PROBLEMAS

REPASO TERICO.
Precisin.
Exactitud.
Error determinado
(sistemtico o de
mtodo).
Error indeterminado
(aleatorio).
Error evidente.

Sensibilidad.

S Canalito
S m Canalito Sblanco

REPASO TERICO.
Lmite de deteccin.
Sm Sblanco k sblanco
Sm Sblanco
Cm
m

Intervalo de concentracin.
Selectividad.

REPASO TERICO.
La seal deja
de ser lineal
con la
Concentracin.

Intervalo de concentracin.
Respuesta del instrumento

LOL

Cm

k es 10 en vez
de 3

LOQ

Intervalo til

Concentracin

REPASO TERICO.
Selectividad. Supn que tienes un analito A
y dos interferencias B y C.
La seal que mides es:

S m A C A m B C B mC C C S bl
k B, A mB

kC, A

mA
S m A C A k B, A C B k C , A CC

mC

mA

Cunto ms pequeos sean los valores de

los coeficientes de selectividad mejor.

Ejemplo 1.
Datos procedentes de la calibracin para
la determinacin de plomo a partir de su
espectro de emisin de llama. El anlisis
se realiz por mnimos cuadrados y la
relacin entre la seal y la concentracin
de Pb en ppm fue: Sm 1.12 CPb 0.312
Los resultados obtenidos en los ensayos y
el nmero de replicados realizados se
muestra en la siguiente Tabla:

Tabla

S m 1.12 CPb 0.312

Concentracin
de Pb en ppm

N de replicados

Valor medio de S

10.0
1.00
0.000

10
10
24

11.62
1.12
0.0296

0.15
0.025
0.0082

Calcular (a) La sensibilidad de calibrado o de calibracin. (b) La sensibilidad

analtica para 1 ppm y para 10 ppm. (c) El lmite de deteccin.
(a) El
(c)
m lmite
= 1.12.de deteccin.
(b) La sensibilidad analtica se consigue dividiendo la sensibilidad de calibrado
entre la desviacin tpica.
m
1.12

7.5
S m Sblanco k10ppm
sblancos10ppm
0.0296

3
0.15 0.0082 0.054

S m Sblanco 0.054
0.0296
m
1.12 0.022 ppm de Pb
Cm

45
m 1 ppm s1 ppm 1.12
0.025

Herramientas de calibracin.
Buscamos la lnea recta entre Seal y
concentracin de analito. Para ello podemos
hacer tres cosas:
Curva de calibrado.
Blancos.
Disoluciones de diferente concentracin del analito que se
quiere investigar: Se denominan DISOLUCIONES DE
PATRN.
Se relacionan las seales de las disoluciones-PATRN con
la Concentracin de las mismas. RECTA DE CALIBRACIN,
SE CONOCE CON EL NOMBRE DE CURVA DE
CALIBRADO.
Se mide la seal de la muestra. La seal se lleva a la CURVA
DE CALIBRADO y se determina la concentracin de anlaito
en la muestra.

Herramientas de calibracin.
Adiciones de patrn. Cuando la matriz interfiere.
Cada muestra es un mundo.
Se preparan cinco o seis matraces.
Se toma un volumen de muestra, VX. Siempre el mismo, y se
coloca en los matraces.
Se prepara una disolucin estndar (patrn) del analito que
se quiere determinar en la muestra.
Al primer matraz no se le aade nada.
A los siguientes se les aade correlativamente volmenes
conocidos de la disolucin del estndar.
Las seales de los matraces van a ir aumentando su valor
debido a las adiciones.
Se representan las seales frente a los volmenes de la
disolucin del estndar aadido.

Herramientas de calibracin.
Patrn Interno. Consiste en aadir una
sustancia diferente a las que componen la
muestra en una cantidad conocida, y
relacionar la seal de sta con la del analito
que se quiere determinar. Hay dos
modalidades:
Una cantidad.
Varias cantidades.

Curva de Calibrado
Un procedimiento normal para determinar las protenas es el
ensayo de sorcin de colorante Bradford (M. Bradford, Anal.
Biochem. 1976, 72, 248). Segn este mtodo, la protena se
trata con un colorante que, al unirse a ella, cambia su color de
pardo a azul. La intensidad del color azul, medida a una
longitud de 595 nm, es proporcional a la cantidad de protena
presente:
Protena (g): 0
9.36 18.72 28.08 37.44
Absorbancia: 0.466 0.676 0.883 1.086 1.280
Determinar por mnimos cuadrados la ecuacin de la recta, con
sus parmetros de calidad.
Trazar un grfico en el que aparezcan los datos experimentales
y la recta calculada.
Una muestra problema de protena dio una absorbancia de
0.973. Calcular el nmero de microgramos y estimar la
incertidumbre en el resultado.

Adicin de patrn.
El ensayo de una sustancia X se basa en su
capacidad para catalizar una reaccin que produce
la sustancia radiactiva Y. La cantidad de Y producida
en un tiempo prefijado es proporcional a la
concentracin de X en la disolucin. Un problema
que contiene X en una matriz compleja desconocida,
y con un volumen inicial de 50 l, se trat con
incrementos de un patrn de X de concentracin
0.531 M, y se obtuvieron los siguientes resultados:
Volumen aadido de X (l)
0

100

200

300

400

Cuentas/minuto de Y radiactivo
1084

1844

2473

3266

4010

Uno de patrn interno. Caso: nico

estndar, nica concentracin.
En una experiencia preliminar, una disolucin
que contiene X de concentracin 0.0837 M y
S (patrn interno) de concentracin 0.0666 M
dio como reas de pico AX = 423 y AS = 347,
respectivamente. Para analizar 10.0 ml de una
muestra desconocida se aadieron 10.0 ml de
S de concentracin 0.146 M, y la mezcla se
diluy a 25.0 ml en un matraz volumtrico.
Esta mezcla dio en el cromatograma un rea
de pico para X de 533 y un rea de pico para
S de 582. Hallar la concentracin de X en la
muestra desconocida.

Uno de patrn interno. Caso nico

estndar: Mltiples
concentraciones.
En el anlisis del contenido de sodio metlico por medio de la
espectroscopa de emisin atmica por atomizacin a la llama, el
metal litio se utiliza como patrn interno. A partir de los datos
siguientes, estime la concentracin de sodio presente en una
muestra. Compare que pasara si, olvidndonos de este mtodo,
hubiesemos elegido la curva de calibrado.
[Na],
ppm

[Li], ppm

Seal Na

Seal Li

Ratio

0.2

800

0.22

48

0.00458

0.5

800

0.53

47

0.01128

800

2.30

51

0.04510

800

5.00

46

0.1087

Sample

800

0.88

48

0.01833

Otro de patrn interno. Caso nico estndar:

Mltiples concentraciones.
Se quiere determiner un hidrocarburo tipo C7 por CG, para lo que se
emplea un estndar interno que eluye cerca del que queremos
determinar. El nmero de replicados es 1, o sea, M =1.
Porcentaje
HC C7

Altura
C7

Altura
Interno

Ratio

0.050

18.8

50.0

0.38

0.100

48.1

64.1

0.75

0.150

63.4

55.1

1.15

0.200

63.2

42.7

1.48

0.250

93.6

53.8

1.74

Muestra

58.9

49.4

1.19

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