Clase 2

cidos Nucleicos
Replicacin del DNA
Febrero, 2011
Prof. Deyanira Gonzlez

ADN
Replicacin

ADN
Transcripcin

Se replica o
copia toda la
molcula de
ADN

Que se transcribe??
Toda la molcula de
ADN???

Sntesis de ARN
Traduccin

Sntesis de Protenas

Dnde ocurre?
Clula Procaritica

Duplicacin del material

gentico: Nucleoide

Clula Eucaritica

Duplicacin del material

gentico: Ncleo

Cundo ocurre?
La replicacin
ocurre en la fase S
del ciclo celular

Divisin Celular

Clula Madre

Clulas hijas

Duplicacin del Genoma

Dos clulas con igual genoma

Sacar la fotocopia exacta de todo el material

Divisin celular en clulas de plantas

Divisin celular
en Neuroblastos
Rojo: tubulina
Azul: Cromosomas
Amarillo: Centrosomas

Caractersticas del proceso

Replicacin del DNA: sntesis de DNA

Caractersticas de la Replicacin:

1. Determinada por complementaridad de bases:

cada hebra sirve de molde para la sntesis de la cadena

complementaria.

Replication

No se nos ha escapado que el

apareamiento de bases que hemos
postulado sugiere inmediatamente
un posible mecanismo de copia del
material gentico
J.D. Watson F.H.C. Crick
Molecular Structure of Nucleic Acids: A
structure for Deoxyribose Nucleic Acid
Nature, 171 (1953)

Replicacin del DNA: sntesis de DNA

Caractersticas de la Replicacin:
1.Determinada por complementaridad de bases.

2.Semiconservativa:
las
molculas
finales
contienen una hebra parental, que sirvi como
molde, y una hebra nueva, recin sintetizada.

La replicacin es Semiconservativa

Replicacin del DNA: sntesis de DNA

Caractersticas de la Replicacin:
1.Determinada por complementaridad de bases.

2.Semiconservativa
3.Procede a partir de un origen: comienza siempre
con una secuencia especfica de nucletidos conocida como
el origen de replicacin.

Se puede
considerar que a
cada lado de una
burbuja de
replicacin, se
forma un horquilla
de replicacin

Ya que las DNA

polimerasas copian las
cadenas moldes de
manera
complementaria y
antiparalela, una
cadena se copiar en
el sentido del
desenrollamiento, y la
otra en el sentido
contrario al
desenrollamiento.

Replicacin del DNA: sntesis de DNA

Caractersticas de la Replicacin:
1.Determinada por complementaridad de bases.

2.Semiconservativa
3.Procede a partir de un origen.
4.Utiliza deoxirribonucletidos trifosfato: dATP,
dCTP, dGTP, dTTP

Deoxirribonucletido
trifosfato

Cadena Nueva

Cadena Parental

Replicacin del DNA: sntesis de DNA

Caractersticas de la Replicacin:
1.Determinada por complementaridad de bases.

2.Semiconservativa
3.Procede a partir de un origen.
4.Utiliza desoxirribonucletidos trifosfato: dATP,
dCTP, dGTP, dTTP

5.Tiene direccionalidad: SIEMPRE procede

direccin 53

en

DNA molde

Sitio de inicio

RNA Iniciador

DNA nuevo

3OH
5P

DNA
polimerasa

3OH
Sntesis de ADN es en sentido 5-3

5P

Replicacin del DNA: sntesis de DNA

Caractersticas de la Replicacin:
1.Determinada por complementaridad de bases.

2.Semiconservativa
3.Procede a partir de un origen.
4.Utiliza desoxirribonucletidos trifosfato: dATP,
dCTP, dGTP, dTTP

5.Tiene direccionalidad: SIEMPRE procede

direccin 53 (PROBLEMA)

en

Hebra lider: replicacin continua

Hebra retardada: replicacin discontinua (Fragmentos)

Hebra nueva

Hebra nueva

Direccin de sntesis
5

Direccin de sntesis
3

Fragmento de Okasaki

Replicacin del DNA: sntesis de DNA

Caractersticas de la Replicacin:
1.Determinada por complementaridad de bases.
2.Semiconservativa
3.Procede a partir de un origen.
4.Utiliza desoxirribonucletidos trifosfato: dATP,
dCTP, dGTP, dTTP

5.Tiene direccionalidad: SIEMPRE

direccin 53(PROBLEMA)

procede

en

Hebra lider: replicacin continua

Hebra retardada: replicacin discontinua (Fragmentos)

