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FIGURA 42 Componentes de un
aparato de cromatografa
lquida tpico. R1 y R2: reservorios
de lquido de fase mvil. p: sistema
de bombeo programable que
contiene dos bombas, 1 y 2, y una
cmara de mezcla, M. El sistema
puede ajustarse para que bombee
lquido desde slo un reservorio,
para que cambie de reservorios en
un punto predeterminado a fin de
generar un gradiente de paso, o
para que mezcle lquidos de los dos
reservorios en proporciones que
varan con el tiempo para crear un
gradiente continuo. c: columna de
vidrio, metal o plstico que contiene
la fase estacionaria. F: colector de
fraccin para recolectar porciones,
llamadas fracciones, de lquido de
elucin en tubos de ensayo
separados.
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FIGURA 46 IEF-SDS-PAGE
bidimensionales. El gel se
ti con azul de coomassie. un
extracto bacteriano bruto fue
sometido primero a enfoque
isoelctrico (IEF) en un
gradiente de pH de 3 a 10. A
continuacin el gel con IEF fue
colocado en forma horizontal
en la
parte superior de un gel de
SDS, y despus las protenas
se resolvieron ms mediante
SDS-paGE. Ntese la
resolucin muy mejorada de
distintos polipptidos en
comparacin con gel de SDSpaGE ordinario (fig. 4-5).
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FIGURA 47 La reaccin de
edman. El fenilisotiocianato
produce derivados del residuo
amino terminal de un pptido
como un cido feniltiohidantoico.
El tratamiento con cido en un
solvente no hidroxlico libera una
feniltiohidantona, que
posteriormente es identificada
por su movilidad cromatogrfica,
y un pptido un residuo ms
corto. a continuacin se repite el
proceso.
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