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PREPARAO E
APLICAO
AULA 5 QP-434-2007
Introduo
Liberao Controlada de Frmacos
Introduo
Liberao espacial
= Molcula do frmaco
TUMOR
Introduo
Liberao temporal
P
L
s
m
a
Convencional
Liberao ordem zero
Efeitos adversos
Nveis txicos
Faixa teraputica
Concentrao
Min. efetiva
Sem efeito
l
e
v
e
l
Tempo/dosagem administrada
Nanopartculas
Microesferas
Emulses
Lipossomas
d<1m
d>1m
100nm<d<5m
20nm<d<2m
Micro/nanoesferas e capsulas
NANOESFERAS
Monolitica
NANOPARTICULAS
NANOCAPSULAS
Adapted of Lambert,G. Oligonucleotide and Nanoparticles Page,
<http://perso.clubinternet.fr/ajetudes/nano/index. html> dez/ 2003.
Reservato
rio
METODOS DE PREPARAO
1- Atravs de polimerizao de monmeros
Problemas:
obtidas
induzindo-se
a
polimerizao. Difcil controle da extenso
da reao-massa molar no controlada.
Purificao posterior. Interao do polmero
com o ativo.
2- Diretamente da macromolcula
ou
polmero pr-formado.
Polmeros
biodegradaveis
O
O
CH2
Poli(acido glicolico)
ou PGA
CH3
O
CH
(CH2)5
Poli (-caprolactona)
ou PCL
O
C
Poli(acido lactico)
ou PLA
Poly(3-hydroxybutyrate-co-valerate) or PHBV
BIOPOLMEROS TPICOS
(PLGA)
EMULSIFICAO/EVAPORAO DE SOLVENTE
1-MTODO DE EMULSIFICAO/EVAPORAO
DE SOLVENTE
Sanchez et al. Int. J. Pharm. 99, 263
(1993); Zambaux et al. J. Control.
Rel. 50, 31 (1998); Verrechia et al.,
J. Biom. Mater. Res. 27, 1019 (1993)
FASE AQUOSA
gua destilada
Tensoativo
FASE ORGNICA
Solvente orgnico
Polmero
Agente ativo
Homogenizao
Sonicao
Aps a formao da nanoemulso, o solvente
EMULSO
se difunde para a fase externa (extrao para
a fase aquosa) at saturao da mesma. Com a
leo em gua
evaporao das molculas do solvente que
atingem a interfase fase aquosa-ar, reestabelece-se
o gradiente de concentrao, ou seja, a fora motriz
para a difuso do solvente orgnico das nanogotas para
a fase aquosa. Ao ser eliminado o solvente, o polmero
precipita levando a formao das nanoesferas.
Extrao do solvente
Evaporao do solvente
SUSPENSO DE NANOPARTCULAS
PREPARAO
2 solventes
Evaporao de solvente modificado
solveis
(nanoesferas).
entre si
(um nosolvente
para o
SEI, 22.000x, 20 kV, topografia
polmero)
Laboratrio -
APLICAO
1- Formao de nanoesferas para substncias lipoflicas. Este mtodo
tem sido modificado para uma emulso mltipla do tipo gua/leo/gua.
2- Limitaes: a) Emulso leo/gua deve ter uma fase dispersa (leo)
bastante fina e homognea (requer bastante tensoativo e tcnicas de
agitao elevada). b) Solventes orgnicos (clorados) e tensoativos usados
(lcool polivinlico, p.ex.) no so compatveis com aplicaes biolgicas.
3- Alternativas: Uso de tensoativos como albumina de soro humano.
4- Propriedades otimizadas: dimetro mdio e distribuio de tamanho;
re-suspenso num veculo aquoso sem agregao; teor de frmaco; taxa
de liberao, taxa de degradao; esterilidade; apirogenecidade; e teor de
solvente residual.
5- Variveis: Volume da fase aquosa para a fase orgnica; concentrao
do polmero na fase orgnica; concentrao do frmaco na fase orgnica;
presena de tensoativo em ambas fases (orgnica e aquosa); solubilidade
do frmaco na fase aquosa (nvel de saturao); mtodo e velocidade de
agitao.
-2-MTODO
DE
EMULSIFICAO
ESPONTNEA/DIFUSO DE SOLVENTE
(Niwa et al. J. Pharm. Biopharm. 25, 89 91993).
Difuso rpida do
solvente miscvel
com gua
Nanopartculas
3-MTODO DE NANOPRECIPITAO
Envolve o uso de um solvente orgnico que completamente solvel na fase
aquosa externa consequentemente a extrao e a evaporao do solvente
no so nescesrias para a precipitao do polmero.
FASE AQUOSA
gua destilada
Tensoativo
FASE ORGNICA
Solvente orgnico
leo
Polmero
Agente ativo
p.ex. acetona
FASE ORGNICA
Solvente orgnico
Polmero
Agente ativo
Agitao
nanoesferas
nanocapsulas
SUSPENSO DE NANOPARTCULAS
Fessi et al. Eur Pat. 0275796 B1 (1987).
