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NUTRICION, CRECIMIENTO Y

METABOLISMO MICROBIANO

Blga. Ms. C. Ana Melva Contreras Contreras

Los requerimientos para el crecimiento bacteriano


incluyen fuentes de energa, carbohidratos (por
ejemplo; azcares y cidos grasos) e iones
metlicos (por ejemplo; fierro).
La
temperatura
ptima,
el
pH
y
los
requerimientos de la presencia ( ausencia) de
oxgeno son importantes.

El crecimiento bacteriano requiere una fuente de


energa y materia prima necesaria para fabricar los:
Diferentes productos que le son necesarios como:
protenas, aminocidos hidratos de carbono y sus
lpidos, que son indispensables para la contricin
de las clulas bacterianas.
La maquinaria estructural y bioqumica de la
clula.
Las fuentes mnimas para el crecimiento son:
carbono y nitrgeno, agua e iones
Algunas bacterias (quimiotrfas) pueden obtener
energa directamente de la oxidacin de iones
metlicos como el hierro y otras realizan fotosntesis
(cianobacterias).
Las bacterias patgenas obtienen su energa a travs
de la degradacin de azcares, lpidos y protenas.

Cuando se les suministra nutrientes inorgnicos junto


a una fuente simple de carbono (glucosa) , ciertas
bacterias Escherichia coli (microflora intestinal) es
capaz de sintetizar aminocidos, nucletidos, lpidos
e hidratos de carbono necesarios para su crecimiento
y la divisin celular.
Las necesidades nutricionales de Treponema pallidum
(sfilis) son complejas, debido a esto es que no se ha
podido desarrollar un medio de cultivo especfico.
Las necesidades nutricionales y los productos
bacterianos pueden utilizarse como factor de
clasificacin bacteriana.
Los Lab. de Mic. Cli. diferencian a las bacterias por su
capacidad de proliferar en fuentes de carbono
especficas (lactosa) y productos metablicos finales
(etanol, cido lctico, cido succnico).

METABOLISMO
BACTERIANO

METABOLISMO DE LAS BACTERIAS


A travs del metabolismo de las bacterias tambin se puede
hacer una identificacin bacteriana.
El metabolismo son transformaciones que tienen lugar dentro
de la clula. Se produce en dos partes:
Anabolismo: procesos de construccin celular, biosntesis
Catabolismo: constituido por las reacciones energticas con
el fin de obtener energa qumica (ATP ADP + P) , se
desprende energa, que se obtiene de los nutrientes, como la
luz, etc.
Las reacciones metablicas (metabolismo) son comunes a
TODAS las clulas de todos los seres vivos. Pero para ello la
clula necesita:
Macronutrientes
Micronutrientes

METABOLISMO
BACTERIANO

Catabolismo

MACRONUTRIENTES.
CARBONO (C): La mayor parte de las bacterias necesitan una
fuente de carbono y de ah que muchas bacterias utilicen una
fuente de CO2 como fuente de carbono.
NITRGENO (N): lo necesitan para formar aa de las protenas.
FSFORO (P): para la sntesis de los c. Nucleicos,
fosfolpidos, ATP...
AZUFRE (S): ya que forma parte de las molculas de algunos
AA como la Cistena, Metionina...
POTASIO (K): activador de algunos enzimas.
MAGNESIO (Mg): interviene en la estabilizacin de los
ribosomas, membrana celular, c. nucleicos...
SODIO Y CALCIO (Na, Ca): algunas bacterias los necesitan
pero normalmente las patgenas no.
HIERRO (Fe): en muchas de las bacterias es importante para el
ciclo respiratorio.
AGUA (H2O): nutriente muy importante, sin ella las bacterias no
pueden completar su ciclo vital. Si no disponen de agua,
algunas pueden dar lugar a formas de resistencia y esporular,
viviendo de forma latente.

