UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE GORHMANN

FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL BIOLOGIA - MICROBIOLOGIA

PRACTICA N 01:

COLUMNA DE
WINOGRADSKY

Curso
:
Docente :
Alumnos :

Ecologa Microbiana
Csar Julio Cceda Quiroz
Carlos Walter Tala Chipoco
Jos Sandoval Niebles

2010-35440
2009-34021

 La
columna
de
Winogradsky simula un
microambiente

que ilustra cmo los

microorganismos
utilizan microespacios
altamente especficos

de acuerdo con
sus
necesidades
vitales.

Carbono
Energa
Azufre
Interdependencia

El tipo de estudio de la estructura de la

comunidad microbiana acutica o de su
actividad depende del objetivo de la
investigacin que se pretenda realizar.
Los estudios microbiolgicos tradicionales
han sido la identificacin taxonmica de la
diversidad microbiana en la naturaleza
,funcion bioquimica e interacciones.

Figura 01:
Fuente: Google Imgenes

 Finales del Siglo XIX:

Sergei Winogradsky.

Figura 02:
Fuente: Google Imgenes

 Es una columna
compacta de lodo
cubierta con agua
para imitar un lago.

Donde
diversas
bacterias
se
desarrollan en un
periodo de meses.
en
diferentes
zonas: aerbica,
microaerofila
y
anaerbica.

Figura 03:
Fuente: Google Imgenes

Thiospirillum
genense
Chlorobium
limicola
Desulfovibrio
sp

Es un ecosistema anxico en
miniatura,

que puede usarse como

suministro a largo plazo de
bacterias para cultivos de
enriquecimiento.
Bacterias
fototrficas
prpuras y verdes
Bacterias sulfato reductoras
Otros anaerobios

 Las bacterias sulfato reductoras son las que

utilizan el sulfato como agente oxidante,
reducindolo a sulfuro.
Desulfobacterales
Desulfovibrionales
Syntrophobacterales

 1 botella de plstico transparente 3L.

Sulfato clcico y Carbonato clcico
CaHPO4

2 electrodos
1 yema de huevo cocido.

Papel peridico finamente cortado

Cinta adhesiva, Film transparente y Bandas
elsticas
Balanza de precisin, papel de aluminio .

3 tornillos o clavos de hierro

 Guantes de ltex.
Tijeras.
Fango de charca de agua dulce, marisma o marino.

(Zona con materia vegetal abundante)

Agua del mismo origen.
Arena de color claro.

Bagueta de vidrio
Removedores de madera
Bolsas de basura grandes para proteccin de zona de

trabajo.

 Lavar
perfectamente
una botella de 2 L de
plstico transparente

y
eliminar
las
etiquetas, cortar con
unas tijeras el cuello
de la botella para
usarlo como embudo.

Figura 04:
Fuente: Google Imgenes

Figura 05:
Fuente: Google Imgenes

Marcar en la parte
superior
de
la
columna el nombre
de la pareja y las
condiciones de la
columna.

Esta
inscripcin
servir
como
referencia para su
orientacin a la luz.

 Pegar, con un poco de

cinta adhesiva, en el
interior de la botella un
electrodo
que
llegue
hasta
al
fondo
y
sobresalga al menos 10
cm del borde superior.

Pegar
el
sobresaliente

extremo

Figura 06:
Fuente: Google Imgenes

 Pesar:

5-10 gramos de fuente

de Carbono de
utilizacin lenta (papel
de filtro cortado en
trocitos, serrn, papel de
peridico, restos
vegetales secos, etc)

5 gramos de Sulfato
Clcico

5 gramos de Carbonato
clcico

Figura 07:
Fuente: Google Imgenes

 En un vaso de precipitados
aadir unos 750 mL de
fango, quitando los restos
vegetales o piedras que
puedan existir.

Aadir poco a poco agua

(del mismo origen que el
fango), si es necesario,
A la vez que se remueve
con un trozo de madera
hasta lograr una crema
espesa.

Figura 08:
Fuente: Google Imgenes

 Aadir la
carbono, el
carbonato,
bien para
distribucin.

Figura 08:
Fuente: Google Imgenes

fuente de
sulfato y el
removiendo
su perfecta

Asegurarse
de
que
queda una crema fluida
que pueda discurrir a
travs del embudo.

 Seguir aadiendo la mezcla a la botella,

golpeando unas cuantas veces el fondo sobre
la mesa

para que se distribuya uniformemente y se

elimine el oxigeno atrapado. (50%)

Repetir varias veces.