6. Requiere un iniciador: una molcula de RNA que

aporte un extremo 3-OH libre

Replicacin del DNA: sntesis de DNA

Caractersticas de la Replicacin:
1.Determinada por complementaridad de bases.
2.Semiconservativa
3.Procede a partir de un origen.
4.Utiliza desoxirribonucletidos
dGTP, dTTP

trifosfato:

dATP,

dCTP,

5.Tiene direccionalidad: SIEMPRE procede en direccin

53
(PROBLEMA)
Hebra lder: replicacin continua
Hebra retardada: replicacin discontinua (Fragmentos)
6. Requiere un iniciador: una molcula de RNA que aporte un
extremo 3-OH libre
7. Realizado por polimerasas: enzimas que polimerizan
nucletidos

Pol I
Primera enzima descubierta
Papel sntesis y reparacin en
la replicacin
Actividades:
Polimerasa 5 3
Exonucleasa 3 5
Exonucleasa 5 3

Pol II
Funcin:
reparacin
Sntesis
reparadora de
DNA daado
por agentes
externos como
luz UV

Pol III
Encargada de la replicacin
Forma activa: holoenzima
Dimero: c/u con 10
subunidades
a: Polimerasa 5 3
e: Exonucleasa 3 5
q:
g:
d:
d:
c:
y:
b:
t:

Ncleo

Complejo
g
Abrazadera
Dimeriza las subunidades

Actividades:
Polimerasa 5 3
Exonucleasa 3 5

Replicacin del DNA: sntesis de DNA

Caractersticas de la Replicacin:
1.Determinada por complementaridad de bases.
2.Semiconservativa
3.Procede a partir de un origen.
4.Utiliza desoxirribonucletidos trifosfato
5.Tiene direccionalidad: SIEMPRE procede en direccin
53
Hebra lder: replicacin continua
Hebra retardada: replicacin discontinua (Fragmentos)
6. Requiere un iniciador
7. Realizado por polimerasas
8.Requiere de otras enzimas y protenas:
Helicasa
Primasa
SSB (Protenas de unin a DNA de cadena sencilla
DNA Polimerasa I
Girasa
Ligasa

Enzimas requeridas
Abrir la doble hebra, estabilizar la burbuja y
vencer la tensin y torsin
Topoisomerasas
Helicasa
ssb y otras

Sintetizar el cebador

Primasa o RNA polimerasa

Sintetizar la hebra de DNA

Polimerasas

Corregir errores

Polimerasas y otras

Unir extremos 3 OH y 5 MP
Ligasa

Hebra lider

Girasa

Movimiento de PolIII

Fragmento de
Okasaki

Helicasa
Primasa
Iniciador RNA

SSB

Iniciador RNA

Movimiento de PolIII

Abrazadera deslizante
3

Protenas SSB
5
3

Hebra lider

Pol III
Fragmentos
de Okasaki

Iniciador
RNA 5

Helicasa/Primasa
Hebra retardada

3 5
Polimerasa III: Actividad Polimerasa 5 3
Polimerasa III: Actividad Exonucleasa 3 5

Girasa

Helicasa

DNA Pol III

Primasa

SSB

Iniciador RNA

DNA Pol III

Helicasa
Primasa

SSB

Iniciador RNA

DNA Pol III

Helicasa

Primasa

SSB

Iniciador RNA

Papel de la Pol I

Remocin del Iniciador

RNA:
Actividad
Exonucleoltica
53 de la Pol I

Sntesis de la regin que

ocupaba el iniciador RNA:
Actividad Polimerasa 53
de la Pol I
Correccin de prueba:
Actividad
Exonucleoltica
35 de la Pol I

Unin de los Fragmentos

de Okasaki:DNA Ligasa

Ligasa

Hebra recin sintetizada

Fragmento de Okasaki 1

Hebra Molde

Fragmento de Okasaki 2

Enzima + ATP = Enzima-AMP

Hebra recin sintetizada

Fragmento de Okasaki 1

Hebra Molde

Fragmento de Okasaki 2

Enzima-AMP + DNA = Enzima + DNA-AMP

Hebra recin sintetizada

Fragmento de Okasaki 1

Hebra Molde

Fragmento de Okasaki 2

Mutacin: alteracin o cambio en la informacin gentica

Puede generarse espontneamente o como consecuencia
de la exposicin a agentes qumicos o fsicos

Tipos de Mutaciones:
Cariotpicas: alteran el nmero de cromosomas
Pe: Sndrome de Down (Trisoma del 21), Sndrome de
Turner (Monosoma X0), Trisomas sexuales (XXX, XXY o
XYY)
Cromosmicas: afectan la disposicin de segmentos de un
cromosoma
Moleculares: alteraran la secuencia de nucletidos del
ADN

Tipos de Mutaciones Moleculares

Cambio en una o en unas pocas bases del DNA

Sustitucin:
Se cambia una base por
otra

Transicin:
Una base por otra qumicamente similar
Pe: Purina x Purina = A G
Transversin:
Una base por otra qumicamente distinta
Pe: Purina x Pirimidina = A C

