BRUCELLA

MICROBIOLOGIA Y
PARASITOLOGIA
DR. LEOPOLDO PORTILLO
BAÑUELOS CHÁVEZ KARLA VANESA
RAMIREZ VEGA RICARDO
 BRUCELLA
Es un patogeno zoonótico que pertenece a
las α-proteobacteria
 David Bruce en 1887 aislo el
germen causal de la fiebre
de malta (brucelosis)
“Micrococcus melitensis)
 Bernhard Bang en 1897 aislo
“Bacillus Abortus” de la
enfermedad de Bang

 Sus nombres alternativos son:
o Fiebre de Malta
o Fiebre ondulante
o Fiebre de Chipre
o Fiebre de Gibraltar
o Fiebre Mediterránea

CARACTERISTICAS
GENERALES
 Cocobacilos
 Gram negativos
 0.5 x 0.6 a 1.5 µm
 Agrupados en parejas o cadenas cortas
 Aerobios ( B. Abortus y b. ovis requieren

CO2)
 Exigentes nutricionalmente
 No fermentadores
 Crecimiento lento
 No esporulados

 Inmoviles
 Oxidasa +
 Catalasa +
 Ureasa +
 Patógeno intracelular
 Sobreviven en células fagociticas
 Perpetuan a través de la infección de sus
huéspedes naturales
 Medios de cultivo complejos
 No plasmidos
 No encapsulado
 Las colonias adoptan morfologías lisas
(traslucidas, homogéneas) y rugosas
(opacas, granulares o pegajosas)
determinadas por el antígeno O del LPS de
la pared celular.
 El antisuero frente a una forma no produce
reacción cruzada con la otra
 Tienen una porción relativa de epítopos
antigénicos A y M que residen en la cadena
polisacaridica O del LPS liso
ESPECIES DE IMPORTANCIA
MEDICA
 B. melitensis: cabras y ovejas
 B. abortus:ganado vacuno y bisonte
americano
 B. suis: ganado porcino, renos y caribu
 B. canis: perros, zorros y coyotes
 B. ovis
 B. neotomae

MECANISMOS DE
VIRULENCIA
 Contiene lipopolisacárido liso (LPS) en la pared
celular.
 No produce ninguna exotoxina y su endotoxina
es menos toxica q la de otros bacilos
gramnegativos.
 Los genes de virulencia en el operon virB.
 Patógeno intracelular resistente al efecto
bactericida del suero y a la destrucción por
fagocitos.
 Su morfología lisa de las colonias se asocia a
virulencia.
 Es rica en fosfatidilcolina lo que la hace
resistente a la polimixina B
PATOGENIA
 Las especies de Brucella son
patógenas intracelulares
facultativas, su virulencia está
relacionada con la capacidad que
poseen para:
 resistir el efecto bactericida de los
componentes del suero normal
 adherirse, penetrar y multiplicarse en
una gran variedad de células
eucarióticas tanto fagocíticas como
no fagocíticas.
 La localización intracelular las
mantiene protegidas de los
antibióticos y de factores
bactericidas del plasma como
complemento y anticuerpos, lo que
determina la naturaleza crónica de la
infección.
 Afecta al hígado, el bazo, la médula
ósea, los ganglios linfáticos y los
riñones.
 Exposicion infecciosa minima de 10-
100 microorganismos
ENFERMEDADES
 Sintomatología poliforma, cuadros dispares y
con tendencia a recidivas (5%) durante los 3
primeros meses, pero se pueden ver hasta los
6.
 Es frecuente que se desarrolle en un órgano
 Brucelosis aguda: el periodo de incubación
oscila entre 7 y 21 dias pero se puede
prolongar varios meses.
 En algunos casos es asintomática, pero la clínica
mas destacada es fiebre ondulante, escalofrio,
sudor, astenia, anorexia, perdida de peso,
polomialgias y poliartralgias
 Hepatoesplenomegalia 20-30%
 Adenopatías cervicales o inguinales 12-20%
  Brucelosis localizada: puede afectar cualquier
órgano(s)
 Osteomielitis: dorsalgia o lumbalgia. Se detecta
por grammagrafia osea y/o radiografias
locales. Presenta supuraciones al exterior de
material purulento proveniente de la
articulación afecta, en ocasiones con abscesos
paravertebrales
 Artritis: rodillas
 Abcesos esplénicos: que se calcifican
 Afecciongenitourinaria: no es muy frecuente.
orquiepididimitis unilateral, ptostatitis brucelar
o nefritis intersticial aguda. Produce
granulomas no caseosos y calcificaciones
 Alteraciones neurológicas: rara 2-5%. Mielitis,
meningoencefalitis, radiculitisy neuropatía
periférica. En liquido cefalorraquídeo
pleocitosis linfocitaria, aumento de proteínas y
glucosa

