Radicales libres, estrs

oxidativo y antioxidantes

Italo Chiffelle

Estructura Atmica
Nmero Atmico (Z): corresponde a la suma
de protones que tiene un tomo
Nmero Msico (A): corresponde a la suma de protones
y neutrones que tiene un tomo

Ej.: Para el tomo de oxgeno, 8O16, tiene 8 p y 8 n

Configuracin electrnica.
Ej.: 8O 1s2 2s2

2p4

Configuracin electrnica
Diagrama de orbitales
Representacin de Lewis:
.
Atomo de O
:O:
.
.. ..
Molcula de O2 O:
.. :O
..

Ncleo

1s2

Aumento de Energa

2s

2p6

3s

3p

3d10

4s

4p

4d

4f14

5s

5p

5d

5f

5g

6s

6p

6d

6f

6g

6h

7s

7p

7d

7f

7f

7h

Orbitales
Tericos

7i

Radical libre: es un tomo o molcula que

posee
uno o ms electrones no apareados girando en
su rbita externa.

R
Esta configuracin espacial lo hace qumicamente
muy inestable, ya que el electrn impar o
solitario busca desesperadamente una pareja,
para salir de su desequilibrio atmico.

Para lograr su objetivo, sustrae un electrn

a cualquier molcula vecina, esto es,
OXIDA a la molcula.

R + :M:

:M + R:

Esta molcula, a su vez, altera su estructura

qumica, convirtiendse en otro radical libre
ansioso por captar un electrn. Se genera as
una reaccin en cadena.

La principal fuente de origen de los radicales libres

es la respiracin, ya que entre un 1 a 3% del oxgeno
consumido se transforma en radicales libres.
Los radicales libres provenientes del oxgeno
colectivamente reciben el nombre de especies
reactivas del oxgeno o ROS (reactive oxygen species)
Radicales libres
ROO radical perxido
OH radical hidroxlo
O2 anin superxido

No Radicales
H2O2 perxido de hidrgeno
1

O2* oxgeno singlete

La mayor parte del O2 consumido es reducido a agua

por accin del complejo citocromo-oxidasa de la
cadena respiratoria mitocondrial, segn la
reaccin global:
O2 O2 H2O2 OH + H2O H2O
Adems, los ROS tambin se producen en
el organismo como respuesta a la exposicin a
radiaciones ionizantes, rayos UV, contaminacin
ambiental, humo de cigarrillos, algunos frmacos,
hiperoxia, exceso de ejercicio e isquemia,
entre otros.

El perxido de hidrgeno (H2O2) no es estrictamente

un RL pero por su capacidad de generar OH en
presencia de metales como el hierro, se le incorpora
como tal.
H2O2

H2O

HClO

*O2 + Cl--

cido hipocloroso

eO2

O2
O2*--

*--

Fe2+

O2
HO

Superoxido dismutasa
2 2
(SOD)
Peroxido de hidrgeno

Oxgeno
singlete

Fe3+
*OH-H2O

H+
H2O

Fuentes biolgicas de Radicales Libres (RL):

- Mitocondria: constituye la fuente principal de RL,
a travs del proceso de fosforilacin oxidativa. El
O2 acta como el aceptor final de electrones, con
produccin de agua. En el proceso se forman
molculas con diferente grado de oxidacin
Reduccin Completa: O2 + 4H+ + 4e 2H2O
Especies Parcialmente Reducida:
O2 + e O2 (Radical superxido)
O2 + 2H+ + 2e H2O2 (Perxido de hidrgeno)
O2 + 2H+ + 3e OH- + OH (Radical hidroxlo)
Paradoja: El oxgeno es esencial para la vida, pero es la sustancia
ms txica a causa de la reactividad de las especies parcialmente
reducida. De hecho, el oxgeno en concentraciones altas es txico
para la mayora de los organismos anaerobicos, y en la fase inicial
de la evolucin fue txico para todas las formas de vida

Peroxisomas: corresponden a organelos

citoplasmticos muy ricos en oxidasas y generan
H2O2, el cual es depurado por enzimas especficas
(catalasa) y transformado en H2O.
Leucocitos polimorfonucleares, ya que poseen
en sus membranas NADPH oxidasa generadora de
O2 que en presencia de hierro se transforma en
el altamente txico OH, que es muy reactivo y
mutagenico. Esta situacin se da particularmente
en los procesos inflamatorios.

