Tema IV: CIDOS NUCLEICOS

Definicin y composicin
Nucletidos:

http://slidepl
nuclesido (pentosa + base nitrogenada)
ayer.es/slide/
fosfato
6151473/
oligonucletidos y polinucletidos

ADN:

Descubrimiento
Estructura y formas
Plegamiento
Desnaturalizacin
FUNCIN

ARN: Caractersticas
Tipos y localizacin
ARNm: llevar el mensaje desde el ADN
ARNt: transferir los aminocidos a la cadena peptdica
ARNr: constituir el ribosoma
Ribozimas

cidos nucleicos
Polinucletidos formados por nucletidos, molculas compuestas de
C, H, O y P.

Nucletidos

Bases nitrogenadas

Polinucletidos
Cadenas lineales de nucletidos.
Se forman mediante un enlace ster entre el
OH del grupo fosfato situado en 5 y el OH
situado en 3 liberando una molcula de agua.
Siempre presenta dos extremos 3 y 5.
Puede observarse que la estructura es una
cadena de pentosas y fosfatos de los que salen
bases nitrogenadas.

ADN: cido desoxirribonucleico

Cadena de polinucletidos donde la pentosa es la 2desoxirribosa y
las bases nitrogenadas son adenina (A), guanina (G), citosina (C) y
timina (T).
Al igual que el ARN tiene carcter cido por lo que se tie con
colorantes bsicos.
Se encuentra en el ncleo de la clula eucariota, asociado a protenas
de carcter bsico, histonas, y en mitocondrias, plastos y citosol de
clulas procariotas. Adems puede formar parte de virus ADN.

Descubrimiento del ADN

Friedrich Miescher
Frederick Griffith
Oswald Avery

1869
1928

Aisl el ADN del ncleo celular

Streptococcus pneumoniae
Bacterias S lisas virulentas

Colin MacLeod

1944

Bacterias R rugosas no virulentas

Maclyn McCarty
Alexander R. Todd 1950-51
Alfred D. Hershey 1952
Martha Chase
James Watson
1953
Francis Crick

(pgina 102)
Establece la composicin del ADN
S*en protenas y P*en cidos
nucleicos de fago.
Estructura del ADN

Maurice Wilkins
Rosalind Franklin
Erwin Chargaff

Fotografa de rayos X de la forma B del ADN

A +T = G + C

Estructura del ADN

Formas del ADN

ADN. Tamao
Siempre es una molcula muy grande.
Los virus, que tienen las molculas ms pequeas, superan los 5000
pares de bases.
El ADN humano tiene 3.000.000.000 pares de nucletidos.
El lugar que una especie ocupa en la escala evolutiva no tiene
relacin directa con el nmero de nucletidos de su genoma:
Una cebolla tiene un genoma 5 veces mayor que el del humano.
Un helecho presenta un genoma casi 10 veces mayor que el de la
cebolla.
Si estirramos el ADN de un ncleo de clula humano, medira 1
metro de longitud. Veremos cmo se empaqueta.

ADN. Forma

Plegamiento del ADN

ADN. desnaturalizacin
Desnaturalizacin. Variando T y/o pH
ADN (doble hlice)

ADN (hlice sencilla)

Renaturalizacin. A 65 C.

Gran afinidad entre las bases complementarias.

Utilidad:
Comparacin de secuencias: medicina forense, estudios evolutivos...
Tcnicas de ingeniera gentica: Bsqueda de genes mediante sondas
genticas, PCR, ARN de interferencia.
Aplicaciones biomdicas.

ADN. Funcin
Almacn de la informacin:
Gobierno de la actividad celular
ADN

ARN
transcripcin

Protenas
traduccin

Epigentica.
Transmite la informacin de una generacin celular a la siguiente:
ADN
duplicacin o replicacin

ARN: cido ribonucleico

ARN: tipos y localizacin

ARN mensajero (ARNm)
ARN transferente (ARNt)
ARN ribosmico (ARNr)
Estos tres tipos de ARN se pueden encontrar en el ncleo de clulas
eucariotas, donde se forman, y en el citoplasma donde ejercen su
funcin; el ARNr forma la estructura de los ribosomas. En el
citoplasma de bacterias, mitocondrias y plastos, donde se forman y
ejercen su funcin; el ARNr en los ribosomas.
ARN heterogneo nuclear (ARNhn) se encuentran en el ncleo y son
los precursores de diferentes ARNm.
ARN de interferencia (ARNi). Descritos recientemente, parece que
intervienen en la regulacin de la actividad gnica.

ARN mensajero
Se encuentra en menor cantidad en la clula (5%).
Presenta estructura lineal.
Es el que lleva el mensaje que va a dar lugar a protenas, por tanto,
puede ser, en algunos casos, el de mayor longitud.
Su funcin es transmitir el mensaje codificado en el ADN.
Se forma en el ncleo de eucariotas o en el citosol de bacterias,
plastos y mitocondrias y se traduce a protenas en los ribosomas.
En eucariotas sufre el proceso de maduracin.