Metodo Encapsulao de
agente ativo
Nanoprecipitao mtodo de deslocao de
solvente
CH 3
HO
CH 2CH 2O
CH CH 2O
m/2
CH 2CH 2O H
n
m/2
4-MTODO DE SALTING-0UT
Esta baseada na formao de uma emulso pela incorporao, sob agitao, de uma
soluo aquosa saturada de alcool polivinlico (PVA) em uma soluo de polmero dissolvido
em acetona. O PVA tem o papel de estabilizar a disperso. Aqui a miscibilidade das duas
fases impossibilitada pela saturao da fase aquosa com PVA. A precipitao do polmero
ocorre quando uma quantidade
FASE ORGNICA
adicional de gua adicionada
Solvente orgnico
permitindo ento a difuso
Polmero
da acetona para a fase aquosa.
Agente ativo
Este mtodo adequado quando
ativo e polmeros so solveis em solventes
FASE AQUOSA
polares como acetona ou etanol.
(sal)
gua destilada
Agitao
Tensoativo (PVA)
Ibrahim et al. Int. J. Pharm.
87, 239 (1992); Allemann et
al., Int. J. Pharm. 87, 247 (1992).
EMULSO
gua em leo
gua destilada
SUSPENSO DE NANOPARTCULAS
5-MTODO DE EMULSIFICAO/DIFUSO DE
SOLVENTE
Envolve o uso de um solvente parcialmente miscvel em gua, que previamente saturado
em gua para garantir o equilbrio termodinmico inicial de ambas as fases. A precipitao
Ocorre quando uma quantidade adicional de gua adicionado ao sistema, permitindo
ento a difuso do solvente para a fase aquosa.
Leroux et al. Eur. J. Pharm.
Biopharm. 41, 14 (1995).
Quintanar-Guerreo et al.
Pharm Res. 15, 1056 (1998).
Formada a emulso do tipo
leo/gua e o tensoativo
adsorvido na superfcie das
gotas da fase orgnica
dispersas na fase aquosa
FASE AQUOSA
(saturada em solvente orgnico)
gua destilada
Tensoativo
Agitao
FASE ORGNICA
(saturada em gua)
Solvente orgnico
Polmero
Agente ativo
EMULSO
A adio de gua ao sistema
leo em gua
desestabiliza o estado de equilbrio
e promove a difuso do solvente
gua destilada
na fase aquosa levando formao
das nanopartculas
SUSPENSO DE NANOPARTCULAS
VANTAGENS
Este mtodo apresenta algumas vantagens sobre
o mtodo de nanoprecipitao como a possibilidade
de controle do tamanho das nanopartculas. Estas
apresentam tamanhos superiores quelas
preparadas por nanoprecipitao, normalmente
entre 250-600 nm, dependendo de vrios
parmetros como tipo e concentrao do
tensoativo e do polmero, tempo e velocidade
de agitao.
PLA, PLA-b-PEG
PLA-PEG-PLA
PLGA
PEO-b-PBLA
PMLAiPr
PMLAnHe
PLGA
PLGA
PCL, PLA,
PCL-co-PLA
PEO-b-PCL
PLA
Lidocaine
Progesterone
Dexamethasone
Doxorubicin
Halofantrin
Halofantrin
Vancomycin
Procaine Hydr.
Nimodipine
Enalapril maleate
Lidocaine
247-817
193-335
109-155
37
150-160
90-190
160-170
<210
81-132
50
115-123b
w/o/w
w/o/w
w/o/w
PLGA
PLGA
PLGA
PLGA, PLA
PLGA/PLA blend
PLGA, PCL
PLA
PLGA
FITC-HRP
PLGA
PLGA
PLGA
Biod. polym.
PLGA
PLGA
PEG-PLGA
PEG-co-PBT
w/o/w
PLGA-b-PEO
w/o/w
w/o/w
o/w
o/w
L-asparaginase
BSA
BSA
BSA
BSA
BSA
Protein C
FITC-BSA
TRH
IL-1+BSA
Rism. porcine s
Peptides
BSA
rhBMP
BSA
BSA
BSA
196-226
s
100-200
s
s
20-1000
230-340
s
250-800
s
300-600
s
s
s
Exemplo de encapsulao
utilizando nanocpsulas.
PREPARAO
[polmero]
evaporao
No
solvente
Sim
agitao
Precipitao
cogulos
agregados
grandes
espuma
Modo adio
Formas
arredondadas
superfcie lisa
baixa
polidispersidade
BSA/PHB159
BSA/PHBV140
BSA/PHB540
BSA/PHB273
1.- PHBV140 libera menos BSA que PHB159 (Diferencias de porosidade nas matrizes) PHBV
menos porosa que PHB.