La enzima xantino deshidrogenasa predomina en

los endotelios, normalmente depura las xantinas, en
procesos de isquemia reperfusin produce el
anin radical superxido (O2)

Especies reactivas de oxgeno

O2

Cadena Respiratoria
Mitocondrial
NADPH oxidasa
Xantina oxidasa
NO sintetasa

O2--

H2O2

*OH--

ONOO-NO*

NO2--

Entonces, los Radicales Libres se forman

en condiciones fisiolgicas en proporciones
controlables por los mecanismos de defensa
celulares

ANTIOXIDANTE

ROS

Estrs oxidativo se produce por aumento en la

velocidad de generacin de ROS o disminucin
de las defensas (antioxidante)

Qumicos: aumento de metales pesados

xenobiticos, componentes del tabaco.

Factores
favorecen
Estrs
Oxidativo

Drogas
Fsicos: radiaciones UV, hiperoxia.

Orgnicos y metablicos: dieta hipercalrica,

dieta insuficiente en antioxidantes, diabetes,
procesos inflamatorios, fenmenos de isquemiareperfusin y EJERCICIOS extenuantes

Toxicidad de los radicales libres

Toxicidad de los radicales libres

- Deterioro oxidativo de compuestos orgnicos
- Naturaleza autocataltica de las reaciones
Reac. Haber Weiss: H2O2 + O2Reac. Fenton: H2O2 + Fe2+

O2 + OH- + OH

Fe3+ + OH- + OH

El mecanismo de oxidacin autocataltica, puede

dividirse en 3 etapas:
i.- Iniciacin
ii.- Propagacin
iii.- Trmino

Oxidacin de un cido graso poliinsaturado

Iniciacin
Sustraccin de H del grupo metileno, con produccin
de un radical cido graso (R) al dejar un electrn
desapareado en el carbono:

RH + OH R + H2O

Oxidacin de un cido graso poliinsaturado

Propagacin
El radical cido graso (R) se combina con O 2
formando un lipoperxido (ROO):

R + O2 ROO

Oxidacin de un cido graso poliinsaturado

Este perxido puede retirar un nuevo hidrgeno
de otro carbono.
El proceso es autocataltico y convierte el carbono
del cido graso de los fosfolpidos de membrana
en hidroperxidos (ROOH)

ROO + RH ROOH + R

La lipoperoxidacin sigue propagndose de esta

manera y llega a su termino cuando dos ROOH
reaccionan entre s dando un tetrxido o cuando
son neutralizados por antioxidantes
Tetrxidos dan lugar a aldehdos como el
malondialdehido (MDA)

CH3-(CH2)4-CH=CH-CH2-CH=CH-(CH2)7-COOH
I*
R`
R``
IH
R`-CH=CH-C*H-CH=CH-R``
R`-C*H-CH=CH-CH=CH-R``
O2
R`-CH-CH=CH-CH=CH-R``
OO*

LH
L*

R`-CH-CH=CH-CH=CH-R``

R`-CH=CH-CH=CH-C*H-R``
O2
R`-CH=CH-CH=CH-CH-R``
LH
OO*
L*
R`-CH=CH-CH=CH-CH-R``
OOH

OOH

Malondialdehdo

HIPOTESIS DEL ESTRS OXIDATIVO

ESTRS OXIDATIVO

O2

O2H2O2
OH
Especies Reactivas de Oxgeno (ROS)

Lpidos

Enzimas

Protenas
Receptores
DNA
Reacciones con sustratos biologicos

Membrana

Dao en Tejidos

Acidos
Nucleicos

Hidratos de
Carbono

ENFERMEDAD

El dao a biomolculas , implica la gnesis o

exacerbacin de numerosos procesos:
- Aparato cardivascular:
aterosclerosis
infarto al miocardio
diabetes
cardiopata alcohlica

- Sistema neurolgico:
enfermedad de Parkinson
Alzheimer
hiperoxia
isquemia o infarto cerebral
- Aparato ocular
cataratas
dao degenerativo de la retina
fibroplasia retrolental

- Aparato respiratorio:
distrs respiratorio (sndrome de dificultad
respiratoria del adulto)
tabaquismo
cncer del pulmn
enfisema
- Rin:
sndrome autoinmune
nefrotoxicidad por metales.

Quin protege a las molculas

del dao oxidativo?

