar si la muestra sanguinolenta se debe por hemorragia intracraneal o por
puncin traumtica se debe observar:

Si la distribucin de sangre es homognea:

La concentracin de sangre disminuir de forma gradual en los tubos 2 y 3, usualmente
suele observarse estras de sangre en puncin traumtica.

Formacin de cogulos:
El LCR sanguinolento causado por hemorragia intracraneal no contiene suficiente fibrina
para formar cogulos.

Sobrenadante xantocrmico
El LCR debe encontrarse de esta forma desde antes de una puncin lumbar, ya que en una
puncin traumtica podra presentarse sobrenadante claro y poca introduccin de protenas
sricas.

Se realizaran pruebas de diferenciacin:

Prueba de dmero D (deteccin del producto de degradacin de la fibrina).

Examen microscpico:
- Hallazgo de macrfagos que contengan eritrocitos o grnulos de hemosiderina
indicativo de hemorragia intracraneal.

Recuento celular
Valores de referencia:
Adultos normal: 0 5 leucocitos/L
Nios: 30 clulas mononucleares/L

Formula:

El conteo se realiza en los cuatro cuadrados

grandes de las esquinas y el cuadrado del
centro. Las muestras limpias pueden contarse
sin diluir si no hay superposicin de las clulas.

Correccin por contaminacin

Se realizan correcciones por la presencia de leucocitos y protenas por introduccin por
puncin traumtica.
Para lo cual se determinara el recuento de eritrocitos en LCR y recuento de eritrocitos y
leucocitos en sangre perifrica

Constituyentes del LCR

De manera normal debemos encontrar linfocitos y monocitos en una relacin 70:30 y con
mtodos de concentracin de manera ocasional neutrfilos.
El aumento de estas clulas normales denominada pleocitosis sugiere infeccin de
meningitis de origen viral, tuberculosos, mictico o parasitario.

Recuento diferencial de leucocitos

Valiosa ayuda diagnostica
Debe realizarse en un frotis teido (Wright)
La muestra debe ser concentrada:

Sedimentacion: Casi no se usa, pero produce menos distorcion celular.

Filtracion: Casi no se usa, pero produce menos distorcion celular.
Centrifugacion: 5 10 min. Se separa sobrenadante y se conserva
Citocentrifugacion: Deben examinarse las celulas del centro y periferia, debido a la
distorsin celular. Pueden usarse portaobjetos recubiertos con cargas positivas.

Se contabilizan 100 celulas, las cuales se informan como porcentaje. Si no es posible hallarlas,
reportar las que se encontraron

Recuentos ligeramente elevados de Leucocitos menor de 50 leucocitos/L

puede ser indicativo de esclerosis mltiple
u otros trastornos
neurodegenerativos

Indican clulas en degeneracin, se asemejan a eritrocitos nucleados se dificulta su

diferenciacin cuando solo hay un ncleo.

Se presentan despus de punciones repetidas

y aparecen a las 2 - 4 hrs del ingreso de
eritrocitos al LCR.

El hallazgo microscpico de macrfagos

indica hemorragia interna.

que contienen eritrocitos (eritrofagocitosis)

La eritrofagocitosis produce un aspecto azul oscuro o negro en sus grnulos que

contiene hemosiderina.

Figura 10-23: Presencia de cristales amarillos de hematoidina, representan

degeneracin extensa, no contienen hierro y estn formado de hemoglobina y bilirrubina
no conjugada.

Clulas no patolgicas

Provienen del revestimiento

de los ventrculos y canal
neural.

Clulas del revestimiento

de la aracnoides.

Clulas malignas de origen hemtico

Se presentan en complicaciones graves de leucemias agudas, los nuclolos son ms

prominentes que en los frotis de sangre.

Clulas malignas de origen no hemtico

Los tumores primarios de SNC incluyen astrocitomas, retinoblastomas y meduloblastomas.

Las principales clulas del carcinoma metastasico de origen no hemtico provienen de pulmn,
mama, rin y aparato gastrointestinal.