MICRONUTRIENTES-OLIGOELEMENTOS
Elementos qumicos indispensables para el crecimiento
bacteriano, se requieren en cantidades muy pequeas,
funcionan como antioxidantes.
COBALTO (Co): forma parte de la vitamina B12
ZINC (Zn): para varios enzimas
COBRE (Cu): forma parte de los enzimas respiratorios
MAGNESIO (Mg): parte de las enzimas
En algunas bacterias especiales: niquel, tugsteno, selenio...
La bacteria tambin necesita para su metabolismo
FACTORES DE CRECIMIENTO: compuestos que se
requieren en muy pequeas cantidades y que normalmente la
clula es capaz de sintetizarlos, pero a veces los necesitan
tener en el medio que les rodea, como ej. las vitaminas, que
se ponen ms de manifiesto cuando los cultivos son
sintticos, ya que en condiciones normales las bacterias los
pueden sintetizar o los tienen ya el medio

CLASIFICACIN EN GRUPOS NUTRICIONALES


SEGN SUS FUENTES DE ENERGA Y DE CARBONO.
Fotoauttrofas (fuente C es CO2 + luz)
Fotohetertrofas (fuente de C es un compuesto orgnico + luz)
Quimioauttrofas (CO2 + sales orgnicas)
Quimihetertrofas (compuestos orgnicos + compuestos
orgnicos)
Fuente de Carbono Fuente de Energa
Fotoauttrofo
CO2
LUZ
Fotohetertrofo
Compuestos orgnicos
LUZ
Quimioauttrofo CO2
Sales orgnicas
Quimiohetertrofo Compuestos orgnicos
Compuestos
orgnicos

Requerimientos Nutricionales
Incluyen fuentes de carbono orgnico, nitrgeno, fsforo, azufre e
iones metlicos incluyendo el hierro.
Las bacterias secretan molculas pequeas que unen el hierro
(siderforos, por ejemplo; enterobactina, micobactina).
Los siderforos (con el hierro unido) son entonces internalizados
va receptores de membrana por la clula bacteriana.
El husped humano tambin tiene protenas transportadoras de
hierro (por ejemplo: la transferrina).
Las bacterias que compiten con el husped por el hierro de forma
ineficiente no son patgenos exitosos.

La energa se acumula en forma de ATP y todo se hace mediante


reacciones de oxidacin y reduccin ( REDOX), que en muchas
de ellas va a haber una participacin de oxgeno, pero en otras
no, y dependiendo de ello, el metabolismo bacteriano libera
energa mediante:
Fermentacin (en ausencia de O2, hay prdida de electrones)
Respiracin (en presencia de O2, por adicin de electrones)
Fuente de Energa
Liberacin de Energa
Fermentacin
glucosa, degradada
Se libera poca energa
por la bacteria
Respiracin Es el O2 el que acta La oxidacin de la glucosa
como aceptor de electrones entra en el c. krebs y se
(es el que se reduce)
produce ms ATP
Glucosa+O2--ATP+H2O

Requerimientos de Oxgeno
Los aerobios obligados deben ser capaces de crecer en
presencia de oxgeno y no realizan fermentacin.
Los anaerobios obligados no realizan fosforilacin oxidativa.
Mueren en presencia de oxgeno ya que carecen de ciertas
enzimas como la catalasa, la cual rompe el enlace del
perxido de hidrgeno (H2O2) a agua y oxgeno.
La peroxidasa, por la cual NADH+ H2O2 se convierten a
NAD y O2.
Y la superxido dismutasa, por la cual el superxido de O2;
es convertido a H2O2
Estas enzimas de-toxifican los radicales libres producidos a
partir del perxido de hidrgeno y del oxgeno producidos
durante el metabolismo aerobio (en presencia de oxgeno).

Los anaerbios aerotolerantes (facultativos) son


bacterias que respiran anaerbicamentre, pero pueden
sobrevivir en presencia de oxgeno.
Los anaerobios facultativos pueden llevar cabo tanto la
fermentacin como la respiracin aerbica.
En presencia de oxgeno, la respiracin anaerbica de
estos organismos generalmente se apaga y entonces
respiran aerbicamente.
Las bacterias micro-aeroflicas crecen bien a bajas
concentraciones de oxgeno, pero no resisten altas
concentraciones

Temperatura
Las bacterias pueden crecer en una variedad temperaturas,
desde aquellas cercanas al punto de congelacin hasta el
punto de ebullicin del agua.
Las bacterias que crecen mejor a la mitad de este rango se
conocen como mesfilos, las cuales incluyen todos los
patgenos y oportunistas de humano.
Las que viven a temperaturas ptimas altas se conocen
como termfilas y las que lo hacen a bajas temperaturas
son los psicrfilicos.