Los antioxidantes

Los antioxidantes son sustancias que pueden

inhibir la oxidacin.
- Prolongando la fase de iniciacin de la autoxidacin
(antioxidantes preventivos, ej. Catalasa, SOD, vit E)
- Inhibiendo la fase de propagacin de la autoxidacin
(antioxidantes quebradores de cadena, ej. Vit C)

Vitamina E y GSH
-Caroteno
Glutation Transferasa
Glutation Peroxidasa

Vitamina E y GSH
Metaloenzima

Vitamina C y E
-Caroteno

Lisosoma
RE

Ncleo
DNA

Peroxisoma
Catalasa

Citoplama

Mitocondria

Vitamina C y E
GSH
SOD Cu/Zn
Glutation peroxidasa
Glutation transferasa
Ferritina
Metaloenzima
Carnosina
Arserina

Vitamina E y GSH
SOD Mn
Glutation peroxidasa
Bicapa lipidica de la Vitamina C y E
Glutation transferasa
-Caroteno
membrana celular
Ubiquinona
CLA
Distribucin de la defensa primaria intracelular de los antioxidantes

NIVELES DE DEFENSA
Primer nivel: ENZIMATICO
Se origina al interior del organismo y opera de 2
formas:
i) Enzimas especializadas en captar el anin radical
superxido (O2) y transformarlo en H2O2
Superxido dismutasa (SOD):
O2+ O2+ 2H+
H 2 O2 + O 2

ii) Enzimas especializadas en neutralizar el H2O2

- Catalasa, ubicada en los peroxisomas
H2O2 + H2O 2H2O + O2
- Glutation-peroxidasa (citoplasmtica contiene Se)
2GSH + H2O2 GSSG + 2H2O
GSH = glutatin reducido
GSSG = glutatin oxidado

Segundo nivel: ANTIOXIDANTE (no-enzimtico)

Formada por diferentes compuestos que atrapan
o neutralizan RL, interrumpiendo las reacciones
en cadena.
Los antioxidantes entregan un electrn a los RL,
con lo cual desactivan o apagan el proceso, pero
sin transformarse ellos en radicales, se forman RL
poco reactivos.

Vitamina E: neutraliza el O2 singlete, captura OH,

neutraliza perxidos y captura anin superxido.
CH3
H3C

CH3
CH3

CH3

HO
CH3

GSSG

ROO*

CH3

-tocoferol
(vitamina E)

6-Fosfoglicerido
NADPH

Hidroxiperxido
Glutation
Peroxidasa (Se)

Glucosa-6-Fosfato
Deshidrogenasa
(Ruta pentosa fosfato)

NADP+

ROOH

CH3

Glucosa-6-Fosfato

GSH
CH3
H3C

CH3
CH3

CH3

CH3

CH3

*O
CH3

Se encuentra en aceites vegetales de nueces, cereales

y vegetales grasos (aceituna, man, etc).

Vitamina C: neutraliza el O2 singulete, captura OH, captura

anin hidroperxidos y regeneran la forma oxidada de la
vitamina E.
Se encuentra en muchas hortalizas y frutas. Proviene de
naranjas, limones, limas, frutillas, kiwi, brocoli y otros.
HOH 2 C

OH
O

C quiral (L)

O
Oxidacin
Con aire

Protn cido
(pKa 4,17)

HOH 2 C
HO

OH

cido L-ascrbico
(vitamina C)
Punto de Fusin 192C

OH

H
O

cido deshidroascorbico

-caroteno: neutraliza el O2 singulete

es el ms abundante carotenoide, pigmentos amarillos
y rojos que se encuentran distribuidos en las plantas.
CH3

H3C CH3

CH3

H3C

CH 3

CH3

CH3

H3C

CH3

Polifenoles: Son numerosos compuestos, tales como

los flavonoides. Provienen de frutas, verduras, y
bebidas como el t y vino tinto.

GS-electrfilo
electfilo
Glutatin S-Transferasa

Generacin de RL
Superoxido
dismutasa

O 2 - + H+

GSH
H2O2

Glutatin
reductasa

Catalasa

H2 O + O2
Reac. Fenton

Fe2+

NADP+

Glutatin
peroxidasa
dependiente
de Se

NADPH
GSSG
H2O + O2

Fe3+ + OH- + OH
Peroxidacin
O 2 + H2 O 2
-

Reac. Haber-Weiss

O2 + OH- +OH

Catalisada por sales de Fe

Resumen de las vias para la generacin de especies de oxgeno reactivas y

de la accin de algunas enzimas involucradas en la defensa de RL de la clula

Biomarcadores de estrs oxidativo

- Capacidad Total antioxidante
- Actividad de enzimas antioxidante:
Catalasa, Glutation peroxidasa, Superoxido dismutasa
- Concentracin de antioxidantes no-enzimaticos
(tejido o plasma): vitaminas A, C, E, ubiquinonas, GSH
- Dao oxidativo: Protenas, lpidos, DNA
- Resistencia al estrs oxidativo

Efecto de radicales libres en diabetes