Adicin:
Se agregan bases a la secuencia del DNA
1 mas bases
Cambio del marco de
lectura
Delecin:
Se eliminan bases de la secuencia del DNA

Consecuencias de una mutacin molecular

Mutacin Silente:

Se cambia un codn por

otro que codifica para el
mismo aminocido

Mutacin
Sentido:

con

Prdida

Pe:
AGG CGG
Arg Arg

del

Se cambia un codn por otro que

codifica para un aminocido distinto

Mutacin sin Sentido:

Sinnima:
Se cambia un codn por otro que codifica
para un aminocido distinto pero con
propiedades fisicoqumicas similares
Pe: AAA AGA
Lis Arg

No Sinnima:
Se cambia un codn por otro que codifica
para un aminocido distinto pero con
propiedades fisicoqumicas distintas
Pe: UUU UCU
Phe Ser

Se cambia un codn que especifica un

aminocido por un codn de terminacin

Pe:
CAG UAG
Gln Terminacin

Qu causa las mutaciones?

Inducidas:

Provocadas artificialmente por algn agente exgeno (agente

mutgeno)
Agentes mutgeno:
Agentes fsicos:
Radiaciones ionizantes: rayos ultravioleta, rayos X, partculas
alfa, beta y gamma de fuentes radiactivas (Radio, Uranio,
Cobalto)
Choque trmico.
Ultrasonidos de altsima energa (Microondas)

Agentes qumicos:
Anlogos de bases de cidos nucleicos (5-bromouracilo),
alcaloides (cafena), agentes que atacan al DNA, agentes
alquilantes (gas mostaza), ciertos colorantes, drogas (LSD,
nicotina)
Agentes biolgicos: Virus, bacterias.

Hemoglobina normal

Hemoglobina mutante

Efecto de las Mutaciones

Efectos Nocivos:
Si ocurren en clulas sexuales: pueden surgir individuos u
rganos anmalos
Si ocurren en clulas somticas: pueden alterar el ciclo celular,
inducir una continua divisin celular generando cncer
Efectos Beneficiosos:
Inducen cambios que contribuyen a la supervivencia de las
especies

cidos Nucleicos
Transcripcin

Transcripcin: sntesis de ARN partir de ADN

Qu se transcribe?

Un gen
Un gen es una secuencia de DNA
que codifica para una molcula de
ARN o una Protena

Otras
secuencias
reguladoras

Regin
codificante
del gen

Promotor

3
(-)

+1

(+)

Punto inicio de
la transcripcin

Regiones de un Gen

TRANSCRIPCION

dGTP

53

CTP

Cadena codificante

Cadena Molde

Cadena codificante
del ADN (no molde)

5 - A T G C C A G T A G G C C A C T T G T C A- 3

Cadena molde del

ADN

3 - T A C G G T C A T C C G G T G A A C A G T- 5
Transcripcin

ARNm

5 - A U G C C A G U A G G C C A C U U G U C A- 3

Enlace Fosfodiester

La ARN Polimerasa

Enlace Fosfodiester

Transcripcin: sntesis de ARN a partir de ADN

Caractersticas de la Transcripcin:
Realizado por ARN Polimerasas (no requieren cebador)
Requiere la separacin de las dos hebras de ADN

Determinada por complementaridad de bases: una

cadena de ADN sirve de molde para la sntesis de la cadena

complementaria de ARN

Procede a partir de una regin particular: PROMOTOR

Utiliza ribonucletidos trifosfato: ATP, CTP, GTP, UTP
La sntesis de la nueva cadena de ARN ocurre en
direccin 5 a 3

Donde comienza la transcripcin?

Iniciacin de la transcripcin

Iniciacin de la transcripcin

Elongacin de la cadena de RNA

Terminacin de la Transcripcin

Promotores Procariotas
Se une la ARN Polimerasa
5

TTGACA
-35

TATAAT
-10

+1

Caja
TATA

ARNm

Promotores Eucariotas
Otras
secuencias
reguladoras
5

Se une la ARN Polimerasa

CAAT

GC

-110

-40

TATAAT
T
-25

3
+1

ARNm

Sitio de inicio de
la transcripcin

Secuencia
consenso

Caja TATA

Transcripcin en Procariotas
Tienen una nica ARN Polimerasa (ARNm, ARNr, ARNt)

Transcripcin en Procariotas
Grupos de genes con un promotor comn: ARN policistrnico.
Transcripcin y Traduccin simultneos

Promotor

Genes

Transcripcin
ARNm
policistrnico
Traduccin
Protena A

Protena B

Protena C

Transcripcin en Eucariotas
Tipos de RNA
polimerasas de los
eucariotas:
RNA polimerasa I: Sintetiza
precursores de RNA
ribosomales grandes
RNA polimerasa II:
Sintetiza los precursores
de los mRNA
RNA polimerasa III:
Sintetiza los tRNA

ARN Polimerasa II de Eucariotas