  Endocarditis: 1-2% causa mas frecuente de
mortalidad por este cuadro. Valvula aortica
81%. Pueden aparecer embolias arteriales
 Alteraciones del sistema respiratorio: tos y
expectoración. Raros casos derrame o
empiema pulmonar
 Alteraciones en la piel: erupciones
transitorias y erupción papulo-pustulosa
local
 Brucelosis crónica: dura mas de un año,
después de establecido el diagnostico.
 Síntomas inespecíficos similares al síndrome
de fatiga crónica
 Brucelosis animal: asintomática o como
orquiepidimitis, mastitis y abortos
espontaneos

EPIDEMIOLOGIA
 Infecciones de
distribucion universal
 Enfermedad endemica
mas frecuente en
Latinoamerica, Africa, la
cuenca mediterranea,
Oriente Medio y Asia
occidental
 500,000 casos descritos
al año
 Sin incidencia estacional
 Posible utilizacion como
arma biologica

FUENTE: Sist em a Único de Inform ación para la Vigilancia Epidem iológica. Información preliminar. Procesó: DGE.
& Incluye sólo casos confirmados.

 Produce enfermedad leve o asintomatica en
el antifrion natural
 Infecta organos que contienen eritirol
(azucar metabolizado x cepas de Brucella)
como la mama, el utero, la placenta y el
epididimo
 Puede producir esterilidad, abortos o estado
de portador asintomatico.
 Abunda en leche, orina y productos del
parto
GRUPOS DE RIESGO
 Sujetos que consumen productos
lacteos no pasteurizados
 Personas en contacto directo con
animales infectados (granjeros,
veterinarios, etc)
 Personal de laboratorio presenta
riesgo por contacto directo o
inhalacion se adquiere mediante
contacto directo, ingestion o
innalacion

