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mas utilizados en
Microbiologa Clnica
Universidad Autnoma de
Ciudad Jurez
Laboratorio de Microbiologa 1
M.C. Georgina Escudero
Hermosillo
Chvez Guerrero Erika Margarita
128112
Fernndez Castillo Gabriel 133356
Mora Murillo Laura Argelia 133262
Robles Garca Shayra Paola 128941
Sandoval Cervantes Hctor Edwin
128236
Contenido
Que es un medio de cultivo
Constituyentes de los
medios de cultivo
Tipos de medios de cultivo
agar nutritivo
agar sangre
Agar C.L.E.D
Agar S.S,
Agar kligler
medio de loeffler
Agar hektoen
Agar
C.P.S. ID3
Agar Mueller-hinton,
Agar tripticasa de soja,
Agar chapman o manitol
salino
Agar desoxicolato citrato
lactosa sucrosa (DCLS)
Agar baird-Parker
Agar levine o EMB
Agar cetrimida-King
Agar Schaedler
Agar Gardnerella
Agar BCYE (buffer charcoal
yeast extract)
Agar lowenstein-Jensen
Agar yersinia CIN
Agar Mc conkey,
Agar TCBS (tiosulfato citrato
bilis sacarosa)
Agar chocolate
Agar thayer martin o new york
Agar Skirrow
Agar sulfito de bismuto
Agar sangre brucella heminamenadiona
Agar sabourand
Agar campylosel
Medios de
cultivo
Que son
Constituyente
s de los
medio de
cultivo
Tipos de
medios de
cultivo
Medios de
cultivo
comunes
Por su
consistencia
Por su
composicin
Segn su
origen
Medios de cultivo
Conj.
nutrientes
Fac. de
crecimiento
Otros
component
es
Crean las
condiciones
necesarias para
el desarrollo de
los
microorganism
os.
Tempera
tura
Grado
Humeda
d
Presin
de O2
adecuada
Grado
acidez o
alcalinida
d correcto
Nutrient
es
Factores
de crec.
Exento
microorga
nismos
contamin
antes.
Por su composicin:
Segn su origen:
Medios de
cultivo comunes
AGAR
NUTRITIVO
INTERPRETACIN
EL CRECIMIENTO BACTERIANO EN ESTE AGAR LO
HACE EN LA SUPERFICIE, POR LO QUE SE
DISTINGUEN MEJOR LAS COLONIAS PEQUEAS.
EN UN CALDO DE NUTRIENTES, LA BACTERIA CRECE
EN EL LQUIDO, Y APARECE COMO UNA SUSTANCIA
ESPESA, CON COLONIAS DIFCILMENTE
OBSERVABLES.
CRECIMIENTO DE
STAPHYLOCOCCU
S EPIDERMIDIS
AGAR NUTRITIVO
BACILLUS CEREUS
(LECHE DE CERDA)
AGAR SANGRE
PREPARACIN
Formula (en gramos por litro)
Infusin de musculo de
corazn
375.0
Peptona
10.0
Cloruro de sodio
5.0
Agar
15.0
INDICACIONES
COLONIAS
ES UN MEDIO ENRIQUECIDO QUE SE UTILIZA ADEMS PARA LA
INVESTIGACIN DE LOS DIVERSOS TIPOS DE HEMLISIS(, SS GAMMA ). SE
UTILIZA PARA EL CRECIMIENTO DE ESTREPTOCOCOS
STAPHYLOCOCCUS
I.
AUREUS
II.
PYOGENES
DERECHA:
STAPHYLOCOCCUS E
IZQUIERDA:
STREPTOCOCCUS
C.L.E.D
La cistina
Permite el desarrollo
De enterobacterias
PREPARACIN
CRECIMIENTO
LA PRESENCIA DE LACTOSA EN SU
COMPOSICIN LE CONFIERE EL CARCTER DE
MEDIO DIFERENCIAL, AUNQUE LA
INTERPRETACIN SEA DIFERENTE AL
ANTERIOR MEDIO POR LA INCORPORACIN
DE OTRO INDICADOR: EL AZUL DE
BROMOTIMOL. LAS COLONIAS LACTOSA
POSITIVAS APARECERN DE COLOR
AMARILLO Y LAS LACTOSA NEGATIVAS LO
HARN CON UN COLOR VERDOSO,
BLANCO O AZULADO.
