Escuela de

NUTRICION

Blg. Katherine Verstegui

A.

Introduccin a la
Microbiologa
Microbiologa: Panorama
Histrico.
Estructura y morfologa
de
microorganismos.
Relacin
Husped-Agente
Infeccioso:
Factores
de
Virulencia.
Gentica
Bacteriana.
Plsmidos. Transformacin.
Conjugacin. Transduccin.
Transposicin

Microbiolog
a
Ciencia que estudia la biologa de los
seres microscpicos, que no puede ser
observados a simple vista, llamados
microorganismos: su estructura,
fisiologa, gentica, ecologa y sus
aplicaciones socioeconmicas.
Los microorganismos forman
parte de la naturaleza
constituyendo poblaciones
mixtas de clulas, en las que
La
microbiologa
cada
clula llevautiliza
a cabotcnicas
sus
como
la esterilizacin,
empleo de
funciones
vitales de el
forma
medios de cultivo, el anlisis
independiente.
molecular y bioqumica para el
aislamiento y crecimiento de los
microorganismos.

Fortalecimiento de la Microbiologa

Koch

Robert Koch (1813

1910) estudio al
Bacillus anthracis
(ntrax) y estableci
cuatro postulados que
demuestran la teora
microbiana de las
enfermedades
infecciosas. Identific
tambin la los
microbios que causan
la tuberculosis y el
clera
Al reconocer el origen microbiano
de las fermentaciones
El abandono de la idea de la
generacin espontnea
Y
El triunfo de la teora germinal de la
enfermedad

Lederberg
y
Tatum
(1946),
demostraron que algunas bacterias
tambin podan transferir genes por
contacto
clula

clula
(conjugacin).
En 1973 se public un artculo en el
que se demostraba la factibilidad de
introducir y expresar genes forneos
en
bacterias,
dando
lugar
al
resurgimiento y modernizacin de la
biotecnologa.
Luc Montagnier (1932 - ): Descubre
el VIH (virus del SIDA).

Campos de accin de la Microbiologa

En la salud
En la industria
En el ambiente
En la biotecnologa

CELULA EUCARIOTA
- Presenta ncleo verdadero
- Membrana plasmtica
- Pared elular (de celulosa slo en vegetales)
- Sistema interno de membranas
- Tamao ms grande
- Posee mitocondrias, ribosomas, retculo
endoplsmico, aparato de golgi, peroxisomas,
lisosomas, centriolos (en animales), inclusiones,
etc.

Microorganismos
eucariontes

Levadura (Hongo)

Protozoario:
Giardia

CELULA PROCARIOTA
- No presenta ncleo verdadero
- Presenta pared celular est conformada por un
complejo llamado peptidoglucano
- Presenta membrana plasmtica
- Posee un solo cromosoma (ADN desnudo).
- Es de tamao ms pequeo
- Posee organelos subcelulares
- Posee ribosomas procariticos

Conjunto
de
reacciones
bioqumicas
catablicas y anablicas, que transforman
las sustancias nutritivas para obtener
energa.
Anabolismo: reacciones de sntesis.
Catabolismo: degradacin de compuestos
orgnicos.
Reacciones Endorgnicas.
Reacciones Exorgnicas.

Los microorganismos requieren para su

desarrollo y actividad celular compuestos
qumicos: nutrientes.
Dependiendo de las cantidades que se
requieran se habla de macronutrientes y
micronutrientes.
Existen diferencias en cuanto a los
requerimientos
nutricionales
de
cada
microorganismo.

Tipo

Fuente de
energa

Fuente de
carbono

Ejemplos

Fotoauttrofas

Luz

CO2

Algas
y
cianobacterias

Fotohetertrofas

Luz

Compuestos
orgnicos

Algas
y
bacterias
fotosintticas

Quimioauttrofas o Qumica
Littrofas

Compuesto
Pocas bacterias
inorgnicos:
H2, NH3, NO2,
H2S, CO2

Quimiohetertrofas Qumica
o Hetertrofas

Compuesto
orgnicos:
glucosa

La mayora de
bacterias

Se requieren en muy pocas cantidades y solo

por algunas clulas:
Vitaminas,
Aminocidos,
purinas y
pirimidinas.
La mayora de los microorganismos son
capaces de sintetizarlos.

Agua

Es el principal componente del protoplasma

bacteriano; el medio donde suceden las
reacciones qumicas y sus productos.
La disponibilidad se mide por un parmetro
denominado: actividad de agua (aw) o
potencial de agua. Valores normales entre
0.90- 0.99.

Enzimas

Catalizadores biolgicos de naturaleza

proteica.
Su accionar es esencial en el metabolismo
bacteriano.
Actan de manera especifica a travs de un
sitio activo, produciendo un efecto cataltico
sobre
las
molculas
del
sustrato,
convirtindola en un producto especifico.
Funcionan en forma secuencial: sistema
multienzimatico.