DIAGNOSTICO
 Parte de la sospecha clínica
 Aislamiento del germen causal por
hemocultivos (10 dias), deben
mantenerse 6 semanas
 Medio idel de crecimiento: bifásico
de Ruiz Castañeda:
 La microscopia no es sensible.
 Los cultivos (hemocultivos,
mielocultivos, tejido infectado en
caso de infección localizada) son
sensibles y específicos cuando se
incuban durante un periodo
prolongado (entre 3 días y dos
semanas).
 Los estudios serológicos se emplean
para confirmar el diagnóstico
clínico; incremento de cuatro
veces del título o un único título
1:16. Existe reactividad cruzada
con otras bacterias
MEDIOS DE CULTIVO
 Al ser microorganismos intracelulares,
necesitan requerimientos nutricionales
complejos para crecer.
 Hay Brucellas que se van a desarrollar bien
en medios clásicos como AS y ACH.
 Los medios de cultivo utilizados son:
 Medios líquidos: Caldo tripcasa-soja;
Caldo Brucella.
 Medios sólidos: Agar tripcasa-soja; Agar
Brucella.
 Medios selectivos (contienen
antibióticos) : Modificado Thayer-
Martin.
 A todos los enfermos sospechosos de
infección por Brucella se les debe
realizar hemocultivos seriados, es decir,
series de hemocultivos en distintos
tiempos.
TECNICAS DE
HEMOCULTIVO:
 Técnica de Castañeda:
 Se utiliza un medio bifásico (liquido-solido) en el mismo frasco.
El medio liquido permite el enriquecimiento de las Brucellas
que se encuentran en la sangre y el medio sólido sirve para
las resiembras.
 El frasco se debe incubar a 35-37ºC en posición vertical. A las
48 horas si no se observa crecimiento, el frasco se inclinara
para que la fase liquida impregne el medio sólido y se incuba
nuevamente en posición vertical. El hemocultivo se observa
cada 4-5 días hasta un total de 30 haciendo periódicamente
cultivos ciegos en medios sólidos.
 Isolator:
 Sistema de lisis-centrifugacion en el mismo tubo. La sangre
inoculada se lisa por acción de detergentes y se somete a
concentración por centrifugación. El sedimento se siembra en
medio sólido.
 Las muestras procedentes de abcesos o tejidos se siembran en
cualquier medio sólido apto para el crecimiento de Brucella.
 Diagnóstico Serológico
 Rosa de Bengala : Consiste en una
aglutinación en porta con brucelas
suspendidas en tampón lactato
coloreado con Rosa de Bengala. Detecta
anticuerpos para el LPS (A+M)
 Se realiza con el suero sin diluir
 Presenta escasisimos fenomeno de prozona,
por lo que su + confirma infeccion
 Seroaglutinación : Puede realizarse en
un tubo o en placa de microtitulación
y detecta anticuerpos para el LPS.
Esta es positiva si presenta títulos
superiores a 1/512.
 Test de Coombs anti - Brucella :
Detecta IgG con ausencia de poder
aglutinante
 Requiere centrifugacion y lavados de los
tubos negativos de la aglutinacion,
adicion de globulina anti-humana,
incubacion y lectura
 + cuando supera al obtenido con la
aglutinacion al – en 2 diluciones
 ELISA: Esta prueba tampoco nos ofrece
un criterio definido sobre la
existencia o ausencia de la
actividad de la enfermedad. La
valoracion de los resultados debe
ser individualizada (comparando las
concentraciones de las diferentes
clases de anticuerpos)
 Mide por separado lgM, IgG e IgA
 Fase aguda hay aumento de IgM e IgG
(IgM desciende con la evolucion)
 IgA = valores elevados durante toda
la enfermedad
 Fijación de Complemento: Detecta
anticuerpos específicos frente a
Brucella, capaces de fijar el
complemento. Menos utilizada pero
muy especifica
 Se detecta mas tardiamente que la
aglutinante
 Persite durante 12 – 13 meses
 RIA: Es un método sensible y
específico, pero caro.
 PCR: Deteccion de brucella en
diferentes muestras
 Se usa para determinar la especie
infectante y para estudios
epidemiologicos
 .
TRATAMIENTO
 Gentamicina, 240mg/dia via intramuscular;
durante los 1ros 7 dias
 Doxiciclina, 100mg/12h via oral,
durante 45 dias
 Trimetoprimsulfametoxazol en niños
 Rifampicina en embarazadas
  Dependiendo de la existencia de fiebre o
dolores, se pueden asociar
antimicrobianos, antiinflamatorios no
esteroideos
 Fluoroquinolonas, macrolidos, penicilinas y
cefalosporinas carecen de eficacia o bien
presentan una actividad impredecible

PREVENCION
 Vacunación del ganado susceptible
 Pasteurización de leche y productos lacteos
 Medidas higienicas para manipular animales
 A través del control de la enfermedad en el
ganado

 Identificacion sistémica y destrucción de
reses infectadas
 Medidas de seguridad adecuadas en el
laboratorio
 Utilizar ropa protectora por parte de los
trabajadores del matadero



 GRACIAS!!!