Clase de bacterias segn su temperatura:


Psicrfilas: crecen entre 0C y 20C con una T ptima
de 15C, suelen contaminar los alimentos, la
sangre
refrigerada y las aguas fras de manantiales o lagos.
Mesfilas: se desarrollan entre 20C y 45C, son ms
numerosas y las que ms interesan en medicina. Se
clasifican en dos grupos: con un desarrollo ptimo de 20 a
35C: bacterias saprfitas y parsitas de
plantas y
animales inferiores y las que viven entre
35 y 45C
comprenden las bacterias patgenas y
suelen
encontrarse en el hombre y animales superiores.
Termfilas: se desarrollan en temperaturas ptima sobre
los 45C. Son las bacterias que forman la mayor parte de
la flora de los suelos calientes y fuentes termales.

pH (concentracin de hidrogenines)
Algunas bacterias crecen mejor a pH neutro, sin
embargo ciertas bacterias pueden sobrevivir y crecer de
forma constante en condiciones cidas o alcalinas.
Bacterias halfilas crecen bien en concentraciones
alcalinas.
Bacterias acidfilas crecen bien en condicones
concentracioens cidas.

Las bacterias realizan el proceso de biosntesis como son:


Sntesis de cidos nuclecos: se inicia con la ribosa 5fosfato que se forma en la ruta de las pentosa fosfato.
Sintetizando bases nitrogenadas puricas (A,G) y pirimidicas
(T, U; C).
La accin de los antibiticos es sobre todo en inhibiendo
la ruta del tetrahidrofolato, debido a que por esta ruta se
sintetiza la Timina.
Transcripcin: es formar el ARNm a partir del ADN por
medio de una ARN-polimerasa dependiente del ADN.
Esta enzima es inhibida por la rifampicina antibitico
utilizado para el tratamiento de la tuberculosis.
Traduccin: Es el proceso de sntesis de protenas por el
ribosoma 70 S.
Algunos agentes antimicrobianos actan a este nivel,
como son los aminoglucosidos (estreptomicina y
gentamicina), tetraciclinas, macrlidos (eritromicina) y
lincosamidas (clindamicina) actan unindose a las
subunidades del ribosoma.

Sntesis de protenas
bacterianas:
1.La
unin
de
las
subunidades 30SAl ARNm
con la formilmetioninaARN
de
transferencia
(fmet-ARNt) situado en el
con de iniciacin AUG
permite el ensamblaje del
ribosoma 70S. El femetARNt se une al sitio
peptidilo (P).
2.El siguiente ARNt se
acopla
al
codn
correspondiente en el sitio
A
3.El ARNt acepta la
cadena
peptdica
en
formacin.
4.Antes de la translocacin
al sitio peptidilo.
5.El proceso se repite
hasta llegar a un codon de
terminacin en el que la
protena se libera.

Divisin de la
clula bacteriana:
la replicacin
requiere una
extensin de la
pared celular, as
como la replicacin
del cromosoma y la
formacin de un
tabique. La fijacin
del ADN a la
membrana arrastra
a cada molcula
cromosmica hija
hacia el interior de
una nueva clula.

Mediciones de masa bacteriana en cultivos lquidos


Los mtodos mas comunes incluyen:
a) Turbidez: la opacidad del liquido del cultivo bacteriano
es una estimacin del total de bacterias (vivas y
muertas). Esta se cuantifica usualmente con un
espectrofotmetro.
b) El nmero de bacterias viables en un cultivo
usualmente se determina contando en nmero de
colonias que crecen despus de sembrar un
volumen conocido sobre una placa (conteo en
placa unidades formadoras de colonias).
El graficar el logaritmo de la turbidez o el nmero de
clulas vivas vs. el tiempo y a este se le llama curva de
crecimiento.
El tiempo de generacin se define como el tiempo
requerido para duplicar la masa bacteriana del cultivo

FASES DEL CRECIMIENTO BACTERIANO

FASE LAG:
Los microorganismos son introducidos a un medio
fresco, no ocurre un incremento inmediato en el
nmero de clulas o masa celular.
No hay divisin la clula se encuentra sintetizando
nuevos componentes.
Luego de esta fase de sntesis y recuperacin las
clulas estn en ptimo estado para replicar su
ADN, crecer en masa celular y dividirse.
Esta
fase
puede
variar
considerablemente
dependiendo
de
la
condicin
de
los
microorganismos inoculados y la naturaleza del
medio empleado.