Pruebas qumicas
Protenas de LCR
Glucosa en LCR
Lactato en LCR
Glutamina en LCR

Pruebas microbiolgicas
Tincin de Gram

Pruebas serolgicas
VDRL

Pruebas qumicas
Alteraciones en la permeabilidad de la
barrera hematoencefalica

Aumento de la produccin

Metabolismo de las clulas neurales en

respuesta a una situacin patolgica

Protenas del LCR

Protenas totales 15 45 mg/dL

Tcnica
Produccin de turbidez
Capacidad de unin al
colorante

El mtodo turbidimetrico se ha
adaptado a la instrumentacin
automatizada en la forma de
nefelometra

Fracciones de protenas
Diagnostico mas preciso

Albumina
Resultado del dao de la integridad
de la barrera hematoencefalica

IgG
Enfermedades que estimulan las
clulas inmunocompetentes en el
SNC (esclerosis mltiple)

Un valor <9 representa una barrera hematoencefalica intacta. El ndice aumenta

en relacin con la magnitud del dao de la barrera

Valores mayores de 0.7 indican produccin de IgG dentro del SNC

Instrumentacin automatizada

Electroforesis

Deteccin de bandas oligoclonales, que representan inflamacin dentro del SNC

Se debe realizar electroforesis en suero simultneamente para asegurar que las

bandas en LCR son por inflamacin neurolgica

Bandas en suero y LCR pueden ser resultado de:

Leucemia

Linfomas

Infecciones virales

Dos o mas bandas oligoclonales solo en LCR

Esclerosis mltiple (ndice IgG aumentado)

Encefalitis

Neurosifilis

Sndrome de Guillain-Barr

Neoplasias

Considerarse junto con los

sntomas clnicos

Recomendable concentrar LCR para

evitar valores de protenas bajos

Protena bsica mielina (PBM)

Destruccin reciente de la vaina de mielina (Protege
los axones de las neuronas)

Puede usarse para monitorizar la evolucin de la

esclerosis mltiple y a la vez medir la eficacia del
tratamiento

Para su medicin se usan tcnicas de inmunoensayo

Glucosa en LCR
Se debe comparar con la glucosa en sangre (2
hrs antes para que se estabilice equilibio
sangre-LCR)

100 mg/dL en suero, 65 mg/dL en LCR

Se usan las mismas tecnicas que en suero

Dao en la barrea hematoencefalica

 Son el resultado de elevacin en plasma

Leucocitos
Neutrfilos

Linfocitos

Meningitis
bacteriana

Meningitis
viral

Leucocitos
Linfocitos

Meningitis
tuberculosa

Lactato en LCR

Ayuda en el diagnostico y evolucin de meningitis y lesiones enceflicas graves

El lactato se libera al haber destruccin de tejido dentro del SNC debido a la falta de
oxigeno

En las meningitis bacterianas, tuberculosa y micoticas la concentracin de lactato es

mayor a 25mg/dL

Meningitis bacteriana >35 mg/dL

Meningitis viral < 25 mg/dL

Proporciona informacin mas fiable

Su elevacin es mas uniforme que la disminucin de glucosa

Si un tratamiento resulta exitoso disminuye con rapidez

Glutamina en LCR

Se produce a partir de amoniaco y cetoglutarato con el fin de eliminar el amoniaco del

SNC

Valores normales 8-18 mg/dL

Concentraciones elevadas estn asociadas con trastornos hepticos (liberando

amoniaco en LCR y sangre)

Esta determinacin representa una prueba indirecta para detectar amoniaco en LCR

La concentracin de glutamina es mas estable que la de amoniaco, esto la hace

preferible

Concentracin de amoniaco
aumenta
Disminuye el cetoglutarato

>35 mg/dL Alteracin

de la conciencia

No se produce glutamina (Ya

no se elimina amoniaco)
Paciente entre en coma

Prueba muy solicitada

en
pacientes
que
sufren coma de origen
desconocido

Pruebas microbiolgicas

El propsito es la identificacin del agente causal de la meningitis

El crecimiento en el medio de cultivo puede darse hasta 6 meses despus (meningitis

tuberculosa), esto lo hace mas un proceso confirmatorio que diagnostico

Tincin de Gram

Debe realizarse en muestras concentradas

Falso
negativo

Cantidad de
microorganismos muy
pequea
Realizar hemocultivo

Falso
positivo

Colorante precipitado
Detritos celulares

Streptococcus
pneumoniae
Haemophilus
influenzae

Cocos grampositivos
Bacilos gramnegativos pleomorfos
Mayor frecuencia

Escherichia coli Bacilos gramnegativos

Neisseria
meningitidis

Cocos gramnegativos

Streptococcus
agalactiae

Cocos
grampositivos

Listeria
monocytogenes

Bacilos
grampositivos

Recin nacidos

Meningitis tuberculosa
Tincin acido-alcohol-resistente

Meningitis micotica
Tincin Gram
Preparacin con tinta china para
detectar la presencia de Cryptococcus
neoformans
10-36

Pruebas serolgicas

Detectar la presencia de neurosifilis (sfilis en el LCR)

El procedimiento recomendado es el VDRL (Venereal Disease Research)

Es mas especifica para la infeccin del SNC que en los niveles sanguneos