LABORATORIO DE QUMICA

ORGNICA I
CROMATOGRAFA
EN CAPA FINA

Contenido
Tema

Diapositiva

1. Definicin de cromatografa

2. Coeficiente de particin

3. Clasificacin de mtodos cromatogrficos

4. Cromatografa en capa fina

5. Adsorcin

10

6. Adsorbentes

11

7. Eluyentes

12

8. Orden de elucin

14

9. Metodologa

15

10. Figuras

17

11. Polaridad-electronegatividad

18

12. Factores que influyen en la elucin

22

13. Aplicaciones

23

14. Objetivos

24

15. Plan de trabajo

25

Cromatografa
La cromatografa es la separacin de
una mezcla de dos o ms compuestos
por
distribucin
diferencial entre dos
fases,
una estacionaria y otra mvil.
Hay varios tipos de cromatografa,
segn la naturaleza de las dos fases
involucradas,
los
compuestos
son
retenidos en la fase estacionaria por
adsorcin o particin.

Coeficiente de particin
Las separaciones cromatogrficas dependen de la
diferencia entre los coeficientes de particin de los
componentes entre dos fases inmiscibles.
El coeficiente de particin K de una substancia en un
sistema de dos fases est dado por:
K = cs/cm
Donde:
cs = concentracin de la substancia en la
estacionaria
cm = concentracin de la substancia en la fase mvil.

fase

Coeficiente de particin

Las dos fases de todo sistema cromatogrfico se

denominan:
-Fase estacionaria o fase fija: un slido, un gel, un
lquido.
-Fase mvil: un lquido o un gas, que fluye sobre o
a travs de la fase fija.
La fase mvil, progresa en relacin con la otra, la
fase estacionaria, y transporta las substancias que
se estn separando.

Coeficiente de particin
Se escogen las fases de modo que los
coeficientes de particin de los componentes de
la mezcla sean lo ms distintos posible.
A mayor coeficiente de particin de una
substancia, mayor es su concentracin en la
fase estacionaria y ms lento su avance a lo
largo del sistema cromatogrfico.

Clasificacin de mtodos
cromatogrficos
Fase
mvil
Gas

lquido

Fase
estacionari
a

Tcnica cromatogrfica

Slida

Cromatografa de gases
(cromatografa gas-slido)

Lquida

Cromatografa de gases
(cromatografa gas-lquido, CGL)

Slida

Cromatografa de adsorcin
(Particin lquido slido, cromatografa
lquido-slido, CLS).
Cromatografa en capa fina, cromatografa
en papel y cromatografa en columna.

Lquida

Particin lquido-lquido
(cromatografa de particin, cromatografa
lquido-lquido, CCL)

Clasificacin de mtodos
cromatogrficos
Adems, de acuerdo con el mecanismo de
retencin,
la
cromatografa
se
puede
clasificar en los siguientes tipos:

Cromatogr
afa

De adsorcin (normal, de fase

reversa)
De particin lquido-lquido
De intercambio inico
De permeacin sobre gel
De afinidad

Cromatografa en capa fina.

La cromatografa de capa fina, es un tipo de

cromatografa donde la fase estacionaria es
una capa delgada de un material depositado
sobre un soporte, a este conjunto se le llama
placa.
La fase mvil es un disolvente o mezcla de
disolventes, llamada eluyente, que se mueve
por la fase estacionaria por capilaridad.

Adsorcin
Generalmente, las placas estn formadas por
una capa de gel de slice u otro material con
propiedades adsorbentes.
Adsorcin es la capacidad de una sustancia slida
llamada adsorbente, para detener o concentrar
selectivamente sobre su superficie inmvil o
estacionaria productos que van en una disolucin
en movimiento.