Oxgeno
Los microorganismos son muy variables en cuanto a la
necesidad del oxigeno.
Se dividen dependiendo del efecto del oxigeno:
Aerobios estrictos: los que requieren oxigeno como
aceptor terminal de electrones, no proliferan en ausencia
de O2. ej. Mycobacterium bovis.

Microaerfilos: utilizan O2 a niveles muy bajos. Un

12%. No proliferen en la superficie de un medio slido.
Ej. Haemophillus suis

Anaerobios estrictos: las que no emplean oxigeno para su

metabolismo, sino que obtienen su energa de reacciones
fermentativas. Ej. Clostridium tetani

Anaerobios aerotolerantes: pueden crecer en presencia o

ausencia de oxigeno, pero la energa la obtienen por
fermentacin. Ej. Bacterias acidolcticas.

Anaerobios facultativos: son bacterias

mediante procesos oxidativos, utilizando
aceptor terminal de electrones, o en
empleando reacciones de fermentacin
energa.
Ej. Streptococcus, E. coli

que proliferan
oxigeno como
anaerobiosis,
para obtener

Crecimiento de poblaciones

Es el aumento en el nmero de clulas de una poblacin.

Velocidad de crecimiento: Es el cambio en el nmero de
clulas o en la masa celular, experimentado por unidad de
tiempo.
Durante el ciclo de division celular, todos los componentes se
duplican.
Tiempo de generacin: es el tiempo que se requiere para
que la poblacin se duplique.
Los tiempos de generacin varan ampliamente entre las
diferentes bacterias.
Ej. 1 a 3 horas, 10 min, o varios dias.

Temperatura

La temperatura es un factor ambiental

importante en el control de crecimiento
microbiano.
Los M.O pueden agruparse segn los
mrgenes de temperatura que requieren.
Se distinguen 4 grupos:
1. Psicrfilos
2. Mesfilos
3. Termfilos
4. Hipertermfilos.

Clases de m.o. segn la temperatura

Tipo

Rango de
Temperatura

M.O

Temperatura
Optima

Psicrfilo

0 - 20

15

Algas

Mesfilo

20 - 40

38

E. coli

Termfilo

40 - 70

60

Bacillus
stearothermophillus

Hipertermfilos

90 - 115

106

Thermus acuaticus

PH

La acidez o alcalinidad de un medio tiene una

gran importancia sobre el crecimiento
microbiano. La mayora de MO. Crecen a un
pH entre 6 y 8.
El pH intracelular debe permanecer prximo a
la neutralidad.

Cromosoma bacteriano

Caractersticas:
o Un cromosoma.
o ADN.
o Circular.

o Bicatenario y antiparalelo.
o Haploides (con algunas excepciones).

39

Cromosoma bacteriano
Caractersticas:
o Organizados en genes; principalmente, esenciales
para el crecimiento bacteriano.
o Mapeado en minutos.
o Sin membrana nuclear.

40

Gentica bacteriana

Replicacin:.
o Semiconservativa.
o Bidireccional.
o Iniciando en un punto llamado Ori C, O, origen o
replicn y tiene dos puntos de crecimiento (PC) u
horquillas de replicacin.
o Replicn tienen la informacin gentica necesaria
para autorreplicarse.
o Semidiscontinua.
http://www.ucm.es/info/genetica/grupod/Replicacion/Replicacion.htm

41

Gentica bacteriana

Replicacin:
o Se ha observado cierta interaccin del replicn con la
membrana plasmtica, participando en la segregacin
de los cromosomas durante la formacin del tabique
(mesosoma) para la divisin de la clula procariota.

Original de: http://www.slic2.wsu.edu:82/hurlbert/micro101/pages/Chap2.html#two_bact_groups

42

Gentica bacteriana

Traduccin: La sntesis de un polipptido.

(despus de las modificaciones postraduccionales
se forma una protena funcional).
o Ribosomas bacterianos (70s, constituidos por dos
subunidades: la mayor 50s y la menor 30s).
o Se realiza mediante tres etapas: iniciacin,
elongacin y terminacin.
o Se lee por codones (tripletes de nucletidos).
43

Gentica bacteriana

Regulacin de la expresin gentica

o Los mecanismos reguladores elementales permite a la bacteria
minimizar los requerimientos de energa.
o Un sistema slo se activa cuando es necesario
o Siendo capaz de adaptarse con rapidez a cambios de la concentracin
de nutrientes en el medio.
o Evita producir enzimas de una va metablica si el sustrato no est
presente en el medio o activa la produccin de enzimas de una va
para metabolizar un determinado nutriente disponible en el medio.