CORYNEBA
CTERIUM
STRIATUM
EN C.L.E.D. AGAR
SPHINGOMONAS
PAUCIMOBILIS EN
C.L.E.D. AGAR
S.S.
PREPARACIN
INTERPRETACIN
EL AGAR SS ES UN MEDIO SELECTIVO EMPLEADO PARA EL
AISLAMIENTO DE SALMONELLA Y SHIGELLA A PARTIR
DEMUESTRAS FECALES. EL MEDIO CONTIENE SALES BILIARES Y
VERDE BRILLANTE PARA IMPEDIR EL CRECIMIENTO DE
COLIFORMES Y GRMENES GRAM POSITIVOS. LA
PRESENCIA DE LACTOSA Y ROJO DE METILO NOS PERMITEN
DIFERENCIAR LAS COLONIAS QUE FERMENTAN LA LACTOSA
(ROSAS O ROJAS) DE LAS QUE NO LO HACEN (INCOLORAS)
KLIGLER
13.0
5.0
10.0
10.0
1.0
0.5
0.3
0.025
15.0
INSTRUCCIONES
Enfriar en pico de
flauta profundo.
1-PICO
INTERPRETACIONES
ALCALINO/FON
DO CIDO
(PICO
ROJO/FONDO
AMARILLO):
EL
MICROORGANI
SMO
SOLAMENTE
FERMENTA LA
GLUCOSA.
2-PICO
CIDO/FONDO
CIDO (PICO
AMARILLO/FO
NDO
AMARILLO):
EL
MICROORGANIS
MO FERMENTA
GLUCOSA, Y
LACTOSA.
ALCALINO/F
ONDO
ALCALINO
(PICO
ROJO/FON
DO ROJO):
EL
MICROORGA
NISMO ES
NO
FERMENTAD
OR DE
4-LA
PRESENCIA DE
BURBUJAS, O
RUPTURA
DEL MEDIO DE
CULTIVO,
INDICA QUE EL
MICROORGANI
SMO PRODUCE
GAS.
5-EL
ENNEGRECIMI
ENTO DEL
MEDIO INDICA
QUE EL
MICROORGANIS
MO PRODUCE
CIDO
SULFHDRICO.
MEDIO DE
LOEFFLER
Agar Hektoen
Esta compuesto de la presencia
de tres azcares (lactosa,
sacarosa y salicilina).
Uso
Capaz de detectar
los grmenes
formadores de ss.
Permiten ampliar el
poder diferencial de este
medio.
COMPONENTE
S
Crecimient
o
Inhibicin
Las colonias de
Salmonella, verdes o
transparentes con un
precipitado negro en el
centro.
MEDIO CROMOGNICO
DESARROLLADO POR
BIOMERIEUX.
Altamente selectivo y
diferencial.
Incorpora sustratos
incoloros = productos
con color
(cromognicos) tras
actuar sobre ellos una
enzima especfica.
Cambio de color de
la colonia sobre el
medio:
*Rojo burdeos
*Azul-marrn
CRECIMIENTO DE
COLONIAS
E. coli
P. Mirabilis
Enterococo
AGAR MUELLER-HINTON
Uso
Componentes
be
r
so os
b
A xic
t
e
m
s
o
t
li
o
b
ta
Agente solidificante
PROCEDIMIEN
TO
Almacenamient
o:
2-30 C.
Caducidad:
5 aos en
frasco cerrado.
COMPONENTES
Capaz de distinguir
los
microorganismo
patognicos en un corto
periodo de tiempo.