ARN transferente

ARN ribosmico
Es el ms abundante (>75%), el de mayor tamao y peso molecular?
Junto a protenas forma los ribosomas. Estos, sern los encargados
de traducir el cdigo gentico a protenas.
En eucariotas se forman en el nuclolo. ARN nucleolar (ARNn)
Eucariotas: genes en tndem.

Procariotas:

ADN
45S
28S

18S

33 prot.

5,8S

ARN
5S

49 prot.
4OS

6OS

16S + 21 prot. 5S + 23S +

+ 34 prot.

Ribozimas
Sidney Altman y Robert Cech obtuvieron el premio Nobel de
qumica por descubrir la actividad cataltica del ARN.
La capacidad enzimtica de muchas molculas de ARN apoyara la
teora de que fue el ARN la primera molcula con capacidad de
replicacin necesaria para el origen de la vida.
Las molculas de ARN son ms inestables que las de ADN.

GENTICA MOLECULAR: Dogma Central? de la Biologa

Duplicacin
FASE S del
ADN
ADN
Replicacin
Ciclo Celular
Sntesis de ADN
Transcripcin
inversa (virus)

Transcripcin (cdigo en ADN a ARN)

Mensajero
ARN

Transferente
Ribosomal
Traduccin (nucletidos a aminocidos)

PROTENAS

Mutacin: alteracin del ADN

Duplicacin o replicacin del ADN

Proceso de sntesis o autocopiado de todo el ADN nuclear (eucariota)
o cromosmico (procariota). Descrito por Arthur Kornberg.
El mecanismo fue propuesto por Watson y Crick y demostrado por
Matthew S. Meselson y Franklin W. Stahl en 1957 (pgina 103).
Requerimientos en procariotas:
Molcula de ADN molde.
Protenas: iniciadoras (Ori I), helicasas y topoisomerasas,
estabilizadoras (abrir la hlice, girarla y estabilizarla), primasa
(sintetizar los primer o cebadores), ADN polimerasas III (genera las
nuevas hebras), II (ADN mitocondrial) y I (retira los primer, rellena
los huecos y repara posibles errores) y ADN ligasa (une los
fragmentos de Okazaki).
Nucletidos: NTP.
Energa: NTP

energa
NMP + E (ATP

AMP)

Duplicacin del ADN. Proceso

Duplicacin del ADN en eucariotas

Diferencias con el proceso descrito en procariotas:
Distintos orgenes de iniciacin.
Formacin de mltiples horquillas de replicacin y de burbujas.
Hay que separar las histonas que se vuelven a unir tras la creacin
de la nueva copia. Estas protenas se han sintetizado previamente.
Diferencias en las protenas: ver cuadro de la pgina 84.
Construccin de los extremos: telomerasa.
Implicaciones de la existencia y funcionamiento de la telomerasa.

Transcripcin del ADN. Sntesis de ARN

Transcripcin. Proceso

Transcripcin en eucariotas I

Transcripcin en eucariotas II. Maduracin

Traduccin. Sntesis de protenas

Tras la transcripcin se forma, entre otros, el ARNm. En eucariotas
cada ARNm es monocistrnico; tiene informacin para una nica
protena; en procariotas puede ser policistrnico, es decir, da lugar a
varias protenas.
Los aminocidos deben ser transportados
en ARNt para formar la protena, luego
deben ser activados. Cada aminocido se
une al ARNt que tenga el anticodn que le
corresponda segn el Cdigo Gentico.
El ARNm presenta una secuencia de
nucletidos que se leen de tres en tres y
que tienen sus correspondientes
complementarios en el ARNt. Este
triplete se denomina codn.

Cdigo Gentico

Cdigo Gentico. Caractersticas

Lo intuy Francis Crick. Lo demostraron Niremberg, Khorana y
Ochoa.
Cada tres bases o triplete se denomina codn.
Es especfico: cada triplete slo codifica para un aminocido.
Es degenerado: varios tripletes codifican para el mismo aminocido.
Conviene observar que son las bases que ocupan el tercer lugar las
que cambian generalmente (leucina, serina y arginina).
No presenta solapamientos ni discontinuidades.
Es universal.

Traduccin. Fases y requerimientos

Al igual que en la transcripcin se definen tres fases:

Iniciacin: ARNm, ribosoma separado en subunidades, factores proteicos

de iniciacin, energa cedida por GTP, iones Mg2+, el primer aminocido
siempre es la metionina (eucariotas) y en procariotas la formilmetionina, el
codn de iniciacin AUG, se acoplan el codn con el anticodn en la
posicin P y a continuacin la subunidad mayor del ribosoma se une a la
subunidad menor.
Elongacin: Son necesarios los factores de elongacin y los distintos
aminocidos unidos a los ARNt. Se une en la posicin A el aminoacil-tRNA
correspondiente al segundo codn. Se produce el enlace peptdico mediante
la peptidiltransferasa de la subunidad mayor del ribosoma. Se desplaza el
ARNm en sentido 5 3. El pptido pasa al lugar P, deja el sitio A para el
nuevo a y sale el ARNt que ha quedado sin a. Se utiliza la energa de
GTP.
Terminacin: codn de terminacin. Factores de terminacin que
bloquean el sitio A. Separacin de la cadena polipeptdica del ARNt ltimo
y degradacin del ARNm por las ARNasas.