Fases del
crecimiento
bacteriano a
partir de un
inoculo de
clulas en
fase
estacionaria

FASES DEL CRECIMIENTO BACTERIANO

FASE DE CRECIMIENTO EXPONENCIAL O LOG:


Los microorganismos se encuentran en la tasa
mxima posible de crecimiento y divisin
determinada por: potencial gentico, la naturaleza
del medio y las condiciones de crecimiento.
La tasa de crecimiento es constante, se dividen y
doblan en nmero a intervalos regulares. Debido a
que cada clula se divide en un momento
ligeramente distinto, la curva de crecimiento
aumenta progresivamente en vez de hacer saltos.

FASES DEL CRECIMIENTO BACTERIANO

FASE ESTACIONARIA:
El crecimiento cesa y la curva se convierte en una lnea
horizontal.
El tamao de la poblacin depende: disponibilidad de
nutrientes y de otros factores como el tipo de microorganismo
inoculado.
La cantidad total de microorganismos viables se mantiene
constante, existe balance entre la divisin y la muerte celular
o porque simplemente la poblacin cesa la divisin y se
mantiene metablicamente activa.
Hay limitacin de nutrientes, disminucin de oxgeno,
acumulacin de desechos txicos.
FASE DE MUERTE:
Los cambios perjudiciales en el ambiente de crecimiento
llevan a disminuir la cantidad de clulas viables. La fase de
muerte al igual que la fase exponencial del crecimiento es
logartmica, una proporcin constante de clulas muere cada
hora.

Curva de Crecimiento Bacteriano

METABOLISMO DE AZCARES

Glicolisis (Ruta de Embden, Meyerhof y Parnas [EMP] )


Esta es la ruta ms comn para el catabolismo de azcares en las
bacterias. (Tambin se encuentra en la mayora de las clulas de
animales y vegetales). Una serie de procesos enzimticos dan
como resultado la conversin de azcares para generar ATP
(adenosin trifosfato) y NADH (nicotinamida adenina dinucletido).
La energa qumica necesaria para propsitos biosintticos se
almacena en compuestos formados de novo (ATP y NADH)

NAD ---> NADH


Glucosa------------------------------------> Piruvato
(C6) ADP ---> ATP
(C3)*

* referido al nmero de carbonos en la molcula

La ruta glagoltica de
Embden Meyerhof Parmas (EMP)
provoca la conversin
de glucosa en
piruvato. La suma de
glucosa + 2 ADP2Pi+2NAD
2
piruvatos + 4ATP
+2NADH +2H+. Las
dobles flechas indican
la reaccin de dos
moles por cada mol de
glucosa.

Existen rutas alternativas para el catabolismo de los azcares a fin de


producir energa almacenada en forma de ATP.
Estos incluyen la ruta de la pentosa fosfato (derivada de la hexosa
monofosfato) la cual se encuentra en la mayora de las clulas
vegetales y animales.
El NADPH se produce usando la ruta de las pentosas.
La ruta de Entner Doudoroff, se encuentra en algunas bacterias,

Ciclo de la Pentosa
fosfato o ruta de la
hexosa monofosfato.
En este ciclo es
fundamental la
participacin de las
enzimas trancetolasa
y transaldolasa.

Respiracin Anaerbica
La respiracin anaerobia incluye la gliclisis y la
fermentacin.
Durante los ltimos estadios a este proceso, el NADH
(generado durante la gliclisis) se reconvierte a NAD por
prdida de un hidrgeno.
El hidrgeno se adiciona al piruvato y dependiendo de la
especie bacteriana, se producen una variedad de productos
finales metablicos.
NADH --> NAD

Piruvato --------------------------->cadena corta de alcoholes o


ac. graso (ac. Lctico o etanol) (C2-C4)

Fermentacin
del piruvato
por diferentes
microorganis
mos produce
la aparicin
de distintos
productos
metablicos
finales . Esto
se utiliza para
la
diferenciacin
bacteriana.

Respiracin Aerbica
La respiracin aerbica incluye la gliclisis y el ciclo del cido
tricarboxlico (Ciclo de Krebs).
El piruvato se degrada por completo hasta bixido de carbono
(C1) y en el proceso el NAD se convierte a NADH.
En la fermentacin aerbica, el NADH se genera por dos rutas
(glicolisis y ciclo de Krebs).
La fosforilacin oxidativa convierte el exceso de NADH a NAD y
durante este proceso se genera ms ATP (energa almacenada).