COMPOSICIN
HACINDOLO
SELECTIVO PARA:
STAPHYLOCOCCI
Y
MICROCOCCACEA
E.
DEBIDO A QUE EL
NIVEL DE
CLORURO
SDICO ES
INHIBITORIO
PARA LA MAYORA
DE LAS
BACTERIAS.
FORMULACIN
PREPARACI
N
COMPONENTES
Agar Baird-Parker
Permite el crecimiento de estafilococos coagulasa positivos, a
la vez que los diferencia del resto en los alimentos y otros
materiales de importancia sanitaria
Frmula (gramos x litro)
PEPTONA DE CASENA........................................10.0
EXTRACTO DE CARNE.........................................5.0
EXTRACTO DE LEVADURA...................................1.0
CLORURO DE LITIO ..............................................5.0
GLICINA................................................................12.0
PIRUVATO DE SODIO..........................................10.0
AGAR....................................................................17.0
TELURITO POTSICO.0.1
EMULSIN DE YEMA DE HUEVO...50 mL
pH final: 6.8 0.2
Cmo
sese
prepara?
Cmo
usa?
MICROORGANISM CRECIMIENTO
OS
ACTIVIDAD
LECITINSICA
REDUCCIN DE
TELURITO DE
POTASIO
Staphylococcus
aureus ATCC
25923
Satisfactorio
Staphylococcus
epidermis ATCC
14990
Proteus
mirabilis ATCC
43071
RegularSatisfactorio
Total o
parcialmente
inhibido
Positiva
Negativa
Negativa
CARACTERSTICA
S DE LAS
COLONIAS
Positiva
Col. Negras,
borde incoloro,
convexas,
rodeadas de
zona opaca con
zona clara
externa
Positiva
Colonias negras,
tamao irregular,
zona opaca
alrededor
Positiva
Digerido
pancretico
de
Gelatina..10.0
Es
usado
para
el
aislamiento
y
Sacarosa.5.
diferenciacin de bacilos entricos Gram
0 negativos. El uso de la eosina y del azul
Eosina.................
metileno permite la diferenciacin de las
0.4
colonias
de lactosa
Azul
de fermentadoras
metileno.....
0.065
Agar
bacteriolgico......
..15.0
Cmo
sese
prepara?
Cmo
usa?
Enterobacteria
(gramos
litro
de
agua
destilada)
Digerido pancretico de gelatina
20.0
Cloruro de magnesio..
1.4
Sulfato
de
potasio
..10.0
Cmo se prepara?
MICROORGANISMOS
:
o Pseudomona
aeruginosa
o Escherichia Coli
o Staphylococcus
aureus
Agar Schaedler
0.4
anaerobias
Hemina
0.01
Buffer
Tris
..0.75
Agar
Cmo se prepara?
0.01
Cmo se prepara?
Es importante tener
cuidado extremo ya
que se trabajar con
sangre humana que
previamente se
analiz para descartar
enfermedades en ella
Lowenstein-Jensen
Medio Base.
SIEMBRA
SE RECOMIENDA, EN PROCEDIMIENTOS DE RUTINA,
INOCULAR LA MUESTRA PREVIAMENTE DESCONTAMINADA,
SOBRE LA SUPERFICIE DEL MEDIO DE CULTIVO.
INCUBACIN
A 35-37C. A LOS 7 DAS DE INCUBACIN.
RESULTADOS
OBSERVAR LAS CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y LA
PRESENCIA O AUSENCIA DE PIGMENTO EN LAS COLONIAS.
Microorganismos
Crecimiento
Mycobacterium
tuberculosis
Excelente
Mycobacterium avium
Mycobacterium
gordonae
Mycobacterium bovis
Excelente
Caractersticas de las
colonias
Grandes, secas,
amarillentas,
granulares
Lisas, sin pigmentos
Excelente
Lisas
---
---
SIEMBRA
- SEMBRAR EN SUPERFICIE.