Adsorbentes
Adsorbentes slidos para cromatografa
Papel
Celulosa
Almidn
Azcares
Silicato de magnesio
Sulfato de calcio
cido saliclico
Slica gel
Florisil

Aumenta la
fuerza de las
interacciones
de enlace
hacia
compuestos
polares

xido de magnesio
xido de aluminio
(Almina*)
Carbn activado (Norit)
*Su actividad se puede modificar por agua y se puede hacer cida,
neutra o alcalina.

Eluyentes ms comunes
Disolvente

Constante
dielctrica

Disolvente

Constante
dielctrica

Hexano

1.9

Cloroformo

4.8

ter de petrleo
p. e. 30-60

2.0

Acetato de etilo

6.0

Ciclohexano

2.0

2-Propanol

18.3

Benceno

2.3

Acetona

20.7

Tolueno

2.4

Etanol

24.3

Tricloroetileno

3.4

Metanol

32.6

ter dietlico

4.3

Agua

78.0

Eluyentes
La serie eluotrpica:
hexano < tolueno < cloroformo < diclorometano <
acetona < acetato de etilo < etanol < metanol < H 2O
Para conseguir el poder de elucin deseado se utilizan
mezclas de disolventes
Hexano:
Hexano:
Hexano:
Hexano:

Acetato
Acetato
Acetato
Acetato

de
de
de
de

etilo,
etilo,
etilo,
etilo,

100: 1
20: 1
10: 1
1: 1 Mayor poder de elucin

Orden de elucin

Alcanos
Alquenos
Hidrocarburos
aromticos
teres

Amidas
Fcilmente
eluidos con
disolventes
poco
polares

Dioles
cidos
carboxlicos
Cetocidos

Cetonas

Aminas

Aldehdos

Alcaloides

Alcoholes

Difcilmente
eludos se
necesitan
disolventes
polares

Metodologa
El soporte ms comn es una placa de vidrio,
pero tambin se utilizan otros materiales.
Se extiende una capa delgada del adsorbente
sobre la placa y se deja secar. Una placa de
vidrio recubierta y seca, se llama placa de
capa fina.
Cuando una placa de capa fina se coloca en
posicin vertical en un recipiente que
contiene un poco de disolvente, el disolvente
asciende por la capa de adsorbente en la
placa por accin capilar.

Metodologa
La muestra se aplica generalmente como un
pequeo punto cerca de la base de la placa,
con un tubo capilar pequeo y se forma una
pequea mancha.
Si la fase estacionaria es fuertemente polar, se
une fuertemente a las sustancias polares.
Cuando la fase lquida mvil es menos polar
que el adsorbente y disuelve ms fcilmente
sustancias que son menos polares o incluso no
polares slo estas se desplazarn.
As, mientras que las sustancias que son ms
polares viajan lentamente hacia arriba, las
sustancias no polares viajan ms rpidamente.

Cromatografa en capa fina.

Polaridad
El factor que ms influye en la separacin de los
componentes en este tipo de cromatografa es la
polaridad de estos componentes.
La placa est formada por una capa de gel de slice,
una sustancia muy polar, y por lo tanto, atraer en
mayor medida a componentes ms polares.
Al realizar el cromatograma, las sustancias ms
polares interaccionarn ms con el soporte y su
velocidad de desplazamiento ser menor, esto
significa que al revelar la placa cromatogrfica, el
componente ms polar se encontrar en un lugar
ms cercano a la lnea base que se dibuj, y por el
contrario, el componente menos polar se mover
ms rpidamente y se encontrar ms alejado de

la lnea base.

Polaridad
La mayora de las molculas son elctricamente
neutras. La distribucin de cargas puede ser:
homognea y
no homognea.
Lo anterior depende de la electronegatividad, Si la
electronegatividad de dos tomos unidos es igual, la
distribucin de carga es homognea.