Las ubiquinonas y los citocromos son componentes de la


cadena de transporte de electrones, involucrada en este ltimo
proceso y la conversin de oxgeno hasta formar molculas de
agua viene a ser el paso final.
Ciclo de Krebs (C4-C6 Compuestos intermediarios).
NAD ---> NADH-

Piruvato ----------------------------------> 3 CO 2

(C3)
(C1)

Ciclo de Krebs
El ciclo de Krebs empieza y acaba la acetil Co A y el
oxalacetato para formar cido ctrico.
El cido tiene 6C y experimenta una serie de
reacciones qumicas catalizadas por enzimas que
separan 2C.
Las enzimas tambin modifican la estructura del
compuesto, que se transforma en oxalacetato al final
del ciclo.
ste se combina a continuacin con la acetil Co A para
iniciar de nuevo la cadena de reacciones. Cada ciclo
genera una molcula de ATP rico en energa (que se
forma por liberacin de cuatro electrones) y otra de
GTP.

Ciclo del
ATC se da
en
condicione
s aerbicas
y es de
tipo
anfiblico.
Tambin
se
muestran
los
precursore
s de la
sntesis de
aminocid
os y los
nucletido
s. CoA,
FADH2,
GTP

Ciclo
de
Krebs

Ejemplo de
aminocidos
derivados
intermediarios del
ciclo del ACT

Fosforilacin Oxidativa

NADH --> NAD


O2 ---------------------------------------------> H2O
ADP --> ATP

El Ciclo de Krebs contiene intermediarios de 4 y 6 carbonos.


El piruvato (C3) es la molcula que alimenta el ciclo de Krebs
de tal manera que el nmero de intermediarios C4/C6
permanece igual o se incrementa.
a) La prdida de CO2 (C1) del piruvato para formar la acetil
CoA, se ve seguida de su adicin a un componente C4 del
ciclo (oxalacetato) y se produce un componente C6 (cido
ctrico).
El nmero de molculas C6 producidas iguala el nmero de
molculas C4 presentes inicialmente.
CO2

C3 -------------> C2

C2
C4 -------------->C6

b) Mediante la adicin del CO2 al piruvato se produce un


compuesto de C4.
Se generan molculas adicinales de C4 (componentes del
ciclo).
+CO2
C3 ------------->C4
Si alguno de los componentes del ciclo, son removidos para
usarse en otras rutas biosintticas, estos pueden ser repuestos
por la va de esta reaccin.

Cadena
de
transporte
de
electrones mostrando los pasos
de oxidacin secuencial y
generacin de energa. La
transferencia de electrones se
acompaa con el flujo de
protones (H+) desde NADH a
travs de CoQ , as como de
electrones a travs de CYTO. Por
cada molcula NADH reoxidada
se forma 3 ATP , por cada
molcula FADH2 reoxidada
aparecen 2 ATP . FMN.

Metabolismo
aerobio de la
Glucosa

METABOLISMO DE LOS ACIDOS GRASOS

Los cidos grasos se degradan a grupos acetilo (C2) los cuales


alimentan el ciclo de Krebs adicionndose a intermediarios C4
para producir C6.
Durante el ciclo, el C2 adicionado se pierde como CO2 y se
produce C4.
No ocurre ningn incremento en el nmero de molculas
intermediarias del ciclo.
Si los cidos grasos son la nica fuente de carbono los
intermediarios del ciclo de Krebs no pueden ser removidos sin
que el ciclo se interrumpa.
+C2
C4 ---------->C6

Las bacterias utilizan el ciclo del glioxilato (una modificacin


del Ciclo de Krebs) en el cual se saltan los pasos enzimticos
en los cuales dos molculas de CO2 son removidas de los
intermediarios de C6.
El intermediario C6 se convierte en dos compuestos C4
(ambos componentes del ciclo).
Por cada grupo acetilo (de los cidos grasos) un intermediario
adicional del ciclo se produce.
La ruta del glioxalato generalmente no se encuentra en
clulas animales, ya que se utilizan cidos grasos
preformados y presentes en los alimentos.
C6-->C4

++C2
C2------------->C4

G
R
A
C
I
A
S

Para investigar en equipo:

P
O 1.
R
S
U
A
T
E
N
C
I

2.
3.

Elaborar esquemas, grficos o mapas conceptuales


donde explique las principales rutas metablicas utilizadas
por los microorganismos.
Lo investigado lo expondrn en la clase, la eleccin del
equipo a exponer ser por sorteo.
El equipo podr emplear ppt o papelotes.

Se trabaja en equipo y se expone en la


hora de laboratorio del da 15/04/15

GRACIAS POR SU
ATENCIN

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