- UTILIZANDO LA TCNICA DE POUR PLATE: SEMBRAR 1 ML DE
MUESTRA Y AGREGAR APROXIMADAMENTE 15 ML DE MEDIO DE
CULTIVO FUNDIDO Y ENFRIADO A 45-50 C.
INCUBACIN
DURANTE 18-48 HORAS, A 35-37 C, EN ATMSFERA AERBICA
RESULTADOS
Microorganismos
Colonias
Escherichia
CARACTERSTICAS
coli ATCC 25922 DEL MEDIO
Rojas con halo turbio
MEDIO PREPARADO: ROJO PRPURA
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603
Rosadas mucosas
ALMACENAMIENTO:
Salmonella typhimurium ATCC 14028
Incoloras, transparentes
MEDIO DESHIDRATADO: A 10-35 C.
Shigella flexneri ATCC 12022
MEDIO PREPARADO: A 2-8 C.Incoloras, transparentes
Proteus mirabilis ATCC 43071
Incoloras, transparentes
TCBS
Medio
MEDIO SELECTIVO
PARA EL AISLAMIENTO Y CULTIVO
DE VIBRIO CHOLERAE, VIBRIO PARAHEMOLYTICUS Y
OTRAS ESPECIES DE VIBRIO A PARTIR DE HECES,
AGUA
Y ALIMENTOS
CONTAMINADOS.
Frmula
(en gramos
por litro)
ENTEROBACTERIAS.
SIEMBRA
1. MATERIALES CLNICOS:
Caractersticas de las
Microorganismo
Crecimiento
A-MATERIA FECAL: SUSPENDER 1 GRAMO DE HECES
O EL CONTENIDO DEL
colonias
HISOPO EN 10 ML DE AGUA PEPTONADA ALCALINA E INCUBAR DE 6 A 8
HORAS A 35-37C, EN AEROBIOSIS.
Amarillas de 2-3 mm
B-MATERIALES
DE INFECCIONES
EXTRAINTESTINALES:
NO
Vibrio
cholerae PROVENIENTES
Bueno
de dimetro,
de borde
ES NECESARIO REALIZAR ENRIQUECIMIENTO PREVIO
EN AGUA PEPTONADA
traslcido
ALCALINA.
Centro verde azulado,
V. parahaemolyticus
Bueno
2-AGUA:FILTRAR DE 1 A 10 LITROS (EL borde
VOLUMEN
DESEADO) DE AGUA
traslcido
CON MEMBRANA DE 0.22.COLOCAR LA MEMBRANA EN UN RECIPIENTE
V. CONTENIENDO
alginolyticus AGUA PEPTONADA
Bueno ALCALINA
Amarillas
grandes
E INCUBAR
DE 6 A 8 HORAS A
35-37C, EN AEROBIOSIS.
Aeromonas spp.
Inhibido
-3-ALIMENTOS:LICUAR 25 G DE LA MUESTRA CON 225 ML DE AGUA
E. coli
-- A 35-37C, EN
PEPTONADA
ALCALINA E Inhibido
INCUBAR DE DE 6 A 8 HORAS
AEROBIOSIS.
CARACTERSTICAS DEL MEDIO
EN TODOS LOS CASOS SEMBRAR UNA ALCUOTA
DELPREPARADO:
CALDO DE VERDE AZULADO
MEDIO
ENRIQUECIMIENTO EN LA SUPERFICIE DE UNA
PLACA DE TCBS, POR
ALMACENAMIENTO
ESTRIADO, PARA EL AISLAMIENTO DE COLONIAS.
MEDIO DESHIDRATADO: A 10-35 C.
INCUBACIN
MEDIO PREPARADO: A 2-8 C.
Chocolate Agar
Permite el crecimiento de microorganismos
exigentes
en
sus
requerimientos
nutricionales, por ejemplo especies de
Streptococcus, Haemophilus y Neisserias
patgenas.
