Secuencia del genoma de Clostridium tetani, agente

causante de la enfermedad del tetanus

Iliana Hetzabet Zazueta

Ojeda

Introduccin

Objetivo
Solo se conoce la secuencia de nucleotidos de TeTx
y su activador transcripcional TetR los cuales
estn codificados en un plsmido, designado PCL1
en la cepa Massachusetts.
Se muestra informacin acerca de la red de
regulacin que rige la formacin de la toxina del
ttanos.

Mtod
os

Estrategias de secuenciacin
Extraccin y
fragmentacin de ADN
de deC.tetaniE88
Extraccin y
fragmentacin de ADN
de deC.tetaniE88
Biblioteca de csmidos
a partirTasI 1-3 kb
Secuenciacin de los
extremos del plsmidos
y cosmidos

Prediccin y anotacin de ORF

Programa del RAYO para prediccin
Herramienta de anotacin ERGO
Comparacin con GeneBank

Genmica comparativa con

BLAST
C.tetani mas del 30% de aminocidos encima
del mas 60% con las secuencia de la protena y
la secuencia homloga
deC.perfringensoC.acetobutilicum,
respectivamente.

Resulta
dos y
discusi

Genes
tetX (CTP60)
colT (CTP33)

Caractersticas generales
del genomas de
C.tetani
Genoma
Contiene 2,799,250 pb
G + C 28,6%.
Plsmido pE88
Contiene 74 082 bp
G + C del 24,5%.
82% de los 2.368 ORFs se transcriben en la misma
direccin que la replicacin del ADN.
16 genes de transposasa
La falta de G + C indica que los acontecimientos
recientes de la adquisicin de genes no se ha dado
por lo que es un genoma estable.

La toxina tetnicaplsmido que codifica

pE88
Se identificaron 61 ORFs de ellos 28 muestran
similitudes con protenas
funciones asignadas

conocidas

con

las

El plsmido pE88 codifica para una colagenasa

114-kDa, designado Colt (CTP33), ayuda a la
patogenicidad.
9 genes de transporte, similares a cassettes de
unin al ATP (ABC). Los transportistas o permeasas
son codificadas por pE88 as como 8 nuevos genes
que codifican para las protenas con mltiples
hlices transmembrana.

La toxina tetnicaplsmido que codifica

pE88
Sistema de dos componentes (CTP21/CTP22) con
alta similtud a istemas de otras bacterias Grampositivas.
Protenas reguladoras con silitud entre s, esta es
una alternativa
factores de regulacin de la
sntesis de la ToxA toxinas y toxB, y para UviA
deC.perfringens, un regulador positivo del gen de
UV-inducible bacteriocina.

Factores de virulencia en
el cromosoma.
Se encontraron 19 homlogos de Cwp66, una
adhesina deC.difficile, que poseen mltiples
copias de la clula putativa de unin a la pared
PF04122 dominio identificado en SLP caracterizado
Se encontraron 2 protenas con mltiples dominios
repetidos ricos en leucina similares a internalina,
una protena de unin de la mediacin deListeria
monocytogenespara
albergar
las
clulas
epiteliales

Genmica comparativa
Se comparo el genoma de C. tetani con el genoma
de C.
perfringens y C. acetobutylicum nanopatogenica y
se identificaron homologos de ORFs.
Los ORFs codifican para 27 peptidases que fueron
encontrados con 2 grupos que tenan preferencia
por la unin a metaloproteasas 7 para degradar
lpidos y 15 para utilizar algo similar a la
atanolamida.
Se identificaron 35 genes para iones de sodio. Que
sonla fuente principal para la fuerza motriz de
iones en la membrana citoplasmtica deC.tetani.

Genmica comparativa
C.tetanino tiene los genes tipo ATPasa F0y F1,
que
si
estn
presentes
enC.acetobutilicumyC.perfringens.Por que usa
parte del ATP sintetizado en el metabolismo
fermentativo depara generar una fuerza motriz
de Na+ en la membrana.

La secrecin de
protenas.
Se detectar en 419 protenas deducidas
deC.tetani.De stas, 101 protenas estn
involucradas en el transporte, inclusive las
protenas periplsmicas de unin sustrato.
Alrededor de 160 son protenas son conservadas y
se desconoce su funcin, la mayora de ellas son
muy hidrfobas.

La secrecin de
protenas.

Graci
as!