Traduccin. Proceso

Regulacin de la expresin gnica

Regulacin en eucariotas

Procesos ms complejos y peor conocidos.

Diferentes niveles:

Transcripcin: momento y frecuencia (protenas

reguladoras: activadores y represores; cambios
en la estructura del ADN (compactacin,
metilacin, factores de transcripcin
Maduracin del ARNm.
Transporte del ARNm.
Traduccin.
Degradacin de los ARNm.
Actividad de las protenas.
Elementos transponibles o transposones.
Factores extracelulares: hormonas, etc.

ARN de interferencia. Premio Nobel

de Medicina,2006. Fire, A y Mello, C.

Mutaciones
Alteraciones de la informacin gentica.
Tipos: gnicas. Afectan a la estructura molecular del gen.
cromosmicas: afectan al cromosoma.
genmicas. Afectan al genoma.
Clasificacin de mutaciones gnicas:

Se estudiarn en los temas

de gentica mendeliana

sustitucin: una base nitrogenada por otra.

delecin: prdida de uno o varios nucletidos.
insercin: ganancia de uno o varios nucletidos.
5ATTGCCGTGACTAC 3
Anlisis de las
consecuencias

5ATTGCTGTGACTAC 3
5ATTGCGTGACTAC 3
5ATTGCACGTGACTAC 3

Mutaciones. Causas y reparacin

Causas:
Errores de lectura: fallos de la polimerasa; en las oxidaciones,
radicales libres provocan que G se altere y se una a T en vez de
C.
Cambios qumicos: desaminaciones (C x U), despurinaciones
(rotura del enlace N-glucosdico), formacin de dmeros de T
mediante radiacin ultravioleta.
Transposiciones: transposones.

Reparaciones: ADN polimerasa I, accin de endonucleasas,

sntesis de protenas reparadoras (ante los dmeros de T),
reparacin inespecfica y posterior apoptosis, ...

Ingeniera Gentica I.
Manipulacin del material gentico
Objetivos:
Conocer el material gentico. Genmica (Proyecto Genoma
Humano).
Sustitucin de genes defectuosos por genes normales.
Introduccin de genes nuevos: terapia gnica, organismos
genticamente modificados (OGM) o transgnicos.
Obtencin de pptidos y protenas en grandes cantidades:
hormonas, antibiticos, vacunas, etc.

Ingeniera Gentica II.

Tcnicas de manipulacin
Tecnologa del ADN recombinante:
Enzimas de restriccin (extremos cohesivos o pegajosos y extremos
romos).
Mutagnesis dirigida.
Electroforesis en gel.
Clonacin.
PCR (reaccin en cadena de la polimerasa).
Hibridacin.

Ingeniera Gentica III.

Logros alcanzados

Secuenciacin de diferentes genomas.

Proyecto Genoma Humano
Mapas genticos: posicin relativa de genes conocidos por su funcin.
Mapas fsicos: secuencia de nucletidos a lo largo del cromosoma.
Terapia gnica.
Transgnesis: seres transgnicos, alimentos transgnicos, productos,
xenotransplantes, etc.
Clulas madre: embrionarias y adultas.
Consideraciones ticas, legales y sociales.
???

Proyecto Genoma Humano

Proyecto genoma
Cromosomas Genes
1
2968
2
2288
3
2032
4
1297
5
1643
6
1963
7
1443
8
1127
9
1299
10
1440
11
2093
12
1652
13
748
14
1050
15
1122
16
1098
17
1576
18
766
19
1454
20
927
21
303
22
288
X
1184
Y
231
Sin colocar

Bases
Bases determinadas
245.203.898
218.712.898
243.315.028
237.043.673
199.411.731
193.607.218
191,610,523
186,580,523
180,967,295
177,524,972
170,740,541
166,880,540
158,431,299
154,546,299
145,908,738
141,694,337
134,505,819
115,187,714
135,480,874
130,710,865
134,978,784
130,709,420
133,464,434
129,328,332
114,151,656
95,511,656
105,311,216
87,410,661
100,114,055
81,117,055
89,995,999
79,890,791
81,691,216
77,480,855
77,753,510
74,534,531
63,790,860
55,780,860
63,644,868
59,424,990
46,976,537
33,924,742
49,476,972
34,352,051
152,634,166
147,686,664
50,961,097
22,761,097
25,263,157
25,062,835