Fundamento.- El medio de cultivo es
ampliamente nutritivo por la presencia de
peptona, triptena, extracto de levadura,
extracto de corazn y almidn. El agregado
de sangre y suplemento Britalex con
solvente aporta nutrientes, vitaminas y
minerales adicionales. El cloruro de sodio
mantiene el balance osmtico y el agar es
el agente solidificante.
FRMULA
Peptona
de
carne................................................................................................5.0
Tripte...............................................................................................................
..12.0
g
Extracto
de
levadura...........................................................................................5.0
g
Extracto
de
corazn............................................................................................3.0
g
Almidn
soluble..................................................................................................1.0 g
Cloruro
de
sodio................................................................................................5.0
g
Agar.................................................................................................................
..15.0
g
Sangre
ovina......................................................................................................50 ml
Suplemento
Britalex........................................................................................10 ml
Agua
purificada.................................................................................................100
0 ml
INSTRUCCIONES
PLACAS LISTAS PARA USAR.
CARACTERSTICAS DEL PRODUCTO
MEDIO DE CULTIVO COLOR MARRN.
ALMACENAMIENTO
A 2-8 C.
SIEMBRA
EN SUPERFICIE, ESTRIAR DIRECTAMENTE EL MATERIAL EN ESTUDIO.
INCUBACIN
EN GENERAL SE RECOMIENDA: BACTERIAS DE FCIL CRECIMIENTO: EN
AEROBIOSIS, A 35-37 C DURANTE 18 A 24 HORAS.
BACTERIAS EXIGENTES EN SUS REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES: EN
ATMSFERA CON 5 % DE CO2, A 35-37 C DURANTE 18-48 HORAS.
PREPARACIN
MEDIO THAYER MARTIN MODIFICADO LISTO PARA USAR FUNDIR EL
CONTENIDO DE UN FRASCO DE 50 ML DE AGAR BASE GC DOBLE
CONCENTRACIN Y ENFRIARLO A 50C. RECONSTITUIR EL BRITALEX Y EL
VCNT CON 2,1 ML DE SOLVENTE CADA UNO. ADICIONAR ASPTICAMENTE LA
SOLUCIN DE HEMOGLOBINA, 1 ML DE VCNT Y 1 ML DE BRITALEX A LA BASE
GC DOBLE CONCENTRACIN. CONSERVAR EL RESTO DE VCNT Y BRITALEX
RECIN PREPARADOS EN CONGELADOR (ESTABLE 15 DAS A -20C). MEZCLAR
PARA HOMOGENEIZAR. DISTRIBUIR UNOS 10 ML POR PLACA Y DEJAR
SOLIDIFICAR. LAS PLACAS PUEDEN CONSERVARSE EN HELADERA POR 3
SEMANAS, SIN PERDER SU POTENCIA INHIBIDORA.
SIEMBRA
SEMBRAR INICIALMENTE EL MATERIAL CON HISOPO O ANSA SOBRE UN TERCIO
DE LA SUPERFICIE DE LA PLACA, ESTRIANDO EL RESTO DE LA SUPERFICIE
PARA OBTENER COLONIAS AISLADAS.
Microorganismos
T.M.
T.M.
A.N
C22C
OXI
GLU
MAL
N. gonorrhoeae
N. meningitidis
Acinetobacter spp.
-*
Neisseria spp.
Moraxella spp
Moraxella (Branhamella)
catarrhalis
INCUBACIN
INCUBAR LAS PLACAS A 35-36C EN RECIPIENTES CON CIERRE HERMTICO,
EN CMARA HMEDA Y ATMSFERA DE CO2, DURANTE 18 A 72 H.