 Aadir ahora a travs

del embudo arena de
color claro,

previamente
empapada con agua
del mismo origen que
el fango,
hasta completar el
75% del volumen.

Figura 09:
Fuente: Google Imgenes

 Rellenar
cuidadosamente
con
agua hasta casi el
borde

Figura 10:
Fuente: Google Imgenes

y tapar la columna con

film transparente
asegurndolo
con
una banda elstica.

 Se tapa el cilindro para evitar evaporacin.

Figura 11:
Fuente: Google Imgenes

 Se coloca el cilindro
cerca de una ventana
donde reciba luz solar
atenuada y se deja
durante varias semanas.

Figura 12:
Fuente: Google Imgenes

El nombre de la pareja
deber estar orientado
hacia el interior del
laboratorio
de forma que sea
visible.

 En la columna de Winogradsky
tpica se desarrollan una
mezcla de microorganismos:
Zona aerbica

Las algas y cianobacterias

ocupan rapidamente la parte
superior y al producir oxigeno
ayudan a mantener esta zona
Figura 13:
oxica.
Fuente: Google Imgenes

 Zona aerbica:
La zona superior de la columna suele
volverse de color
verde por la
presencia de algas y cianobacterias.
El
oxgeno
producido
por
estos
microorganismos permite el desarrollo de
hongos y bacterias hetertrofas aerobios.

 Zona Microaerfila : La capa de agua

situada en contacto con el sedimento
contiene menor concentracin de oxgeno y
adems recibe algo de SH2.

Crecimiento de los oxidadores de sulfuro

microaerfilos

Figura 14:
Fuente: Google Imgenes

Beggiatoa

Thiothrix

 Zona Microaerfila

Thiobacillus thioparus

Figura 15:
Fuente: Google Imgenes

 Zona Anaerbica:

Rhodospirillum rubrum

Figura 16:
Fuente: Google Imgenes

La parte superior de
la columna es de
color marrn - rojizo
debido al crecimiento
de
principalmente
fotohetertrofos
anaerobios.

 Zona Anaerbica:

Contina una zona rojo-prpura, indicativa del

crecimiento de las bacterias prpuras del azufre.
Ms abajo, una zona verdosa indica el
crecimiento de bacterias verdes del azufre.

Chromatiaceae

Chlorobiaceae
(Chlorobium)

Figura 17:

Fuente: Google Imgenes

 Zona Anaerbica:

El sulfuro producido por bacterias sulfato

reductoras provoca el crecimiento de:
Bacterias prpuras y verdes
del azufre

Crecen en el lodo de la
columna

Desarrollan profusamente en
el agua

 Crecimiento de bacterias del azufre.

Figura 18:
Fuente: Google Imgenes

 Zona Anaerbica:

En la zona inferior se desarrollan organismos

fermentadores que producen alcohol y
cidos grasos como subproductos de su
metabolismo.

Constituyen el sustrato para el desarrollo de

bacterias sulfatoreductoras.

 Zona Anaerbica:

Las bacterias sulfatoreductoras como resultado

de su metabolismo, liberan sulfuros que difunden
a la zona superior oxigenada.
Creando

un gradiente en el que se desarrollan

bacterias fotosintticas que utilizan el azufre.

 Zona Anaerbica:

En esta zona, el color negro intenso que se

extiende hacia arriba desde el fondo del
sedimento se debe a la formacin de sulfuros
metlicos, principalmente sulfuro ferroso (FeS)
por:

La actividad de los reductores de sulfato.

Desulfovibrio, Desulfotomaculum

Figura 19:
Fuente: Google Imgenes

 Esquema del desarrollo de microorganismos

Figura 20:
Fuente: Google Imgenes

 Despus de 3 a 4 semanas de incubacin

aumenta la cantidad de los distintos tipos
de microrganismos,

Que de acuerdo a sus caractersticas

fisiolgicas se establecen en:
Diferentes

zonas a lo largo de la columna.

 Se introduce una pipeta larga con la que se

recoge un poco de lodo o agua coloreados.

Esta muestra se puede usar para:

Caracterizacin

Aislamiento

 Una forma de examinar la biota de una

C.W. completamente desarrollada consiste
en desmontarla capa por capa

examinar por microscopa o aislar y cultivar

las
algas,
protozoos,
cianobacterias,
Beggiatoa y dems m.o. asociados a cada
capa.

Brock, Thomas. Biologa de los

Microorganismos 10a ed.
Universidad autnoma de Mxico. Protocolo
de Prcticas de Microbiologa Experimental.
Mxico,2012.
Gua de Prcticas de Laboratorio de
Ecologa Microbiana, 2008.

GRACIAS