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MARZO 2010
reticulocitos bajo el
microscopio
MORFOLOGIA
Los reticulocitos son clulas anucleadas predecesoras de los eritrocitos con la diferencia de que poseen grnulos
de ribosomas y algunas mitocondrias que les son tiles para sintetizar el 35% de la hemoglobina restante.
Este tipo de clulas esta en circulacin perifrica aproximadamente un da para convertirse posteriormente en un
hemate maduro que cumplir con todas las funciones biolgicas de estas clulas.
A diferencia de los hemates o glbulos rojos maduros, los reticulocitos an poseen ARN.
utilidad e interpretacin
La determinacin de los reticulocitos permite evaluar la produccin eficaz de clulas rojas por la mdula sea.
Su utilidad real es conocer la capacidad de respuesta de la mdula en aquellos casos en los cuales hay
disminucin de las clulas rojas en sangre perifrica y es necesario que la mdula aumente su produccin para
as compensar el dficit de dichas clulas.
Esta informacin es de fundamental importancia en el diagnstico de anemias por falla en la produccin (anemia
aplstica) y por aumento en la destruccin (anemia hemoltica)
Los recuentos bajos de reticulocitos, sugieren una eritropoysis defectuosa como en los casos de anemia
aplsica, crisis aplsica de anemias hemolticas y en la infiltracin de la mdula sea por clulas tumorales.
Por lo tanto la evaluacin de los reticulocitos se constituye en una herramienta fundamental el diagnstico de las
anemias y de algunas entidades cuya gnesis involucra la produccin eritroide en la mdula sea.
El conteo de reticulocitos se puede dar por tincin con un colorante especial para reticulocitos de naturaleza
basofila y por el cual las mitocondrias y ribosomas tendrn afinidad y los mostrara en el frotis de un color azul
moteado.
Valores de referencia (Valor relativo): Hombres 0.6 2.6% Mujeres 0.4 2.4% Recin nacidos 2.5 6.5%
(desciende nivel adultos a la segunda semana)
Materiales
Sangre total con anticoagulante EDTA.
Tubos de ensayo.
Goteros.
Azul de cresil brillante.
Bao Mara 37
Lminas.
Aceite de inmersin.
Procedimiento
Colocar en un tubo de ensayo 2 gotas de sangre previamente mezclada.
Agregar 2 gotas de colorante filtrado.
Mezclar suavemente.
Incubar por 10 - 15 minutos en el bao Mara a 37. Al finalizar los 15 minutos mezclar bien el contenido del tubo.
Realizar extendidos en lmina y dejas secar a temperatura ambiente.
Colocar el extendido sobre la platina del microscopio y enfocar en bajo poder (10X) para localizar el rea donde los glbulos rojos no estn superpuestos.
Pasar al objetivo de 100X cuidadosamente y agregar una gota de aceite de inmersin.
Iniciar el conteo. Las clulas rojas toman una coloracin griscea verdosa. El RNA presente en los reticulocitos se colorea de azul intenso.
Contar todas las clulas rojas presentes en el campo seleccionado y luego enumere los reticulocitos existentes, localizar un segundo campo y continuar hasta que todos los reticulocitos existentes en 1000 clulas rojas hayan sido contadas.
Observaciones
El recuento se puede realizar en sangre capilar.
Los extendidos se pueden realizar en laminilla.
El azul de cresil brillante debe filtrarse antes de usarse.
Se recomienda repetir el conteo cuando se obtienen valores por encima del 3%.
IPR > 3, indica aumento de actividad eritropoytica medular (anemia regenerativa)
IPR < 2, indica escasa actividad eritropoytica.
Nota:IPR =% reticulocitos corregido
mdula sea
gracias!