IDENTIFICACIN
LAS COLONIAS DE GONOCOCOS Y MENINGOCOCOS OBTENIDAS EN ESTE
MEDIO SELECTIVO SON USUALMENTE OPACAS, GRISCEAS, CONVEXAS, DE
1-4 MM DE DIMETRO. LUEGO DE 48 H DE INCUBACIN PUEDEN
TRANSFORMARSE EN COLONIAS MUCOIDES. COLORACIN DE GRAM:
DIPLOCOCOS GRAM NEGATIVOS. SE SUGIERE PROSEGUIR CON ESTE
ESQUEMA DE IDENTIFICACIN.
Agar BD
Campylobacter
(Skirrow)
FRMULA (gramos x
litro)
Es un medio selectivo
para el aislamiento de
especies
de
Campylobacter
partiendo de muestras
clnicas
Infusin de
msculo cardiaco
2.0
Digerido
pancretico de
casena
13.0
Extracto de
levadura
5.0
Cloruro sdico
5.0
Vanocomicina
0.01
Trimetoprima
0.005
Poliximina B
2500 Ul
Agar
15.0
Sangre de caballo, 7%
desfibrinada ypH 7.3 0.2
Microorganismos:
Campylobacter jejuni
subesp
Campylobacter fetus DSM
Escherichia coli
Proteus mirabillis
Enterococcus faecallis
Agar sulfito de
bismuto
Frmula (gramos x
litro)
Peptona
10.0
bacteriolgica
Indicadr bismuto
sulfito
8.0
Extracto de carne
5.0
Dextrosa
5.0
Fosfato disdico
4.0
Sulfato ferroso
0.30
Vede brillante
0.025
Agar bacteriolgico
20.0
Es
un
medio
altamente
selectivo que se recomienda
para
el
aislamiento
de
Salmonella
spp,
especialmente en Salmonella
thyphi presente en heces
Cmo se prepara?
Microorganism
o
Desarrollo
Color colonia
E. Coli ATCC
25922
Inhibicin
parcial
Marrn-verde
Salmonella
enteriditis
Bueno
Negro con
brillo metlico
Salmonella
typhi
Bueno
Negro con
brillo metlico
Shigella
flexneri
Inhibicin
parcial
Marrn
Agar Sabourand
ESTE MEDIO ES UTILIZADO PARA EL AISLAMIENTO E
IDENTIFICACIN
DE:
Hongos Miceliales
era
m
i
r
p
r
ado po
z
i
l
i
t
u
Fue
mond
y
a
R
r
vez po
1892
n
e
d
u
ra
Sabou
Hongos
Levaduriformes
Hongos patgenos
dermatofitos
Componentes:
PREPARACION
o
t
n
e
i
m
i
c
e
r
C
s
o
v
i
t
l
u
c
de
Agar Campylosel
ES UN MEDIO SELECTIVO QUE SE SE UTILIZA PARA EL
AISLAMIENTO DE:
COMPOSICIN:
de
o
l
l
rro
a
s
n de a
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u
o b rucell
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b
itie
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r
d
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P
pa
e
c
t e:
n
s
e
a
l
alm
i
c
e
esp
Bibliografas:
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MEDIOS EN PLACA LISTOS PARA USAR. BD. Recuperado en:
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Casado Gonzlez, Concepcin. Torrico Cabezas, Gertrudis. Medina Anguita, Mara. (2012)
MEDIOS DE CULTIVO EN UN LABORATORIO DE MICROBIOLOGA. Libros de laboratorio.
Recuperado en: https://libroslaboratorio.files.wordpress.com/2012/09/medios-de-cultivo-enun-laboratorio-de-microbiologc3ada.pdf
Laboratorios Britania. 2010. Productos. Baird Parker Agar Base. Pgina web
http://www.britanialab.com/productos/343_hoja_tecnica_es.pdf
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Pgina web http://es.slideshare.net/ednamaritza/medios-de-cultivo-39066033
Ma. Del Rosario Pascual. Microbiologa alimentaria. 2 edicin, 2000. pgina 389. Editorial
Daz de Santos
BD. Instrucciones de uso- Medios en placa listos para uar. 2014. pginas web:
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