Molcula diatmica
sin momento dipolar

Polaridad
Si la electronegatividad de dos tomos unidos es diferentes la
distribucin de carga es no homognea.
Menor
probabilidad de
encontrar los
electrones

Mayor probabilidad
de encontrar los
electrones

Distorsin de la nube electrnica

entre dos tomos con diferente
electronegatividad

La distribucin heterognea de carga genera un dipolo. La

magnitud de ese dipolo se conoce como momento dipolar, y es
el producto de la fraccin de carga presente sobre cada tomo
por la distancia que las separa. La unidad de momento dipolar
es el debye; 1 D = 3,34 x 10-30 Culombio x m.

Polaridad
La polaridad del eluyente es un factor que determina que
los componentes se muevan ms rpido o ms lento en
una cromatografa.
Es decir, para un eluyente con mayor polaridad, ste
tendr mayor capacidad para desplazar a los compuestos
y se movern mejor.
Por lo que, al revelar la placa, los componentes saldrn
ms alejados de la lnea base.
Por la misma razn, con un eluyente menos polar, los
compuestos tendrn una mayor interaccin con el
soporte, por lo que su velocidad ser ms pequea y al
terminar la cromatografa, se habrn desplazado muy
poco a partir de la lnea base.

Factores que influyen en la

elucin
Por estos factores, es recomendable la
eleccin de un buen eluyente para la
separacin
de
los
compuestos
que
queremos.
Para cada experiencia ser distinto el tipo de
eluyente que necesitemos.
Dependiendo de los componentes a separar,
lo mejor ser realizar varias pruebas con
distintos tipos de eluyentes para as
considerar el ptimo para esa separacin.

Aplicaciones
La cromatografa de capa fina es un mtodo muy
til, rpido y barato que se puede utilizar
principalmente para:
Identificar alguna sustancia conocida en una
mezcla por comparacin con un patrn de la
sustancia pura.
Medir el grado de pureza de una muestra, si
existen varias manchas en el cromatograma, es
seal de que existen varios componentes en la
muestra, por lo tanto est impura.
Obtener una medida semicuantitativa de algn
componente. Elaborando una curva de calibracin
con estndares y un tipo de revelador (UV, F-254 o
F-366, I2 (especficos)).

Objetivos
1.Conocer la tcnica de cromatografa en capa
fina, sus caractersticas y los factores que en
ella intervienen.
2.Observar
la relacin que existe entre la
polaridad de las sustancias que se analizan y
la de los eluyentes-adsorbentes utilizados.
3.Emplear la tcnica de cromatografa en capa
fina como criterio de pureza e identificacin
de sustancias.
4.Establecer las condiciones para determinar la
pureza de los productos obtenidos con la
tcnica de cristalizacin simple y por par de
disolventes.

PLAN DE TRABAJO GENERAL

Clave

Exp I

Exp
II

Exp
III.1*

Exp
III.2
Hexano
Acetato
de etilo

Exp
IV**

Ex
p
V
**
*

1
2

X
X

X
X

Hexano
Acetato
de etilo

95:5
90:10

X
X

Acetona
Metanol
Benceno
Cloroform
o

85:15
80:20
75:25
70:30

HexanAcetato
de etilo
80:20
Hexano
100
Acetato
de etilo
100

3
4
5
6

X
X
X
X

X
X
X
X

*Tres concentraciones diferentes

X
X
X
X

Exp VI

Sedal
Merk
Tempra
Aspirina

**Tres compuestos diferentes

***Tres cosechas (cristalizacin simple)
Tres cosechas (cristalizacin por par de disolventes)

Experimentos
I. Preparacin de las cromatoplaca y de los capilares.
II. Preparacin de la cmara de elucin y marcado de la
lnea de aplicacin de las placas.
III. APLICACIN DE LA MUESTRA Y EFECTO DE LA
CONCENTRACIN
IV.POLARIDAD DE LAS SUSTANCIAS
V. PUREZA DE LAS SUSTANCIAS
VI.LA CROMATOGRAFA EN CAPA FINA COMO CRITERIO
PARCIAL DE IDENTIFICACION. CARACTERIZACIN DE
LOS PRODUCTOS PRESENTES EN TRES MEDICAMENTOS