Identificacin de protenas, lpidos y

carbohidratos en productos lcteos.

Objetivos.

Comprobar de forma sencilla la existencia de protenas, grasas y

azcares en un alimento bsico como la leche.

Observar el comportamiento de las protenas lcteas ante determinados

cambios fsicos y qumicos.

Procedimiento experimental

Al tubo No. 1 aadir 2 mL de leche y 2 mL de HCl concentrado.

Al tubo No. 2 adicionar igual cantidad de leche y 2 mL de una solucin

saturada de NaCl.

Al tubo No. 3 agregar 2 mL de leche y 2 mL de NaOH al 20%.

Al tubo No.4 aadir 2 mL de leche y despus calentar levemente.

Anlisis de la tcnica

El punto isoelctrico es el valor de pH en el cual los cuerpos qumicos

disociados presentan una igualdad de cargas positivas y negativas

En este estado de igualdad de cargas, las molculas proteicas tienden a

formar con cidos y bases sales internas, producindose la coagulacin
de las protenas

Procedimiento experimental
Prueba Xantoproteica.

Recoger con una esptula el precipitado de la leche coagulada

(casena), ponerlo en un trozo de papel filtro y secarlo.

Poner en un tubo de ensayo una pequea porcin del precipitado seco,

aadir unas gotas de cido ntrico concentrado y calentar ligeramente;
observar el resultado.

Prueba de Biuret.

Colocar en un tubo una disolucin de la protena, aadir un volumen

igual de NaOH al 20%, agitar y agregar de 4 a 5 gotas de CuSO4 al 1%,
agitar nuevamente e interpretar los resultados.

Anlisis de la tcnica.

Formacin de un compuesto aromtico nitrado de color amarillo

Hay un vire a amarillo al calentarlo. El color se empieza a tornarse

anaranjado cuando la solucin se vuelve bsica.

La prueba da resultado positivo en aquellas protenas con aminocidos

portadores de grupos bencnicos, tirosina, fenilalanina y triptofano, que se
vuelven anaranjados (formacin del cido pirmico o trinitrofenol).

Se produce la nitracin del anillo bencnico presente en dichos

aminocidos.

El reactivo de Biuret contiene CuSO4 en solucin acuosa alcalina (de

NaOH o KOH).

La reaccin se basa en la formacin de un compuesto de color violeta.

Formacin de un complejo de coordinacin entre los iones Cu2+ y los

pares de electrones no compartidos del nitrgeno que forma parte de
los enlaces peptdicos.

Procedimiento experimental
Identificacin de lpidos

Colocar 2mL de leche en un tubo de ensayo.

Aadir 10 mL de agua y unas gotas de Sudn III, agitar fuertemente y

observar

Enseguida aadir 1 mL de HCl al 50% y calentar; pueden aparecer dos o

tres fases:

Fase Superior: formada por las grasas.

Fase intermedia: formada por agua y ciertos compuestos solubles, como

la lactosa y algunas protenas disueltas (lactoalbmina y lactoglobulina).

Fase Inferior: con las protenas coaguladas y precipitadas.

Identificacin de carbohidratos.

Con ayuda de una pipeta Pasteur o pipeta beral recoger la fase soluble
de la prueba anterior.

Filtrar y poner 1 mL de este filtrado en un tubo de ensayo. A este tubo

agregar 1 mL del reactivo de Fehling (o de Benedict) y calentar durante
unos minutos.

La prueba se considera positiva si aparece un precipitado de xido de

cobre (I) de color rojo, lo cual indica la presencia de un azcar reductor.

Aplicaciones.

Sntesis de indoles.
Obtencin de la 1,2,3,4-tetrahidrocarbazol

Objetivos

Ilustrar la sntesis de indoles de Fischer.

Preparar el 1,2,3,4-tetrahidrocarbazol, a partir de la fenilhidrazona de la

ciclohexanona en presencia de un catalizador cido.

Revisar la importancia farmacolgica de los derivados del indol.

Procedimiento experimental.

En un matraz de fondo redondo de 25 mL con fondo plano, coloque 0.26 mL

(0.25 g, 2.54 mmol) de ciclohexanona, 1.8 mL de cido actico glacial y 0.24
mL (0.27 g, 2.45 mmol) de fenilhidrazina.

Introduzca el agitador magntico, adaptar el refrigerante de agua en posicin

de reflujo y calentar la mezcla con una ebullicin suave por un tiempo de 20
min.

Verter la mezcla de reaccin en un vaso de precipitado de 50 mL y dejar

enfriar la mezcla de reaccin a temperatura ambiente.

Adicionar agua fra (5 mL), en este momento precipita el producto, el cual se

asla por filtracin al vaco.

Lavar el precipitado con tres porciones de agua destilada fra de 5 mL cada

una y djelo secar.

El producto crudo se purifica por recristalizacin de metanol.

El producto puro se asla por medio de una filtracin al vaco

Anlisis de tcnica

Aplicaciones