UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

CIENCIAS QUIMICAS
BIOQUIMICA CLINICA
LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA CLINICA I

Escherichia coli enteropatgena

INTEGRANTES:
Cacarin Karina
Ontaneda Yessenia
Quishpe Josu
Remache Angie

ndice
1. INTRODUCCION
2. PATOGENESIS MOLECULAR
. Adherencia inicial
. Inyeccin de factores y
transduccin de seales
. Contacto intimo y formacin de
pedestales
3. DIAGNOSTICO DE L A EPEC
4.CASOS CLINICOS

DEFINICIN:

INTRODUCCIN

Bacteria comensal del intestino grueso ,asociado a una gran diversidad de

sndromes clnicos que van desde septicemia, gastroenteritis, meningitis e infeccin
de vas urinarias

EPIDEMIOLOGIA
Transmisin fecal oral
Alimentos y agua contaminados

AGENTE CAUSAL

Bacilos Gram negativos

Mviles
Anaerobios, Aerobios facultativos
Antgeno somtico O
Antgeno capsular K
Antgeno flagelar H

Fermentan glucosa
Fermentan lactosa (colonias
acidas ,rosadas)
Reducen nitratos a nitritos
Oxidasa negativa
Produccin de gas
FACTORES DE VIRULENCIA
Pilis o fimbrias
Pilis tipo 1: se fija a manosa en
cualquier CE
Pili P : se une a digalactsido
de
clulas
uretrales
y
eritrocitos
AFC: se fija al enterocito
PFH: se fija a enterocitos

PATOGENESIS MOLECULAR
EPEC

ALTERACION HISTOPATOLOGICA

Intestino
del husped

INTESTINO A/E
EL MODELO DE PATOGENESIS EPEC
1. Adherencia Inicial ( fundamental en la patognesis )
2. Inyeccin de factores y traduccin de seales
3. Contacto intimo

Fase1: adherencia inicial

Entre las mismas
bacterias
Fase 2: adherencia de las
bacterias a la clula
husped

2.Inyeccion de factores y transduccin de seales

Protenas
EscN --ATP

LEE: Estos operones forman 3

dominios de virulencia que
codifican:
1. Los operones LEE1,2 Y 3
que codifican las protenas
del SSTT las cuales forman
un complejo de aguja CA.
LEE4: Genes de protenas Esp
LEE5:
codificadas
las
adhesinas bacteriana intimina
y su receptor llamado Tir

LESIN A/E

Locus de la eliminacin del enterocito o LEE

(LEE1-LEE5)

DIAGNOSTICO EPEC

Aislar muestra de heces en medios selectivos y diferenciales

Agar MacConkey o el agar de eosina y azul de metileno EMB.

Sospecha de brote epidmico diferenciar EPEC de las E. coli de flora normal

METODOLOGIAS

Serotipificacion

Ensayo de adherencia en clulas HEp-2

Pruebas FAS (tincin fluorescente para

actina)

Tcnicas de biologa molecular (amplifica

genes que codifican a protenas de
virulencia)

SEROTIPIFICACION

Mtodo que logro reconocer a tipos

especficos de E. coli (esquema kauffman)

Diarrea infantil

Etapas de EPEC aisladas de heces de nios

con diarrea (75%)

Recuperacin de entero patgenos a partir

de heces

Ensayo de adherencia en clulas HEp-2

Prueba fenotpica de diagnostico

Estndar de oro para la

identificacin de EPEC

Identifica EPEC dado que bacterias

se agrupan en cmulos o
microcolonias sobre las clulas
epiteliales en cultivo.

reconocer EAEC, se agrupan y

forman empalizadas que se
adhieren a las clulas y al cristal}

PRUEBAS DE FAS

Se emplea con amplitud en

estudios epidemiolgico y la
investigacin bsica

Se observa la acumulacin de
actina del citoesqueleto en forma
de puntos fluorescentes

Se encuentran pedestales y
bacterias adheridas

PROCEDIMIENTO DE LA PRUEBA FAS

Modo directo, biopsias intestinales en nios con

enfermedad diarreica

Cultivos de clulas HEp-2, HeLa o Caco-2 infectadas con

la cepa aislada de las heces del paciente

Se usa faloidina que une constitutiva a la actina

intracelular

Se acopla algn fluorocromo (rodamina) se observa

citoesqueleto de actina de CE no infectadas fibras de
estrs

PRUEBAS DE FAS

Puntos de acumulacin de actina

sobre clulas infectadas por EPEC:
PRUEBAS DE FAS POSITIVA

Los ensayos de adherencia y

prueba de fas deben ir
acompaada de tcnicas de
biologa molecular

Detecta genticamente los

factores de virulencia

BIOLOGIA MOLECULAR

Estudios moleculares

Mediante la reaccin de PCR y con sondas genticas

Blancos genticos

secuencia del plsmido EAF que se emplea como

sonda

Amplificacin por PCR de la subunidad estructural

de los BFP (bfp A)

Gen que codifica la intimina (eae)

BIOLOGIA MOLECULAR

PCR para identificar EPEC se realiza en un

tiempo menor a 5 horas

Manera rpida y especifica de diagnostico

Se ha probado cepas provenientes de muestras

clnicas y alimentos

Ensayo que utiliza la tecnologa de microarreglos de DNA

1.

O55

2.

O111

3.

O114

4.

O128

5.

O157
.

Sondas con genes especficos de serotipos de E. coli

Extender la deteccin de antgenos somticos as como antgenos flagelares

BIBLIOGRAFIA :

Vidal J., Canizlez A., Gutierrez J., Navarro F., (septiembre-octubre de 2007),
PATOGENESIS MOLUCULAR, epidemiologia y diagnostico de Escherichia coli
enteropatgena, salud publica de mexico/ vol.49, No.5, recuperado el 17 de
Dic 2015