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ENZIMAS
2014 - B
Enzimas .
Definicin
Molculas proteicas encargadas de
la catlisis de reacciones qumicas
en los seres vivos
RIBOZIMAS,
son enzimas?
Thomas Cech, col.
1982.
Establecen
molculas de RNA
con capacidad
cataltica,
comportndose
como enzimas muy
activas en el auto
procesamiento del
rRNA transcrito
Accin de una
ribozima
Enzimas.
Definicin
Macromolculas
biocatalizadoras de
reacciones qumicas en seres
vivos
5
Cmo se aumenta la
velocidad de reaccin?
Elevando temperatura
Disminuyendo la energa de
activacin
Enzimas aceleran la velocidad de
reaccin por medio de disminuir la
energa de activacin
ES
Energa de
Activacin
(Ea)
Cantidad de energa
mnima para que
sustrato (S) alcance
el estado de
transicin (E-S) y
luego se transforme
en producto (P).
Estado de Transicin
(E-S)
E-S
Estado intermedio
en el que enlaces
de (S) estn
suficientemente
distorsionados
para su conversin
en (P)
E+S
E+P
E+S
E-S
E+P
de sustrato
que desaparece por unidad
de tiempo.
Concentracin de
producto que se forma por
unidad de tiempo.
En la prctica......
Grfica de MichaelisMenten
Vmax
----------------------------------------------------------
Grfica de Lineweaver-Burk
1/v = Km/Vm x 1/[S] + 1/Vm
Suponiendo:
1/Vm = 2
Vm =
Por qu determinar
Km ?
Establece
el valor aprox. de la
concentracin de sustrato en la clula.
Identificacin de isoenzimas
Mide afinidad de la enzima por
determinado sustrato
A mayor valor de Km, la afinidad de
la enzima por el sustrato es baja.
Glucosa
Hexoquina
sa
Glucoquinasa
ATP
AD
P
Km hexoquinasa =
Glucosa-6- 0.1 mM
P
Km glucoquinasa =
10 mM
[glucosa]
sangre
= 4 - 5 mM
Clasificacin
Clase 1. Oxido-reductasas
Procesos de xido-reduccin.
Ej: Deshidrogenasas, peroxidasas
Clase 1. Oxido-reductasas
2e
LACTAT
O
PIRUVAT
O
+ 2H2O
H2O2 --------2H2O
O2
Clase 2. Transferasas
Transferencia de
grupos
funcionales:
amino, acilo,
fosfato, glucosilo,
grupos
monocarbonados
Ej:
transaminasa,
quinasas.
Glucosa + ATP
Glucosa-6P + ADP
Hexoquinasa
Clase 3. Hidrolasas
Catalizan la ruptura de enlaces qumicos con la
participacin de las molculas de agua
Lactasa
Lactosa + H2O
glucosa + galactosa
Clase 4. Liasas
Catalizan reacciones en las cuales se forman o
eliminan grupos H2O, NH3, CO2 para formar o
eliminar doble enlace, respectivamente.
H2 O
Fumarasa
Clase 5. Isomerasas
Catalizan isomerizaciones de diversos tipos ptica,
geomtrica, funcional, de posicin, etc (cis-trans,
ceto-enol, aldosa-cetosa)
Clase 6. Ligasas
Ligan o separan compuestos y para ello utilizan
energa o liberan energa
PropionilCoA
DmetilmalonilCoA
Donador
Nmero sistemtico
Enzyme
Comission
Grupo
Subgrupo
EC 2.7.1.1
Enzima
Sub-subgrupo
Sitio cataltico de
enzima
carboxipeptidasa
3) En otras enzimas el
ion metlico constituye
un grupo puente para
unir el sustrato al sitio
activo.
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COENZIMAS
Actan generalmente
como transportadores
intermediarios de grupos
funcionales, de
determinados tomos o
de electrones, los cuales
son transferidos de una
sustancia a otra en la
reaccin enzimtica
global.
Coenzimas
derivadas de
niacina:
NAD++, NADH +
H++, NADP++,
NADPH + H++
Oxidado:
NAD+
Reducido:
NADH
+
H+
Coenzimas
NAD+, NADH + H+
29
30
TiaminaPP
Tiamina (vit.
