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Coprocultivo

Mesa No. 2

Definicin
Es un examen de laboratorio que
consiste en el estudio de materia
fecal para el aislamiento e
identificacin de microorganismos
que puedan causar enfermedades
gastrointestinales.

Enteropatgenos frecuentes

Salmonella
Shigella
Campylobacter
Escherichia coli
Yersinia
Vibrio
Aeromonas
Staphylococcus
Candida
Pseudomonas
Proteus
Rotavirus

Indicaciones
Pacientes donde el tratamiento inicial
no resulto adecuado.

Procedimiento
Cantidad suficiente (tamao de una nuez) o
(10% p/v)
Recogerse en un envase estril
Mandarlo a laboratorio en menos de 2 horas
Se prefieren las primeras heces de la
maana
Ese deseable que el paciente haga una
higiene con jabn antisptico y agua.
Heces no se mezclen con la orina

Recoger la muestra en el frasco


limpio de boca ancha
Procesar al laboratorio, colocarlos en
medio de transporte Cary Blair
Rotavirus: colocar las muestras en
solucion salina y congelarlas.

Inoculacin en Medios
Depende de: los recursos del
laboratorio, de la bsqueda de algn
microorganismo en especifico.
Medios comunes:
EMB,
MacConkey,
SS (Salmonella- Shigella),
Sulfito y Bismuto

Salmonella: Sembrar las muestras


previamente en
Caldo selenito F
Caldo tetrationato de Sodio
12 a 18 hrs y se resiembra en cultivos
selectivos y diferenciales

Vibrio: 2 hisopos, uno para


enterobacterias y otro para
investigar vibrios

Material

Muestra de heces en un frasco estril


1 tubo de caldo de Tetrationato
1 tubo de caldo Selenito F
1 caja de medio EMB
1 caja de SS (Salmonella- Shigella)
1 caja de medio Sulfito y Bismuto
Asa bacteriologica
Mechero
2 hisopos esteriles

Caldo de Tetrationato
Enriquecimiento selectivo de Salmonella
Composicin

Fundamento

Peptona
Carbonato de Calcio
Tiosulfato de Sodio
Sales biliares
Solucion iodo iodurada

Peptona- nutrientes
Carbonato de Calcio- neutraliza y
absorbe metabolitos toxicos
Tiosulfato de sodio + iodo
iodurada= tetrationato- inhibidor
de flora acompaante
Sales biliares- inhibidor de flora
acompaante

Color: blanco lechoso

Caldo Selenito F
Composicin

Fundamento

Peptona
Lactosa
Fosfato de sodio
Selenito de Sodio
L- cistina

Lactosa- carbohidrato
fermentable
Selenito de Sodio- inhibe las
bacterias Gram + y la mayora
de la flora entrica
L- cistina- agente reductor,
reduce la toxicidad del sulfito

Medio EMB (Eosina Metilen


Blue) Tipo de Medio
Composicin
Fundamento
Lactosa
Sacarosa
Fosfato dipotasico
Eosina
Azul de metileno
Color: purpura

Lactosa- carbohidrato
fermentable
Sacarosacarbohidrato
fermentable
Eosina- accin
inhibitoria de Gram+
Azul de metilenoaccin inhibitoria de
Gram+

Selectivo y diferencial

Resultados
Escherichia coliverdosas, brillo
metalico, centro
negro azulado
P. mirabilis- incoloras
Shigella flexneri-

Medio SS (SalmonellaShigella)Tipo de Medio


Composicin
Fundamento
Pluripeptona
Lactosa
Sales biliares
Citrato de sodio
Tiosulfato de Sodio
Citrato ferrico
Verde Brillante
Rojo Neutro
Color Rojo naranja

Sales biliares, verde


brillante- medios
selectivos, inhiben
Gram +, coliformes
Lactosa- fermentacion
de lactosa: Rojo,
rosadas

Selectivo diferencial
Resultados
Escherichia colirosas, rosadas
P. mirabilis- centro
negro, transparentes
Shigella flexneriincoloras
Salmonella- centro
negro

Agar Sulfito y Bismuto

Composicin

Fundamento

Indicador Bismuto
Sulfito
Sulfato ferroso
Fosfato sodico
Glucosa
Verde Brillante
Peptona y extraco de
levadura

Peptona y extracto:
Selectivo diferencial
nutrientes
Glucosa- carbohidrato
fermentable
Verde brillante:
inhibidor de Gram+ y
algunos coliformes
Sulfato ferrosoformacin de
agregado negro por
unin del acido
Resultados
sulfhdrico
Salmonella typhicolonias centro negro,
borde claro, zonas
pardas negruzcas
Salmonella ssp- colo
negro o gris verdoso,
presentan brillo
Coliformespequeas, verdes

Color: Verde grisaceo

Tipo de Medio

Procedimiento en
Laboratorio
Tomar una muestra de heces con el hisopo
estril y colocarlo en el medio de Tetrationato
Tomar otra muestra y colocarla en el medio
de Selenito
Incubar durante 24 horas a 37 C, previo a la
practica
Dividir las cajas de medio de cultivo en dos
Descargar la muestra de heces con el hisopo,
en un extremo de la caja del medio de
cultivo, a partir del medio Tetrationato

Procedimiento en
Laboratorio
Descargar la muestra de heces con el hisopo, en
el otro extremo de la caja del medio de cultivo, a
partir del medio Selenito
Quemar los hisopos
Sembrar con el asa bacteriolgica, por estra de
aislamiento simple, en ambas secciones del
medio de cultivo
Seguir el mismo procedimiento para cada uno de
los medios de cultivo
Incubar durante 24 a 48 horas.
Leer morfologa colonial

Bibliografa
Koneman EW, Allen SD, Janda WM, Schreckenberger
PC, Winn WC."Diagnstico Microbiolgico". 5 ed. Ed.
Mdica Panamericana SA. Buenos Aires, 1999.
Mims CA, Playfair JHL, Roitt IM, Wakelin D, Willians
R."Microbiologia Mdica". 2 ed. Ed. Harcourt Brace. Madrid,
1999.
Murray PR, Rosenthal KS, Kobayashi GS, Pfaller
MA."Microbiologia Mdica". 4 ed. Ed. Mosby. Elsevier
Science. Madrid, 2002.
Walker T.S."Microbiologia". Ed. McGraw-Hill Interamericana.
Mexico D.F., 2000.

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