44

Gentica bacteriana

Plsmidos: material gentico extracromosmico, que no

suelen codificar para funciones esenciales, sino para
funciones particulares de la bacteria.
o Circulares, doble cadena de ADN (bicatenarios).
o Tamao entre 1.5 y 400 kb.
o Algunos como los de Borrelia burgdorferi y B. hermsii tienen
plsmidos lineales.
o Se autorreplica
o Cada plsmido tiene un nmero de copias por cromosoma,
pudiendo existir desde uno hasta varios, incluso cientos.
45

Gentica bacteriana

Plsmidos
Se clasifican de acuerdo a su grupo de incompatibilidad. Si son
incapaces de coexistir en la misma clula bacteriana son del
mismo grupo de incompatibilidad.
Funciones de los plsmidos
o Replicacin, reparacin, recombinacin.
o Fertilidad.
o Restriccin y modificacin.
o Resistencia a agentes antimicrobianos.
o Resistencia a metales txicos y detergentes.
o Resistencia a bacterifagos.
o Metabolismo de azcares y compuestos aromticos.
o Adhesin celular, virulencia.

46

Gentica bacteriana

Plsmidos
Interaccin de los plsmidos al cromosoma: Se corta, lineariza y se
integra al cromosoma, todo o en parte, mediante ciertos procesos
enzimticos y de complementariedad del ADN. La estructura
formada se llama episoma.

47
http://www.biologia.edu.ar/adn/adntema3.htm

Gentica bacteriana

Plsmidos
Recombinacin: Puede combinarse
con otros plsmidos, mediante
intercruzamiento, por procesos
enzimticos

de

complementariedad de ADN.

48

Gentica bacteriana

Plsmidos
Clonacin: Estas caractersticas de los plsmidos ha permitido al
humano, realizar procesos de investigacin, insertando genes,
duplicarlos, expresar protenas, regularlas, etc. para fines de
investigacin o de produccin biotecnolgica. Surgiendo la
Ingeniera gentica.

www.amgen.es/biotecnologia/ images/image009.gif

49

Gentica bacteriana

Procesos genticos que realizan las bacteria como

mecanismo de variacin.
o Transformacin
o Transduccin
o Conjugacin

50

Clonacin en bacterias

bacteria

DNA

Enzima de
restriccin

Plsmido
ligasa

ADN recombinante
Bacterias
transformadas

Transformacin

Electroporacin

2
C

ADN recombinante

Cultivo de bacterias competentes

Choque
trmico

Bacterias, algunas de ellas

transformadas

51

Gentica bacteriana

o Trasformacin: El material gentico (externo o exgeno) es incorporado

por las bacterias tomndolo del medio donde se encuentra, para adquirir
nuevas caractersticas.

http://www.higiene.edu.uy/biolcel/genetica.ppt#265,9,Diapositiva 9

52

Gentica bacteriana
La transformacin observado por Frederick Griffith (1928), en infecciones
neumococcicas en ratones. EL PRINCIPIO TRANSFORMANTE.
A)

C)

B)

D)

http://www.ucm.es/info/genetica/grupod/Basemol/base_molecular_de_la_herencia.htm

53

Gentica bacteriana

o Transduccin: El material gentico pasa de una

bacteria a otra por medio de un bacterifago que
funciona como acarreador.

54

Gentica bacteriana

Transduccin: Ciclo ltico

http://www.biologia.edu.ar/adn/adntema3.htm

55

Gentica bacteriana

Transduccin: Ciclo lisognico

http://www.biologia.edu.ar/adn/adntema3.htm

56

Gentica bacteriana

o Conjugacin: Una bacteria donadora se pone en

contacto por medio de un pili con una bacteria
receptora para pasar material gentico. Realizado
mediante la replicacin de crculo rodante

Conjugacin en una cepa de Escherichia coli (M.E

27.700x)
Dennis Kunkel, usada con permiso.

http://www.biologia.edu.ar/animaciones/temas/adn_y_sintesis/conjugacion2.html

57

Gentica bacteriana

http://www.biologia.edu.ar/microgeneral/micro-ianez/27_micro.htm

58

Gentica bacteriana

Transposones o elementos transponibles:

Son elementos genticos que contienen varios kpb de
ADN, incluyendo la informacin necesaria para migrar
o pasa de un locus gentico o regin gnica a otra.

http://images.google.com.mx/imgres?imgurl=http

59

Gentica bacteriana

Transposones simples: solo llevan regiones de insercin.

Transposones complejos: portan genes para funciones
especializadas y sus secuencias de insercin en los extremos.

o No se autorreplican. Depende del replicn donde se inserta.

o La especificidad en la secuencia del sitio de insercin es
escasa, debido ha esto, se puede observar un patrn de
insercin aparentemente aleatorio, incluso rompiendo genes,
provocando mutaciones.
60