B-1)
Tiamina-pirofosfato
(TPP)
Coenzima derivada de
vit. B66:
piridoxal fosfato
Enzima
Aminotransfera
sa
PiridoxalP
Glutama
to
cetocid
o
Alfa
cetoglutar
ato
aminoci
do
32
Coenzima derivada de
cido pantotnico:
Coenzima A
AcetilCoA
Vit. B-12
(Cianocobalamina)
Complejo hexacoordinado de
cobalto
Es coenzima de enzimas que
catalizan la transferencia
de grupos metilo (-CH3)
VITAMINA
COENZIMA
DERIVADA
FUNCIN
Tiamina (B1)
Pirofosfato de
tiamina
Descarboxilacin y
transferencia de grupos acilo.
Riboflavina (B2)
Flavina
mononucletido
Flavina y adenina
dinucletido
Nicotinamida y
adenina dinucletido
cido Nicotnico
Nicotinamida y
adenina dinucletido
fosfato
TPP
FMN
FAD
NAD+
NADP+
Piridoxina, piridoxal
y piridoxamina (B6)
cido Pantotnico
Biotina
cido Flico
Cobalamina (B12)
Portadores de hidrgeno y
electrones en oxidoreducciones
Portadores de hidrgeno y
electrones en oxidoreducciones
Transferencia de grupo amino
y decarboxilacin
Coenzima A
Enlazada
covalentemente a
carboxilasas
Tetrahidrofolato
Coenzima de
cobalamida
CoASH
Transferencia de acilos
Carboxilacin
TH4
Transferencia de un carbono
Reordenamientos,
transferencia de metilos
Inhibicin Enzimtica
1968 Introduccin en
mercado de BACTRIM
(combinacin de
trimetoprimsulfametoxasol).
De qu manera este medicamento ejerce una
accin antibacteriana y antiparasitaria?
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Trimetoprim (TMP) y
sulfametoxazol (SMX) actan de
forma sinrgica.
Trimetoprim inhibe de forma
competitiva la enzima
dihidrofolato reductasa.
TMP-SMX inhibe 50,000 veces
ms la dihidrofolato reductasa
bacteriana que la de los
mamferos
Caractersticas de la
inhibicin enzimtica
Aplicaciones
Son el fundamento de
frmacos antivricos,
antibacterianos y
antitumorales
Tipos Inhibicin
Inhibicin Permanente
Unin IRREVERSIBLE por enlaces
covalentes, provocando modificacin
qumica de grupos en centros de fijacin y
sitio activo de la enzima.
Inhibicin permanente
Gas sarn
Compuesto organofosforado
inhibe la actividad de
ACETILCOLINESTERASA
Tipos de inhibicin
reversible
Competitiva
Acompetitiva
No competitiva
Inhibicin Competitiva
I y S compiten por
sitio cataltico.
I y S son de
estructura qumica
parecida
Afecta el valor de
Km.
Vm permanece
inalterable
FdUMP
UMP
Fluorouracil
dTM
P
DNA
Timidila
to
7, 8
5, 10-metilen
tetrahidrofol sintasa dihidrofola
to
ato
Serina
hidroximetil
transferasa
Glicin
a
Serin
a
Dihidrofol
ato
reductasa
Tetrahidrofolat
o
Inhibici
n
NADPH
+ H+
Metotrex
ato
NADP
+
Accin Bioqumica de
Agentes
METOTREXATO
c.
flico
Las posiciones 7 y 8
llevan hidrgeno en el
DIHIDROFOLATO
Inhibicin No
competitiva
I se une tanto a la
enzima como al
complejo E-S.
K no se altera
m
Vm vara. Disminuye
a medida que
aumenta [I].
I, podra impedir la
conformacin
tridimensional del
sitio cataltico.
Anlogo de Estado de
Transicin (AET)
El inhibidor no es
estrictamente anlogo
del substrato, sino del
Estado de Transicin
(E-S) de la reaccin.
La afinidad de las
enzimas por los AET es
enorme, del
orden nM o pM, con lo
que la fijacin es tan
fuerte que
puede considerarse
irreversible
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Anlogo de Estado
de Transicin (AET)
Sustr
ato
O2N
N+ CH3
CH3
Anlogo de
un E-S
O
-
O2N
O2N
ES
Produc
tos
H3C
O-
H3C
CH3
O
OH
HO
N+ CH3
H3C
O
N+ CH3
CH3
O2 N
OP
H3 C
N+ CH3
CH3
Angiotensina I
Enzima convertidora
de Angiotensina, ECA
Angiotensina II
(aumento de presin
arterial)
49
Anlogos de Estado de
Transicin: Captopril
R
HN
CH COO-
C O
R'
C H
NH
HO C
C
O
Estado de transicin
de la ECA
CH COO-
C O
H3C C H
H C
H
S
Captopril
50