2.- Pouca diferencia entre PHB540 e o 273. (Conway et al. J. Control. Rel. 49, 1 (1997)
EA
DCM
ACE
AC
Quando EA, um solvente orgnico parcialmente solvel em gua foi usado, foram
formadas uma pequena e discreta partculas de tamanho de 4070 nm. Por outro lado,
partculas grandes e agregados de 350450 nm foram observados em DCM como
solvente orgnico imiscvel em gua. Quando ACE, solvente orgnico completamente
solvel em gua foi usado, partculas grandes e discretas de 250400 nm foram
obtidas. Das imagens de AFM, pode ser visto que nanopartculas abaixo de 70 nm so
obtidas usando um solvente parcialmente solvel em gua (EA) que quando usou-se
um solvente imiscvel em gua (DCM) ou um solvente completamente solvel em gua
(ACE). Isto est de acordo com os resultados da distribuio de tamanho de partcula
nas Figura 1.
SOLVENTE: PC
O tamanho das partculas para PVA e Pluronic F68 diminui rapidamente com
pequenas mudanas na concentrao mas muito pouco para DMAB. Isto indica que
com aumento da concentrao do estabilizador para PVA e Pluronic F68, mais
molculas do estabilizador so adsorvidas na interfase das gotas de emulso,
permitindo um aumento na proteo contra a coalescencia e resultando em gotas
menores da emulso. Outros autores prepararam nanopartculas de
poli(metilmetacrilato)
(PMMA)
usando
PVA
como
estabilizante
por
emulsificao/difuso, e pesquisaram o efeito da concentrao do PVA no tamanho
das nanopartculas de PMMA. Eles observaram que a estabilidade fsica das
nanopartculas de PMMA aumentou com aumento de concentrao de PVA, levando a
nanopartculas de tamanhos menores. Entretanto, para DMAB, somente uma
pequena quantidade de estabilizador adsorvida na interfase das gotas da emulso.
O excesso permanece na fase aquosa continua e no joga nenhum papel
significativo na emulsificao. O tamanho mdio das nanopartculas de PLGA
preparadas usando DMAB como estabilizante menor que aqueles com PVA e
Pluronic F68, que est de acordo com os resultados dos outros autores.
CONCLUSES
A solubilidade dos solventes na fase orgnica em gua foi
um parmetro importante afetando o tamanho mdio de
nanopartculas de PLGA, quando DMAB, um
estabilizador inico usado. nanopartculas abaixo de 70
nm foram obtidas usando solventes parcialmente solveis
em gua (EA e PC) que quando usados um solvente
totalmente solvel em gua (ACE) ou solventes imiscveis
em gua (DCM). Em particular, quando PC foi usado
como solvente na fase orgnica, nanopartculas de PLGA
abaixo de 50 nm foram obtidas. Entretanto, quando PVA e
Pluronic F68, estabilizadores no inicos foram usados,
uma grande diferencia na distribuio do tamanho das
partculas entre solvente parcialmente solvel em gua ou
totalmente solveis em gua e em solvente imiscvel em
gua no foi observado, e todas as partculas mostraram
um grande dimetro acima de 110 nm, independentemente
do tipo de solventes orgnicos.
(enredado)
NANOPARTICULAS DE
MACROMOLCULAS
Pinto Reis et al. / Nanomedicine: Nanotechnology, Biology, and Medicine 2 (2006) 8 21
NANOPARTICULAS DE ALGINATO
Produzidas por extruso de gotas de uma soluo
alginato sdico numa soluo de cloreto de clcio. Os
tamanhos das partculas de alginato dependem do
tamanho das gotas iniciais. Num avano adicional as
partculas de alginato tem sido produzidas usando um
mtodo de gelao modificado de emulsificao/gelao
interna como ilustrada na Figura
NANOPARTICULAS DE
MACROMOLCULAS
Pinto Reis et al. / Nanomedicine: Nanotechnology, Biology, and Medicine 2 (2006) 8 21
NANOPARTICULAS DE QUITOSANO
NANOPARTICULAS DE
MACROMOLCULAS
Pinto Reis et al. / Nanomedicine: Nanotechnology, Biology, and Medicine 2 (2006) 8 21
NANOPARTICULAS DE AGAROSE
Nanopartculas de agarose foram desenvolvidas para a
administrao de teraputicos de protenas e peptdeos.
nanopartculas de agarose foram produzidos pela
tecnologia baseada em emulso como ilustrado na Figura
Efeito cardiotxico
Percentage variation of QT interval (A). The values represent meansS.E.M. (standard error mean) for 30 min after IV
injection of halofantrine solution (Hf. HCl), halofantrine entrapped in nanocapsules (Hf-NC) in doses of 100 mg/kg
(n=6) or 150 mg/kg (n=8), unloaded NC (n=8) and DMA/PEG solution (n=8).
QT= interval between the beginning of the Q wave and the end of the T wave of ECG
AGRADECIMENTOS